Плазмолифтинг не применяется для: Плазмолифтинг для лица | Бионика

Содержание

Плазмолифтинг – инъекция красоты | Многопрофильный медицинский центр в Тюмени — «Авиценна»

Плазмолифтинг — это инновационная технология омоложения на клеточном уровне, которая объединила в себе многолетний международный опыт.

 

Метод аутологичного лечения сывороткой, обогащенной тромбоцитами, применяется в медицине для ускорения заживления ран и во время операций на суставах уже более 15 лет, что является залогом успеха и полной гарантией безопасности. С 2006 года плазмолифтинг с успехом применяется для омоложения кожи лица в Великобритании, Европе, Японии и Австралии.

 

В нашей клинике данный метод успешно применяется уже несколько лет в косметологии, стоматологии, гинекологии, урологии и ортопедии.

 

Действие плазмолифтинга основано на активации естественных механизмов омоложения. Тромбоциты несут на своей поверхности различные ростовые факторы, поэтому при подкожном введении обогащенной ими плазмы способны эффективно стимулировать продукцию коллагена в дерме.

Результат виден сразу после процедуры и длится значительно дольше, нежели от других методик омоложения. Как результат устраняются мелкие «сеточки» морщин, выравниваются средние и глубокие складки кожи, повышается упругость и увлажненность.

 

 

Данный метод также эффективен для стимуляции роста и улучшения структуры волос.

 

С помощью безоперационного плазмолифтинга можно достичь:

 

·   уменьшения морщинок вокруг глаз

 

·   подтяжки щек и средней части лица

 

·   подтяжки шеи

 

·   улучшения состояния кожи в области декольте

 

·   омоложения и лифтинга кожи рук и других частей тела

 

·   стимуляции роста волос на голове

 

Для достижения наилучших результатов рекомендуется пройти 3 процедуры с интервалом в 4-6 недель. Для поддержания эффекта курс можно повторять раз в 1-2 года.

 

Молодость у нас в крови

 

Представьте себе, что у вас появилась возможность поворачивать время вспять, и вы с каждым днем становитесь все моложе и бодрее: ваша кожа подтягивается, обретает  былую эластичность и упругость, волосы становятся гуще и более блестящими, суставы перестают болеть, уходит тяжесть и боль, весь организм обновляется и вы чувствуете бодрость и легкость. А теперь представьте себе, что все это может произойти с вами прямо сейчас и для этого не нужно изобретать машину времени.

 

Механизм возвращения здоровья и молодости скрыт в нашем теле, и его можно запустить уже сейчас! Секрет омоложения находится в крови и заложен в нас самой природой, которая позаботилась о том, чтобы внутри каждого живого организма был возобновляемый источник здоровья. Все дело в маленьких клетках крови — тромбоцитах, которые содержат особые белки, способные стимулировать восстановление клеток. Но обо всем по порядку.

 

Магия крови

 

Еще древние лекари предполагали, что кровь обладает некими магическими свойствами, и были почти правы. Кровь состоит из межклеточного вещества — плазмы — и клеточных элементов, основные из которых эритроциты, лейкоциты и тромбоциты. В ходе изучения крови выяснилось, что каждая клетка крови полифункциональна и имеет свое назначение: эритроциты обеспечивают дыхание тканей, лейкоциты защищают организм от инфекций и других вредных воздействий, а тромбоциты участвуют в процессах свертывания крови.

Также было установлено, что тромбоциты играют важнейшую роль в заживлении и регенерации поврежденных тканей, высвобождая факторы роста, регулирующие и стимулирующие деление, рост и выживание клеток. Факторы роста необходимы для клеточного созревания и нормального клеточного цикла. Симбиоз факторов роста  ответственен за реконструкцию кровеносных сосудов травмированной области, строительство новой ткани (эпителиальной, хрящевой, соединительной, мышечной, нервной) и остановку кровотечения.

 

Революционное открытие российских ученых

 

Используя уникальную способность факторов роста влиять на регенеративные процессы, российские ученые д.м.н. Ахмеров Р.Р. и к.м.н. Зарудий Р.Ф. разработали медицинскую методику, которую без преувеличения можно назвать современным «эликсиром молодости». Плазмолифтинг — именно такое название дали ученые новой методике, по сути, является усовершенствованной формой издавна известной технологией лечения плазмой — аутоплазмотерапией.

 

Плазмолифтинг базируется на принципах PRP-терапии (Platelet Rich Plasma — богатая тромбоцитами плазма), то есть использует выделенные из крови элементы: гормоны, белки и витамины, которые в комплексе с тромбоцитами ускоряют восстановление тканей и обновление клеток.

 

В ходе исследований ученые обнаружили, что при введении тромбоцитарной аутоплазмы в поврежденный участок форсируются процессы регенерации кожи. Кожа при этом становится более увлажненной, эластичной, подтянутой, на ней уменьшается количество мимических морщин и пигментных пятен. И не смотря на то, что изначально метод на основе PRP-терапии разрабатывался для нужд стоматологии, этот косметологический эффект натолкнул Рената Рашитовича Ахмерова и Романа Феликсовича Зарудия продолжить изучение влияния тромбоцитарной плазмы на здоровье человека, что привело к значительным открытиям применения Плазмолифтинга в лечении заболеваний в разных областях медицины. 

 

Как работает Плазмолифтинг

 

Суть метода Плазмолифтинг заключается в инъекционном введении тромбоцитарной аутоплазмы, что позволяет запустить процесс клеточного обновления.

В ходе процедуры у пациента забирается от 9 мл до 36 мл (в зависимости от назначения). Потеря столь незначительного количества крови никак не сказывается на самочувствии пациента и не создает препятствий для полноценного функционирования организма.

 

Для получения плазмы, обладающей высокими терапевтическими свойствами, необходима ее специальная обработка: центрифугирование крови в специализированных биотехнологичных пробирках марки Plasmolifting™.

 

Сертифицированные пробирки Plasmolifting™ способны качественно разделить кровь на лейкоцитарно-эритроцитарную массу и тромбоцитарную аутоплазму. Поскольку тромбоцитарную плазму получают из собственной крови пациента, обеспечивается полная биосовместимость инъекции с организмом, исключающая проявление иммуногенных и аллергических реакций и вероятность отторжения.

 

Сегодня метод Плазмолифтинг получил признание у врачей и пациентов многих стран.

Его ценят за ряд преимуществ, среди которых:

 

·  удобство и простота в применении;

 

·  отсутствие необходимости покупать дорогостоящее медицинское оборудование;

 

·  отсутствие периода реабилитации после прохождения процедуры;

 

·  нетоксичность, безопасность и натуральность процедуры;

 

·  сведенный к минимуму риск аллергических реакций и побочных эффектов;

 

·  отсутствие необходимости хирургического вмешательства;

 

·  возможность совмещения с другими видами терапии;

 

·  минимум противопоказаний;

 

·  широкое использование метода в разных областях медицины.

 

Плазмолифтинг позволит Вам снова почувствовать себя молодыми и здоровыми, благодаря активации собственных скрытых резервов человеческого организма, которые даны нам природой и которые сегодня доступны каждому человеку в мире!

 

Плазмолифтинг | ЕвроМедика

Плазмолифтинг лица и волос – что это такое, показания, преимущества метода и результаты Если вас интересует, что такое плазмолифтинг (PlasmaLift), знайте – это современная «процедура красоты» с отличным омолаживающим эффектом. Малотравматичная методика позволяет без хирургического вмешательства, применения лазера воздействовать на глубокие слои кожи. Микроинъекции собственной плазмы активизируют внутренние ресурсы организма. Это инновационный метод, один из самых востребованных в безоперационной пластике различных участков тела. Всё гениальное просто. Это выражение точно характеризует современную методику. Активный процесс восстановления клеток запускается благодаря введению тромбоцитарной аутоплазмы.

Краткая характеристика метода: после специальной обработки плазма насыщается минеральными элементами, аминокислотами, витаминами группы В, D, E, A, C, K. Количество тромбоцитов находится почти на том же уровне, что и в периферической крови, эритроциты отсутствуют; при взаимодействии обогащённой плазмы с пластами клеток, выстилающими кровеносные сосуды, выделяются особые компоненты. Альфа-гранулы проникают в повреждённые места, насыщают клетки факторами роста; результат – активизация процесса восстановления, заметный эффект через минимальный промежуток времени.

 

В отличие от мезотерапии, для инъекции применяется не «коктейль» из витаминов, минералов, аминокислот или лекарственных средств, а плазма, добытая из собственной крови пациента. При плазмолифтинге риск осложнений, отторжения чужеродных компонентов минимален. Схема процедуры: забор венозной крови, очищение в специальном аппарате; приготовление плазмы, насыщение полезными веществами; введение обогащённой аутоплазмы при помощи шприца.

Плазмолифтинг широко применяется не только для омоложения кожи лица, но и для пробуждения луковиц волос при выпадении, слабом росте волос.

 

Преимущества способа Несмотря на высокую стоимость, процедура востребована клиентами разных возрастных категорий. Привлекает высокая эффективность метода. Положительные стороны плазмолифтинга: риск заражения при введении аутоплазмы сведён практически к нулю; организм спокойно воспринимает вещество, полученное из крови пациента, отсутствует иммунный конфликт; аллергические реакции практически не возникают; для достижения заметных результатов требуется несколько сеансов, иногда, всего 2–3; заметный эффект после курса сохраняется до двух лет; практически отсутствует период реабилитации, побочные эффекты возникают редко. к оглавлению ↑ Показания Безоперационное омоложение рекомендовано при появлении: дряблой кожи; ранних морщинок; рубцов, шрамов, растяжек после родов; некрасивых складок после быстрого похудения; избыточной пигментации; шелушения, излишней сухости эпидермиса; возрастных изменений на коже; тёмных кругов под глазами; алопеции; заметной площади облысения; слабости, ломкости волосяных стержней; перхоти, сухой/жирной себорее, сильном зуде кожи головы; заметного ухудшения качества шевелюры.

Инновационная процедура нужна: при реабилитации после глубокого пилинга; при нарушении целостности верхнего слоя кожи; для скорейшего восстановления повреждённого эпидермиса после солнечных ожогов.

Плазмолифтинг в Троицке, цены — записаться на плазмолифтинг лица

Косметология постоянно развивается и использует новые методы для улучшения процессов регенерации кожи. В нашей клинике мы предоставляем услуги, направленные на сохранение красоты и молодости кожи и восстановление густоты волос. Один из эффективных методов, который мы предлагаем своим клиентам, – плазмолифтинг.
Плазмотерапия представляет собой введение плазмы собственной крови пациента в проблемные участки кожи – лицо, шею, руки, бедра.

Перед введением плазма обогащается тромбоцитами для достижения эффекта регенерации и омоложения. Плазмотерапия считается довольно молодым методом, но ее результаты весьма убедительны.

Плазмолифтинг лица в Троицке, клиника ELEOS

Плазмолифтинг применяется для коррекции возрастных изменений лица и области декольте, для лечения рубцов после угревой болезни, для восстановления кожи после пилинга и других повреждений.
Эффективность плазмолифтинга при выпадении волос доказана многими пациентами. В этом случае плазма вводится в кожу головы, осуществляя воздействие на кровообращение волосистой части головы, повышая кожный иммунитет. Плазмотерапия уменьшает проявления себореи, улучшает работу сальных желез.
Плазмолифтинг лица применяется в таких случаях, как:

  • снижение упругости и эластичности кожи;
  • сухая кожа;
  • акне;
  • пигментные пятна на лице;
  • ускорение старения кожи вследствие стресса;
  • морщинки, рубцы;
  • лицо, поврежденное химическим или лазерным пилингом.

Плазмолифтинг лица состоит из следующих этапов:

  • забор крови из вены клиента; для процедуры необходимо от 20 до 100 мл, такая кровопотеря запустит процесс обмена в организме и станет дополнительным толчком к запуску процессов регенерации;
  • с помощью специальной центрифуги кровь расслаивается на фракции;
  • плазму вводят в проблемные участки кожи; при необходимости перед этим кожу смазывают обезболивающим кремом местного действия.

Вся процедура длится около часа. Для стойкого эффекта плазмолифтинг проводят курсом из 4-5 сеансов, перерыв между которыми составляет 7-10 дней. Плазмолифтинг лица дает визуальный эффект уже через неделю после первой процедуры, действие курса длится от года до полутора. Кожа после процедур обретает свежий вид, ровный цвет, гладкость и упругость.

Записаться на предварительную консультацию можно онлайн или по телефону +7 (499) 370-44-08.

Что такое плазмолифтинг

Перед началом плазмолифтинга врач берёт у пациента венозную кровь (всего необходимо 20-120 мл), затем пробирки с кровью раскручиваются при помощи центрифуги. Отделившаяся таким образом плазма становится материалом для инъекций.

Главное преимущество плазмолифтинга – то, что риск аллергических реакций сведён к минимуму, ведь вам вводят не инородный препарат, а собственную плазму. Иногда к ней добавляют дополнительные тромбоциты или гиалуроновую кислоту, но это всегда остаётся на усмотрение пациента.

Противопоказания к процедуре – беременность, начало менструального цикла, недавний приём алкоголя или чрезмерно жирной пищи, а также инфекционные заболевания. Анализы на качество и состав крови перед плазмолифтингом не проводятся, поэтому лучше отложить процедуру, если вы только-только выписались с больничного.

Рекомендуется делать плазмолифтинг курсами по 2-4 процедуры с интервалом в 1-2 недели. Эффект от плазмолифтинга сохраняется на протяжении 8-12 месяцев.

Перед началом плазмолифтинга врач берёт у пациента венозную кровь (всего необходимо 20-120 мл), затем пробирки с кровью раскручиваются при помощи центрифуги. Отделившаяся таким образом плазма становится материалом для инъекций.

Главное преимущество плазмолифтинга – то, что риск аллергических реакций сведён к минимуму, ведь вам вводят не инородный препарат, а собственную плазму. Иногда к ней добавляют дополнительные тромбоциты или гиалуроновую кислоту, но это всегда остаётся на усмотрение пациента.

Противопоказания к процедуре – беременность, начало менструального цикла, недавний приём алкоголя или чрезмерно жирной пищи, а также инфекционные заболевания. Анализы на качество и состав крови перед плазмолифтингом не проводятся, поэтому лучше отложить процедуру, если вы только-только выписались с больничного.

Рекомендуется делать плазмолифтинг курсами по 2-4 процедуры с интервалом в 1-2 недели. Эффект от плазмолифтинга сохраняется на протяжении 8-12 месяцев.

Услуги Плазмолифтинг в гинекологии в Нижнем Тагиле

С течением времени наш организм неизбежно меняется. Специфические возрастные коррекции происходят, в частности, и в интимных областях жизни. К счастью, современная гинекология позволяет безболезненно и эффективно решить многие «женские проблемы».

Плазмолифтинг – процедура инъекции пациенту его собственной плазмы крови, обогащенной тромбоцитами – запускает в тканях процесс регенерации. В результате, без таблеток и сильнодействующих лекарств, наш организм находит путь к здоровью.

Что такое плазмолифтинг и как он работает

В основе процедуры плазмолифтинга лежит способность нашего организма к самолечению. В 1980-х годах ученые выяснили, что если в пораженные ткани ввести плазму крови, обогащенную тромбоцитами (т. е. увеличить их концентрацию в 5 раз от нормального соотношения), в проблемных зонах запускаются процессы регенерации.

Почему так происходит? Тромбоцитный «коктейль» запускает в организме цепочку благотворных реакций. При взаимодействии с тромбоцитами в мягких тканях выделяются так называемые «факторы роста» – естественные соединения, способные стимулировать рост, пролиферацию или деление клеток.

Реагируя на инъекцию, организм включает режим локального омоложения –стимулируется образование коллагена, эластина и межклеточного вещества, активизируется метаболизм в клетках кожи, нормализуется водный и кислородный баланс.

Одним из главных плюсов плазмолифтинга является безопасность. Поскольку клиенту вводится концентрат его собственных клеток, исключается негативная реакция иммунной системы. Процедура не приводит к развитию аллергических осложнений и отторжению тканей.

Противопоказания к плазмолифтингу существуют: это системные заболевания крови, онкологические и инфекционные заболевания. Во время беременности и периода лактации от инъекций плазмы также необходимо воздержаться.

Плазмолифтинг в гинекологии: нет инфекциям и воспалениям

Новая технология нашла широкое применение в медицине, помогая врачам уменьшить кровопотери во время хирургических вмешательств. В дальнейшем, процедура использования обогащенной плазмы получила распространение в стоматологии, косметологии и гинекологии.

Для врачей, специализирующихся на женских проблемах, плазмолифтинг открыл новые возможности в борьбе с инфекциями и воспалениями. Некоторые гинекологические болезни, такие, как хронический эндодермит (воспаление внутреннего слоя матки) или хронический эндоцервицит (воспаление цервикального канала шейки матки) до появления плазмолифтинга считались трудноизлечимыми. Сейчас же достаточно пройти курс лечения, чтобы полностью забыть о неприятных ощущениях.

Список гинекологических заболеваний, которые можно вылечить с помощью инъекций обогащенной плазмы, обширен. Плазмолифтинг применяют при возникновении:

  • Вагинитов
  • Лейкоплакии
  • Эрозии
  • Краурозов вульвы
  • Урогенитальных расстройств
  • Воспалении органов малого таза

Плазмолифтинг также может помочь женщинам, испытывающим дискомфорт в интимной сфере. Процедура применяется для улучшения ощущений в половой жизни – при аноргазмии, признаках раннего климакса, гормональных нарушениях (например, вызванных приемом оральных контрацептивов).

В широком смысле, курс плазмолифтинга помогает женщинам в возрасте «40 +» восстановить чувствительность интимных мест.

Как происходит процедура плазмолифтинга в гинекологии

Перед началом процедуры пациент проходит клинико-лабораторное обследование: осмотр, исследование на половые инфекции, общий и биохимический анализ крови, анализ на гепатит и ВИЧ.

После этого аутоплазму с помощью микроинъекций вводят в слизистые ткани шейки матки, вульвы и влагалища (в зависимости от варианта лечения). Процедура безболезненна, не требует наркоза и занимает, в среднем, не больше 15 минут.

Начало курса, как правило, приходится на первую половину менструального цикла.

По завершении лечения, женщинам необходимо соблюсти ряд ограничений. На 2-3 недели следует воздержаться от половой жизни, а также исключить посещение соляриев, бассейнов, бань или саун.

Продолжительность курса плазмолифтинга подбирается докторами нашей клиники индивидуально для каждого пациента. Курс состоит из 3-5 процедур с интервалом между ними в 2-3 недели (в зависимости от медицинских показаний и целей клиента).


Записаться на процедуру плазмолифтинга можно по телефону::
+7 (343) 287 88 88

Ошибка, ID информационной системы не указан!

Записаться к гинекологу

Почему клиенты довольны нашей работой

Врачи высокой квалификации

Наши врачи не только обладают высокой квалификацией в диагностике и лечении, но и отнесутся к вам с максимальным участием.

Удобные комплексные программы

Чтобы вы могли все предусмотреть и сэкономить при этом бюджет и время, мы разработали специальные комплексные программы.

Современные методы диагностики

Разнообразие применяемых нами методик диагностики позволяет выявить болезнь точно и быстро.

Эффективные подходы в лечении и профилактике

Обращаясь к нам, вы можете быть уверены в том, что лечение отвечает последним мировым стандартам

Плазмолифтинг в Москве, цены у врача-косметолога в ЦАО, Хамовники Альфа-Центр Здоровья

Плазмолифтинг — малотравматичная омолаживающая процедура. Эффективность методики сравнима с эффектом от инъекций ботокса, биоревитализации, срединного пилинга. При этом плазмолифтинг не вызывает аллергических реакций и не имеет периода реабилитации.

Клиника «Альфа-Центр Здоровья» приглашает сделать плазмолифтинг в Москве. Перед прохождением процедуры можно получить персональную консультацию косметолога по доступной стоимости. Медицинский центр работает ежедневно.

Суть метода

Плазмолифтинг (plasmolifting, PRP) — инъекционный метод подкожного введения плазмы, обогащенной тромбоцитами собственной крови пациента. Плазма содержит вещества, которые участвуют в строительстве новых клеток любого органа — коллаген и фибрин. Инъекции активизируют процессы регенерации независимо от области применения, будь то плазмолифтинг кожи головы, лица или тела.

В косметологии используется тромбоцитарная аутоплазма, не имеющая эритроцитов в составе. Количество тромбоцитов в такой плазме практически равно их количеству в периферической крови. Тромбоцитарная аутоплазма богата аминокислотами, пептидами, витаминами и минеральными элементами. Одновременно с этим она является естественным компонентом человеческого организма, а потому не вызывает аллергической реакции.

Показания

Плазмолифтинг в косметологии применяется в качестве омолаживающей процедуры. Он помогает справиться с мелкими морщинами, ухудшением состояния кожи и ее преждевременным опущением. Метод используется в лечении псориаза, атопического дерматита, экземы, себореи.

К числу показаний также относятся:

  • юношеские угри;
  • постакне;
  • сухость и шелушение;
  • сильное облучение УФ-лучами;
  • последствия лазерного или химического пилинга;

Плазмолифтинг для лица — не единственный способ применения метода. Процедура может применяться при истончении и выпадении волос, заболеваниях кожи головы. Она используется для борьбы с целлюлитом и омоложения кожи тела.

В ортопедии и травматологии плазмолифтинг используется для ускорения реабилитации. Он помогает восстановить двигательные функции суставов, быстрее вернуться к активной жизни после растяжений связок, вывихов и других травм. Чтобы лечить заболевания опорно-двигательного аппарата еще эффективнее, плазмотерапию используют как дополнение к УВТ (ударно-волновой терапии), лечебному массажу и медикаментозной терапии.

Противопоказания

Перед проведением процедуры необходимо проконсультироваться с врачом. Он проверит наличие противопоказаний к плазмолифтингу.

Метод не применяется при таких заболеваниях и патологических состояниях:

  • сахарный диабет;
  • ВИЧ;
  • вирусный гепатит;
  • аутоиммунные заболевания;
  • нарушения свертываемости крови;
  • инфекции в острой форме;
  • герпес
  • злокачественные новообразования.

Плазмолифтинг противопоказан в период беременности и грудного вскармливания. Процедура не проводится при наличии аллергии на гепарин, а также во время приема некоторых медикаментов.

Порядок проведения процедуры

Лечение плазмолифтингом состоит из нескольких этапов. Вначале у пациента берут венозную кровь, затем подвергают ее процедуре центрифугирования: это приводит к отделению эритроцитов. Так выделяется тромбоцитарная аутоплазма желтого цвета. Спустя 10-15 минут ее можно использовать для подкожных инъекций на определенном участке.

Кожу обрабатывают специальным анестезирующим кремом, чтобы уменьшить болезненные ощущения. Затем при помощи тонкой иглы папульным методом вводят препарат.

Плазмолифтинг проводится только амбулаторно, при участии косметолога или другого медицинского специалиста с нужным уровнем квалификации. В противном случае процедура может быть не только малоэффективной, но и опасной.

Количество сеансов

Длительность сеанса плазмолифтинга составляет не более часа. Как правило, для достижения ощутимого результата нужно пройти курс из 3-5 недорогих процедур. Цена рассчитывается с учетом стоимости каждого сеанса и общего их количества.

Интервал между процедурами — около недели. Повторный курс проводят раз в 1-2 года.

Каких результатов ожидать

После сеансов плазмолифтинга кожа омолаживается. Она становится более гладкой и подтянутой, процессы старения замедляются, овал лица приобретает четкость. Плазмолифтинг приводит к исчезновению темных кругов под глазами, улучшению цвета лица.

Курс из нескольких процедур дает следующие результаты:

  • убирает мимические морщины;
  • осветляет пигментные пятна;
  • питает и увлажняет кожу;
  • избавляет от акне и постакне;
  • подтягивает овал лица, повышает тургор кожи;
  • делает шрамы и рубцы менее заметными.

Эффект от плазмолифтинга лица сравним с эффектом от хирургического поверхностного лифтинга, но не предполагает оперативного вмешательства. Кожа приобретает мягкость и бархатистость, начинает буквально светиться изнутри.

Плазмолифтинг шеи способствует укреплению защитных свойств кожи. Она лучше противостоит воздействию вредного ультрафиолета, перепадов температуры, токсинов, патогенной микрофлоры. Процессы регенерации ускоряются, благодаря чему ранки затягиваются быстрее, а рубцы становятся менее заметными.

Плазмотерапия повышает увлажненность кожи на глубоком уровне. Процедура приводит к улучшению синтеза макромолекулярных белков, обеспечивающих эластичность кожных покровов. Повышается количество влаги, которое кожа может удерживать внутри, в результате чего чувство стянутости и сухости пропадает.

Кожа после сеансов плазмолифтинга становится менее раздраженной и воспаленной. Метаболизм клеток усиливается, что приводит к улучшению внешнего вида кожных покровов, снижению риска появления пигментных пятен после инсоляции, быстрому заживлению прыщей. Цвет лица становится ровным и более здоровым.

Плазмолифтинг улучшает трофику кожи. Курс из нескольких сеансов приводит к усилению процесса кровообращения, ускорению метаболических процессов, обновлению клеток. В отличие от инъекций ботокса и ряда других косметологических процедур, плазмолифтинг позволяет получить комплексный и устойчивый эффект.

Плазмолифтинг кожи век бережно воздействует на чувствительный участок. Он помогает справиться с первыми признаками старения:

  • восстанавливает водный баланс в клетках;
  • убирает мешки и темные круги под глазами;
  • сокращает количество и глубину мимических морщин;
  • восстанавливает эластичность кожи век.

Плазмолифтинг головы полезен, если волосы начинают интенсивно выпадать — более 100 единиц в день. Он заставляет клетки работать активнее, ускоряет метаболизм и стимулирует работу волосяных луковиц. В результате плазмолифтинга кожи головы повышается не только скорость роста, но и густота волос.

Плазмолифтинг суставов устраняет воспалительные процессы, ускоряет восстановление тканей, снимает мышечный спазм. Он помогает избавиться от болей в позвоночнике, если они связаны с зажатостью мышц, малоподвижным образом жизни, нарушением обменных процессов.

Записаться на плазмолифтинг в Москве

Клиника «Альфа-Центр Здоровья» — это возможность сделать недорогой плазмолифтинг в Москве. Мы работаем ежедневно, по предварительной записи. Предлагаем ознакомиться с прайсом и отзывами,а если возникнут вопросы — связаться с администратором. Будем рады помочь!

Применение плазмолифтинга (PRP) в хирургии и ортопедии

Плазмолифтинг (PRP) в Краснодаре

Плазмолифтинг (Plasmolifting) представляет собой новую уникальную медицинскую технологию лечения и омоложения с широким спектром применения в различных областях медицины. Метод имеет множество синонимов: аутологичное клеточное омоложение (ACR), аутоплазменная терапия кожи, аутоомоложение кожи, биоревитализация плазмой крови, плазмобиоревитализация, плазмаревитализация кожи, 3С-терапия – самостоятельная стимулирующая сыворотка, гемоомоложение, и даже дракула-терапия.

В основе методики лежит использование инъекционной формы тромбоцитарной аутоплазмы крови самого пациента. Таким образом, плазмолифтинг является полностью натуральной процедурой, в которой не задействуются никакие посторонние химические компоненты. Важно и то, что при данном методе для введения используются собственные биоматериалы пациента, что обеспечивает полную биосовместимость и практически исключает возможность возникновения аллергических реакций.

Благодаря биотехнологичному сертифицированному оборудованию процедура по методу Plasmolifting является безопасной как для врача, так и для пациента. Во время процедуры кровь пациента не контактирует с окружающей средой, что исключает риск заражения и инфицирования. Состав пробирки препятствует свертыванию крови, обеспечивает качественную адсорбцию, хорошо фиксирует эритроциты, при этом не влияя на терапевтические свойства и состав аутоплазмы. 

МЕХАНИЗМЫ ПЛАЗМОЛЕЧЕНИЯ

Постепенное увядание клеток тканей – это естественный возраст-ассоциированный процесс. Для приостановления процесса старения и стимулирования регенерации клеток необходимы биологически активные вещества. В крови человека (плазме) содержатся все необходимые элементы для нормальной жизнедеятельности клеток и организма в целом, а также собственные механизмы обновления, регенерации. Известно, что биостимулирующие свойства крови заметно активизируются при значительном увеличении концентрации тромбоцитов в плазме.

В тромбоцитах содержатся молекулы-регуляторы (факторы роста), которые обеспечивают регенерацию тканей при их повреждении и при угасании активности клеток. После введения пациенту богатой тромбоцитами плазмы (PRP) клетки соединительной ткани (фибробласты), расположенные в глубоких слоях, начинают синтезировать коллаген, эластин и гиалуроновую кислоту, которые отвечают за гладкость и упругость тканей. Наряду с этим восстанавливается клеточный матрикс и начинается стимуляция макрофагов. Таким образом, процедура базируется на механизме активизации собственных клеток соединительной ткани посредством собственной плазмы.

СХЕМА ПРОХОЖДЕНИЯ ПРОЦЕДУРЫ:

  • У пациента осуществляется забор крови в целях получения богатой тромбоцитами плазмы (PRP), предназначенной для подкожных, внутрикожных, внутрисуставных инъекций. Процедура абсолютно безопасна и не вызывает болевых ощущений. Забор крови аналогичен взятию обычного внутривенного анализа.

  • Кровь очищают и помещают в специальную центрифугу, в которой она разделяется на три фракции: бедная тромбоцитами плазма (PPP), богатая тромбоцитами плазма (PRP) и эритроциты. Выбирается фракция, наиболее обогащенная активированными тромбоцитами (PRP). Процесс получения (PRP) автоматизирован и занимает около 5 минут.

  • Далее полученная плазма без промедления вводится пациенту в очаг повреждения по определенной схеме. После введения плазмы  активные тромбоциты, содержащие все факторы роста тканей, активизируют выработку гиалуроновой кислоты, а также стволовые клетки, которые находятся в центрифугате в одном слое с активными тромбоцитами. Сама процедура занимает около 15 минут и не требует обезболивания (при необходимости возможна местная анестезия).

Изменения становятся заметны уже после первой-второй процедуры, но для получения эффекта рекомендуется пройти до 5-7 процедур за один курс лечения, с промежутками в 1-6 месяцев.

Результатом является естественное восстановление поврежденных тканей за счет активации стволовых клеток и факторов роста активных тромбоцитов. 

БЕЗОПАСНОСТЬ И ОТСУТСТВИЕ РЕАБИЛИТАЦИОННОГО ПЕРИОДА!

Для получения богатой тромбоцитами плазмы (PRP) может потребоваться до 10 мл крови, что не представляет опасности для человека и не ведет ни к каким нарушениям функций внутренних органов. Принципиальным преимуществом терапии является и отсутствие реабилитационного периода. 

ПРИМЕНЕНИЕ АУТОПЛАЗМЫ В ХИРУРГИИ И ОРТОПЕДИИ

Боль и дискомфорт в суставах испытывают сотни тысяч граждан. Во многом они обусловлены возрастными изменениями костной и хрящевой тканей. В некоторых случаях из-за запущенности формы заболевания опорно-двигательного аппарата лечить пациента с помощью медикаментов уже непродуктивно, и тогда требуется хирургическое вмешательство. Поэтому так важно приступить к лечению при первых симптомах болезни.  Даже безобидный на первый взгляд хруст в конечностях может быть началом серьезных патологий: артрозов, артритов и т.д.

Уникальная разработка метода лечения аутоплазмой служит прекрасной профилактикой для замедления старения опорно-двигательного аппарата и помогает останавливать дегенеративные изменения суставов на ранних стадиях заболевания, возвращая пациентам радость жизни и движение без боли.

Применение аутоплазмы в ортопедии и травматологии  помогает достигнуть следующих результатов:

  • снятие спазма мышц;

  • устранение болей в суставе;

  • увеличение подвижности сустава;

  • восстановление суставной жидкости;

  • укрепление тканей опорно-двигательного аппарата;

  • стимулирование образовательной костной и хрящевой тканей;

  • ускорение периода реабилитации после травм и операций.

В основе ортопедической процедуры (PRP) лежит запатентованный метод обработки крови пациента с помощью специальных вакуумных биотехнологичных пробирок и особого режима центрифугирования. 

В ходе процедуры из крови выделяют инъекционную форму аутоплазмы, содержащую тромбоциты, которая в виде инъекций вводится в мягкие ткани, окружающие сустав, и непосредственно в полость сустава. Инъекции аутоплазмы позволяют уменьшить воспалительный процесс, купировать боль и восстановить объем движений в суставе. Кроме того, процедура лечения аутоплазмой сводит к минимуму количество применяемых медикаментов или и вовсе исключает их, тем самым уменьшая токсическое воздействие препаратов на организм пациента. Также инъекции аутоплазмы способствуют сокращению сроков лечения в 2-3 раза.

ПОКАЗАНИЯ К ПРОЦЕДУРЕ (PRP):

  • остеоартрит, 

  • остеоартроз, 

  • периартрит,

  • тендопатии сухожилий, 

  • повреждения связок и мышц.

ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ К ПРОЦЕДУРЕ (PRP):

  • тромбоцитопения,

  • прием антикоагулянтов,

  • острая инфекция,

  • опухоли,

  • метастазы опухолей,

  • беременность,

  • аллергические состояния.

Записаться на консультацию к ортопеду-травматологу и процедуру плазмолифтинга (PRP) можно по телефону +7 (861) 221-03-33. 

Влияние местных анестетиков и калибров игл, используемых для безболезненных инъекций PRP, на функциональность тромбоцитов

Мышцы Связки Сухожилия J. 2014 Январь-март; 4(1): 18–23.

Опубликовано онлайн 2014 май 8.

, 1 , 1 , 1 , 2 , , , 4 , , 4 , 3 , 1, 4 и 1 , 4

Olivier Bausset

1

1 Доклад культуры и терапии, Помощь Publine DES Hôpitaux de Marseille, ФРАНЦИЯ

Джереми Магалон

1 Доклад культуры и терапии, помощь Publique des Hôpitaux de Marseille, Франция

Laurent Giraudo

1 Отделение культуры и терапии, Assistance Publique des Hôpitaux de Marseille, Франция

Marie-Laure Louis

2 Отделение ортопедической хирургии, CHU La Conception, 030 Publique des Hôpitaux, France 9 Nicolas de Marseilleaux 9 Serratrice

3 Отделение пластической и реконструктивной хирургии, CHU La Conception, Assistance Publique des Hôpitaux de Marseille, Франция

90 030 Corrine Frere

4 Фармацевтический факультет, Inserm UMR-S1076, Марсель, Франция

Guy Magalon

3 Кафедра пластической и реконструктивной хирургии, CHU La Conception, 00030 Assistance 9 Marseilleaux, 30 Assist 9 Marseilleaux, 30 Publique des Hôpitaux 9 Françoise Dignat-George

1

1 Устройство культуры и терапии, Помощь Publique des Hôpitaux de Marseille, Франция

4 Факультет фармации, Inserm UMR-S1076, Marseille, Франция

Флоренция Sabatier

1 Культура и Therapy Unit, Assistance Publique des Hôpitaux de Marseille, Франция

4 Фармацевтический факультет, Inserm UMR-S1076, Марсель, Франция

1 Культурно-терапевтическое отделение, Assistance Publique des Hôpitaux de Marseille, Франция

3

3

3

3

3

Отделение ортопедической хирургии, CHU La Conception, Assistance Publique des Hôpitaux de Marseille, Франция

3 Depa Отделение пластической и реконструктивной хирургии, CHU La Conception, Assistance Publique des Hôpitaux de Marseille, Франция

4 Фармацевтический факультет, Inserm UMR-S1076, Марсель, Франция

Автор, ответственный за переписку: Оливье Боссе, Отдел культуры и терапии, Assistance Publique des Hôpitaux de Marseille, 148 bd Baille, 13005 Марсель, Франция, E-mail: rf. [email protected]Авторское право © 2014, CIC Edizioni InternazionaliЭта статья была процитирована другими статьями в PMC.

Резюме

Обогащенная тромбоцитами плазма (PRP) представляет собой аутологичную биотерапию, широко используемую благодаря своим целебным свойствам. После активации тромбоциты выделяют настоящий «коктейль» из факторов роста и цитокинов, участвующих в многочисленных регенеративных процессах. Однако влияние медицинской практики, связанной с терапевтическим использованием PRP, на функциональность тромбоцитов остается малоизученным.

Цели:

мы оценили in vitro эффекты двух широко используемых местных анестетиков (ксилокаин * и наропин * ) на функциональность PRP. Мы также исследовали количество и качество PRP, прошедшего через иглу наименьшего калибра из имеющихся в продаже.

Материалы и методы:

PRP от 9 здоровых добровольцев были приготовлены с использованием нашего ранее описанного домашнего протокола очистки. Способность тромбоцитов к агрегации оценивали с помощью агрегометрии, а высвобождение фактора роста определяли с помощью ELISA после активации тромбоцитов.Мы также оценили статус активации тромбоцитов, реактивность и стабильность тромбоцитов с помощью проточной цитометрии с использованием маркера экспрессии P-селектина.

Результаты:

Сочетание местных анестетиков с инъекциями PRP привело к значительному снижению функциональности тромбоцитов, оцениваемой по их способности к агрегации. Местные анестетики не мешали высвобождению фактора роста. Различные размеры и калибры игл, испытанные для инъекций PRP, не влияли на функциональность тромбоцитов.

Выводы:

использование местных анестетиков для предотвращения боли во время инъекций PRP может поставить под угрозу терапевтический потенциал PRP. Эти результаты предполагают осторожное использование местных анестетиков или ограничение их использования настолько часто, насколько это возможно. Чтобы свести к минимуму боль при инъекции, мы рекомендуем использовать иглы 30 G. Эти данные позволят разработать клинические рекомендации для безболезненных и контролируемых инъекций PRP.

Ключевые слова: обогащенная тромбоцитами плазма, PRP, концентрат тромбоцитов местные анестетики, факторы роста, тендинопатии, спортивная медицина, регенеративная медицина концентрированный источник тромбоцитов.После активации происходит дегрануляция, и тромбоциты выделяют настоящий «коктейль» из факторов роста и цитокинов, участвующих в многочисленных регенеративных процессах1. Эти свойства были исследованы и использованы в качестве клинических инструментов для нескольких видов лечения, включая повреждение нервов, тендинит, остеоартрит, повреждение сердечной мышцы, восстановление и регенерацию костей, пластическую хирургию и челюстно-лицевую хирургию. PRP также привлекла внимание популярных средств массовой информации в связи с ее применением в регенеративной спортивной медицине2,3.

PRP в основном очищается путем осторожного центрифугирования цельной периферической крови. На рынке доступно несколько наборов, обеспечивающих различные системы очистки PRP. Даже если это кажется простым на первый взгляд, многочисленные факторы очистки, такие как скорость центрифугирования, использование антикоагулянта, могут повлиять на свойства конечного продукта PRP. Основными модифицированными свойствами являются наличие лейкоцитов или эритроцитов и содержание фактора роста. Все эти аспекты активно обсуждаются в литературе и в настоящее время нет единого мнения.Более того, многие авторы нечетко документируют характеристики продукта, который они используют, что создает много недоразумений. Вот почему не существует одной рецептуры PRP, а существует огромное количество рецептур PRP с различными областями применения4. Чтобы добавить сложности, содержание PRP варьируется от одного человека к другому и у одного и того же человека с течением времени, что приводит к контрастным эффектам in vivo. Ранее1 мы разработали новый метод очистки PRP, основанный на двух 15-минутных (мин) последовательных центрифугированиях (соответственно при 130 и 250 g). В этих условиях мы получили высококонцентрированный продукт PRP с очень ограниченным количеством лейкоцитов (или лейкоцитов = лейкоцитов) и эритроцитов (эритроцитов), пригодных для изучения свойств тромбоцитов.

Напротив, существует очень мало данных о влиянии самих инъекций на свойства PRP. Lippi et al.5 описали, что использование игл малого диаметра может повлиять на подсчет тромбоцитов. Вот почему мы предположили, что размер и калибр иглы (выраженный в G) могут иметь большое влияние на качество вводимых тромбоцитов.

В то же время было отмечено болезненность инъекций PRP, что побудило клиницистов использовать местную анестезию: лидокаин с адреналином или без него (10 мг/мл, 1/200 000) и ропивакаин (7,5 мг/мл) обычно являются местными анестетиками. используется для предотвращения боли, связанной с инъекцией PRP, или для инфильтрации во время тотального эндопротезирования коленного сустава6–8. Schnabl et al.9 продемонстрировал, что самое продолжительное уменьшение боли было показано при применении 0,75% ропивакаина и лидокаина с адреналином. Эпинефрин также используется из-за его вазоактивной способности уменьшать кровотечение.Кроме того, внутрисуставное или внутрипариетальное введение ропивакаина обеспечивало превосходный контроль над болью после операции. Локальная инфильтрация ропивакаином продемонстрировала значительное сокращение времени госпитализации с ранним восстановлением движений (ROM) и уменьшением основных показателей боли за счет значительного уменьшения послеоперационной боли7. Местная инфильтрация ропивакаином проста, легка, безопасна и эффективна для обезболивания после операции на колене или бедре. Однако данные о влиянии этих местных анестетиков на структуру и функциональность тромбоцитов отсутствуют.Более того, сразу после инъекций кортикоидов или PRP окружающие жидкости организма быстро разбавляли эти вещества10. Этот параметр важен, и его следует учитывать в исследованиях, чтобы максимально приблизиться к условиям in vivo .

Здесь мы стремились проанализировать некоторую информацию о влиянии in vitro двух обычно используемых местных анестетиков на свойства PRP. Мы также исследовали количество и качество тромбоцитов из нашего самодельного PRP, которые прошли через иглу самого маленького размера из имеющихся в продаже.Поэтому мы определили наилучший размер иглы для безболезненных инъекций без изменения тромбоцитов.

Чтобы изучить влияние этих двух условий (использование местной анестезии и размер иглы) на качество тромбоцитов, мы провели анализ агрегации тромбоцитов и количественную оценку фактора роста. Мы также оценили активацию тромбоцитов с использованием мембранного маркера P-селекции с помощью анализа проточной цитометрии. Это прокладывает путь к клиническим рекомендациям по безболезненным и контролируемым инъекциям PRP.

Материалы и методы

Сбор цельной крови

Девять здоровых добровольцев-доноров (4 мужчины и 5 женщин) в возрасте от 22 до 63 лет (в среднем 36.2 года) поступил на учебу. Добровольцы были включены в исследование после получения информированного согласия в соответствии с национальными правилами. У них не было соответствующих заболеваний, и они не принимали какие-либо препараты, влияющие на функцию тромбоцитов, в течение 7 дней до исследования. Для каждого донора было собрано 34 мл цельной крови в четыре 10-мл пробирки (Vacuette®, Ref 455055, Greiner Bio-One SAS), содержащие 1,5 мл раствора аденозинцитрата декстрозы и кислоты (ACD-A) (Fenwal, ref BDB8651). ), для конечного объема 40 мл. Другую пробирку, покрытую антикоагулянтом этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА), использовали для определения начального количества тромбоцитов в цельной крови с помощью автоматического счетчика клеток (Advia 2120®, Siemens Diagnostic Solutions, Tarrytown, NY).Все доноры, включенные в это исследование, имели исходное количество тромбоцитов более 150 000 тромбоцитов/мкл.

Производство PRP

PRP были получены с использованием ранее разработанного нового метода очистки PRP, основанного на двух 15-минутных последовательных центрифугированиях (соответственно при 130 g и 250 g)1. В этих условиях мы получили примерно 4 мл высококонцентрированного продукта PRP с очень ограниченным количеством эритроцитов и лейкоцитов. После очистки PRP брали аликвоту 250 мкл для подсчета тромбоцитов (Advia 2120®, Siemens Diagnostic Solutions, Tarrytown, NY).Также определяли одновременно остаточную нумерацию эритроцитов и лейкоцитов. Фактор концентрации тромбоцитов рассчитывали относительно периферической крови. Измеряли рН. Были проведены анализы на стерильность. Все манипуляции по приготовлению и забору PRP проводились в помещении микробиологической безопасности класса А, расположенном в отделении клеточной терапии больницы La Conception (AP-HM, Франция). В этих условиях мы получили контролируемый продукт клеточной терапии, оптимизированный для медицинских применений человека.

Местные анестетики

Лидокаин и ропивакаин являются местными анестетиками, принадлежащими к группе анилидов N-алкилпролина.Ксилокаин (10 мг/мл, AstraZeneca) с адреналином или без него (1:200 000): каждый мл раствора содержал лидокаина гидрохлорид моногидрат, эквивалентный 10 мг безводного лидокаина гидрохлорида (200 мг на 20 мл флакон), 5 мкг (мкг) Эпинефрин (100 мкг на 20 мл флакон). Наропеин (7,5 мг/мл, AstraZeneca): каждый мл раствора содержал 7,5 мг ропивакаина гидрохлорида (150 мг на 20 мл флакон). Мы использовали разбавленную концентрацию для воспроизведения условий in vivo6,10, соответствующих 20 мкл местных анестетиков в 240-мкл картриджах.Конечные концентрации в эксперименте составляют 0,83 мг/мл для лидокаина и 0,625 мг/мл для наропеина.

Агрегометрия

Влияние местных анестетиков на агрегацию тромбоцитов определяли с помощью агрегометрии пропускания света. Агрегацию тромбоцитов оценивали с помощью агрегометра APACT 4004 (Elitech, Франция). Использовались одноразовые картриджи. Конечный объем 240 мкл PRP (с поправкой на количество тромбоцитов 250 г/л, разбавленных в плазме с низким содержанием тромбоцитов (PPP) был использован для тестирования различных условий ().Агрегацию инициировали при 37°C при осторожном перемешивании добавлением 20 мкл аденозиндифосфата (АДФ) (100 мкМ, Helena Biosciences Europe) или коллагена (190 мкг/мл, Helena Biosciences Europe). 240 мкл PRP использовали в качестве отрицательного контроля для определения базальной аутоагрегации тромбоцитов. В этих условиях местные анестетики разводили (соотношение 1/12), чтобы имитировать физиологические условия6, 10. В качестве отрицательного контроля использовали фосфатно-солевой буфер (PBS). Пропускание света регистрировали в течение 300 с и анализировали с помощью программного обеспечения (APACT Software).Агрегацию PRP выражали по максимальной интенсивности агрегации тромбоцитов. Мы провели один анализ для каждого образца.

Таблица 1.

Агрегометрия светопропускания: различные экспериментальные условия.

9 9 0201 20 мкл Lidocaine 9018
# ПРП Агрегация активаторы Местные анестетики
1 240 мкл
2 200 мкл 20 мкл ADP 20 мкл PBS 20 мкл PBS
3 200 мкл 20 мкл ADP 20 мкл Lidocaine
4 200 μl 20 мкл ADP 20 мкл лидокаина + адреналин
200 мкл 20 мкл ADP 20 мкл ROPIVACAINE
6 200 мкл 20 мкл коллагена 20 мкл PBS
7 200 мкл 20 мкл коллагена
8 200 мкл 20 мкл коллагена 20 мкл лидокаина +
9 200 мкл 20 мкл коллагена 20 мкл ропивакаина

Количественное определение фактора роста

Высвобождение фактора роста оценивали после активации тромбоцитов с использованием коллагеновой пластины. Для сравнения высвобождения фактора роста использовали 48-луночные планшеты BD BioCoat™ Cell Environments Collagen I (Becton Dickinson Labware, Bedford, UK, ref: 354505). Для каждого донора инкубировали 200 мкл PRP (концентрация тромбоцитов: 250 г/л, разведенных в PPP) и 20 мкл PBS или лидокаина без адреналина при 37°C в течение 72 часов. Затем супернатанты собирали осторожной аспирацией и хранили при -80°C до количественного определения фактора роста (PDGF-AB, TGF-β1) с использованием наборов для твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) (R&D Diagnostics, Висбаден, Германия).Анализы проводились в соответствии с инструкциями производителя.

Проточная цитометрия

Количество и качество тромбоцитов, прошедших через иглу 30 G (игла наименьшего калибра из имеющихся в продаже, длина: 13 мм), по сравнению с неинъекционным PRP оценивали с помощью проточной цитометрии с использованием маркера P-селектина. PRP выявляли моноклональным антителом CD62P, меченным FITC (клон LYP20, Biocytex, Марсель, Франция). Конъюгированное с FITC антитело изотипа (клон 2DNP2h21, Biocytex) использовали в качестве контроля.После 20 мин инкубации тромбоциты ресуспендировали в 500 мкл л соответствующего солевого буфера и анализировали с помощью цитометра FC-500 (Beckman Coulter, Майами, Флорида, США). Каналы светорассеяния и флуоресценции настроены на логарифмическое усиление, а тромбоциты стробированы в соответствии со свойствами прямого и бокового рассеяния. Позитивная (+) экспрессия P-селектина была обнаружена по неспецифическому фоновому сигналу от мечения изотипического контроля. Всего было отслежено 10 000 событий. Для обработки данных использовалось программное обеспечение CXP (Beckman Coulter).Результаты выражали в виде уровня тромбоцитов с экспрессией P-селектина (средняя интенсивность флуоресценции специфического мечения всех популяций тромбоцитов).

Статистический анализ

Статистический анализ был выполнен с помощью программного обеспечения GraphPad Prism 6.0. Значение p < 0,05 считается значимым. Все количественные измерения описаны с использованием сводной статистики (n, среднее значение, стандартное отклонение). Тест Манна-Уитни использовали для анализа возможного влияния местных анестетиков и калибров игл на функциональность тромбоцитов.

Результаты

Влияние местных анестетиков на агрегацию тромбоцитов

Влияние местных анестетиков на функциональность тромбоцитов оценивали с помощью агрегометрии пропускания света (). PBS не влиял на агрегацию PRP в ответ на АДФ или агонисты коллагена. Значительно более низкая агрегация наблюдалась при применении лидокаина с адреналином или без него и ропивакаина в ответ на АДФ (р=0,0039) или агонисты коллагена (р=0,0313). Анализы агрегации тромбоцитов показали, что лидокаин с или без местных анестетиков эпинефрина и ропивакаина оказывает негативное влияние на скорость агрегации тромбоцитов, индуцированную АДФ и коллагеном.Применение эпинефрина в сочетании с лидокаином усиливало (p<0,0005) агрегацию тромбоцитов по сравнению с применением только лидокаина.

Агрегометрия коэффициента пропускания света с полосой стандартного отклонения (A) Скорость агрегации тромбоцитов (%). (B) Кривая агрегации тромбоцитов в ответ на коллаген. Сокращения: PBS = фосфатно-солевой буфер, АДФ = аденозиндифосфат.

Количественное определение фактора роста

Статистически значимой разницы в высвобождении фактора роста с лидокаином по сравнению с необработанным PRP обнаружено не было (PDGF-AB p = 0.79 и TGF-Béta1 p = 0,76) (). Местные анестетики, по-видимому, не влияли на высвобождение тромбоцитов фактора роста.

Концентрация фактора роста (пг/мл). Данные получены для разных семи доноров. * р=0,79 ** р=0,76. PDGF-AB: тромбоцитарный фактор роста. TGF-Béta1: трансформирующий фактор роста b1 n= 7.

Влияние калибра иглы на статус активации тромбоцитов

Статус активации тромбоцитов оценивали с помощью проточной цитометрии с использованием маркера P-селектина.Мы получили 3,80 +/- 1,31% активированных тромбоцитов для PRP, прошедшего через иглу 30G, и 3,37 +/- 1,18% для необработанного PRP. По-видимому, игла самого маленького калибра не активировала тромбоциты, статистически значимой разницы не было (n = 6, p = 0,41).

Обсуждение

В этом исследовании мы показали, что местные анестетики могут напрямую влиять на функциональность тромбоцитов, особенно на агрегацию тромбоцитов. Напротив, местные анестетики не влияли на способность PRP высвобождать фактор роста.Более того, игла наименьшего калибра, выпущенная в продажу, не оказала существенного влияния на количество и качество тромбоцитов в нашем самодельном PRP.

Ранее Carofino et al.6 описали, что инъекции PRP в сочетании с местными анестетиками менее эффективны, чем инъекции PRP без использования местной анестезии. Наши результаты согласуются с результатами Az-ma et al.11 и Carofino et al.6. Использование местных анестетиков изменяет агрегацию тромбоцитов. Хаалан и др.12 заметили, что эпинефрин усиливает агрегацию тромбоцитов, поэтому эпинефрин, по-видимому, подавляет негативное влияние лидокаина на агрегацию тромбоцитов. Побочные эффекты анестетиков на клетки до конца не изучены. Растворы местных анестетиков обычно готовят при рН от 5,0 до 6,0, однако эта кислотность может быть вредной для обработанных клеток6. Если использование местных анестетиков абсолютно необходимо, мы рекомендуем вводить местные анестетики и PRP в разные места, чтобы избежать каких-либо взаимодействий. Обычно это возможно по многим показаниям. Например, при внутрисуставных инъекциях местная анестезия ограничивается только локальным поверхностным участком кожи, а PRP вводится непосредственно в полость сустава.Тромбоциты никогда не находились в непосредственном контакте с местными анестетиками. Альтернативой может быть короткая релаксация, вызванная MEOPA, или общая анестезия.

Статистически значимой разницы в количественном определении фактора роста не наблюдалось. Такой результат можно объяснить длительной инкубацией. Мы предполагаем, что 72-часовая инкубация в коллагеновой пластине полностью активировала тромбоциты, несмотря на инкубацию с лидокаином. В первые часы после активации коллагена оказывается, что лидокаин изменяет кинетику высвобождения фактора роста тромбоцитов.

Использование игл малого диаметра (30 G) не влияло на количество и качество тромбоцитов. Этот результат важен, поскольку для уменьшения боли клиницисты использовали как можно более маленькие и атравматичные иглы. Действительно, 96% пациентов испытывали умеренную постпроцедурную боль, которая продолжалась в течение 3 ± 2 дней после введения PRP13, 14. Как сообщили Rodrigues et al.13, при интравитреальных инъекциях пациенты, которым вводили иглы 26 или 27 G, испытывали большую боль, чем иглы 29 и 30 G.

Это исследование имеет несколько ограничений15.

Поведение тромбоцитов in vitro может не совпадать с поведением in vivo в окружающей среде. Трудно воспроизвести условия введения среды, особенно для местной концентрации анестетика. Для подтверждения наших результатов необходимы другие исследования. Необходимо провести исследование in vitro на клетках сухожилий человека, чтобы изучить влияние смешивания анестетиков с PRP на пролиферацию и жизнеспособность клеток.

Для анализа влияния анестетиков на кинетику высвобождения фактора роста тромбоцитов мы предлагаем количественно определить фактор роста после активации тромбоцитов. Эту количественную оценку можно проводить на пластине с коллагеном каждые 6 часов в течение 7 дней.

Принимая во внимание размер иглы, другие длины и калибры должны быть изучены. Важно стандартизировать приложение давления к поршню шприца. Однако согласно Lancé et al.16, мы предполагаем, что методы сбора и инъекции не кажутся актуальными.

Заключение

Это исследование показало, что использование местных анестетиков для предотвращения боли во время инъекций PRP может поставить под угрозу потенциально полезные эффекты PRP за счет снижения реактивности тромбоцитов. Соответственно, мы предлагаем осторожно использовать местные анестетики или ограничивать их использование как можно чаще. Кроме того, поскольку было показано, что различные размеры и калибры игл, испытанные для инъекций PRP, не влияют на функциональность тромбоцитов, мы рекомендуем использовать иглы 30 G, чтобы свести к минимуму боль при инъекциях. Эти данные прокладывают путь к определению рекомендуемых медицинских практик, связанных с инъекциями PRP.

Сноски

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Ссылки

1. Bausset O, Giraudo L, Veran J, et al. Составление и хранение домашнего продукта обогащенной тромбоцитами плазмы. Биорес в открытом доступе. 2012;1(3):115–123. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]2. Лопес-Видриеро Э., Гулдинг К.А., Саймон Д.А., Санчес М., Джонсон Д.Х.Использование богатой тромбоцитами плазмы в артроскопии и спортивной медицине: оптимизация лечебной среды. Артроскопия. 2010;26(2):269–278. [PubMed] [Google Scholar]3. Парафиорити А., Армиральо Э., Дель Бьянко С., Тибальт Э., Олива Ф., Берарди А.С. Однократная инъекция богатой тромбоцитами плазмы в модели разрыва ахиллова сухожилия у крыс. Мышцы, связки, сухожилия, J. 2011; 1(2):41–47. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]4. Юань Т., Чжан К.-К., Ван Д. Х.К. Усиление восстановления сухожилий и связок с помощью богатой тромбоцитами плазмы (PRP) Мышцы Связки Сухожилия J.2013;3(3):139–149. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]5. Липпи Г., Сальваньо Г.Л., Монтаньяна М., Поли Г., Гуиди Г.К. Влияние размера отверстия иглы на количество тромбоцитов и рутинное исследование коагуляции. Коагуляционный фибринолиз крови. 2006;17(7):557–561. [PubMed] [Google Scholar]6. Carofino B CD, McCarthy MB, Bradley JP, et al. Кортикостероиды и местные анестетики уменьшают положительные эффекты богатой тромбоцитами плазмы: исследование in vitro на клетках сухожилий человека. Артроскопия. 2012;28(5):711–719. [PubMed] [Google Scholar]7.Marret E, Gentili M, Bonnet MP, Bonnet F. Внутрисуставное введение ропивакаина 0,75% и бупивакаина 0,50% для обезболивания после артроскопической операции на колене: рандомизированное проспективное исследование. Артроскопия. 2005;21(3):313–316. [PubMed] [Google Scholar]8. Samoladas EP, Chalidis B, Fotiadis H, Terzidis I, Ntobas T, Koimtzis M. Внутрисуставное использование ропивакаина для контроля боли после артроскопии коленного сустава. J Orthop Surg Res. 2006;21:17. 23. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]9. Шнабль С.М., Унглауб Ф., Лейтц З., Бройнингер Х., Хефнер Х.М.Перфузия кожи и оценка боли при применении различных местных анестетиков в двойном слепом рандомизированном исследовании после блокады пальцевого нерва. Clin Hemorheol Microcirc. 2012 [Epub перед печатью] [PubMed] [Google Scholar]10. Липпи Г., Сальваньо Г.Л., Монтаньяна М., Поли Г., Гуиди Г.К. Влияние размера отверстия иглы на количество тромбоцитов и рутинное исследование коагуляции. Коагуляционный фибринолиз крови. 2006;17(7):557–561. [PubMed] [Google Scholar] 11. Az-ma TH, Yuge O. Ингибирующее действие лидокаина на антиагрегацию тромбоцитов, зависящую от эндотелиальных клеток аорты культивируемых свиней.Анестезиология. 1995;83(2):374–381. [PubMed] [Google Scholar] 12. Хааланд Х.Д., Холмсен Х. Потенцирование адреналином агонист-индуцированных реакций в нормальных тромбоцитах человека in vitro. Тромбоциты. 2011;22(5):328–337. [PubMed] [Google Scholar] 13. Родригес Э.Б., Груманн А., младший, Пенья Ф.М. и соавт. Влияние типа иглы и техники инъекции на уровень боли и рефлюкс в стекловидное тело при интравитреальной инъекции. J Ocul Pharmacol Ther. 2011;27(2):197–203. [PubMed] [Google Scholar] 14. Ferrero G FE, Orlandi D, Martini C, et al.Инъекция обогащенной тромбоцитами плазмы под ультразвуковым контролем при хронической тендинопатии ахиллова сухожилия и надколенника. Дж УЗИ. 2012; 4: 260–266. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]15. Падуло Дж., Олива Ф., Фриззиеро А., Маффулли Н. Журнал мышц, связок и сухожилий. Основные принципы и рекомендации в клинических и полевых исследованиях. МЛТЖ. 2013; 4: 250–252. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]16. Лансе М.Д., Хенскенс Ю.М., Нелеманс П. и соавт. Влияют ли методы забора крови на анализ функции тромбоцитов цельной крови? Тромбоциты.2013;24(4):275–281. [PubMed] [Google Scholar]

Практический пример: использование богатой тромбоцитами плазмы и инъекций концентрата аспирата костного мозга для лечения остеоартрита коленного сустава

21 апреля 2018 г.

Пациентка 83 лет, здоровая, бывшая стюардесса, привыкла стоять на ногах. В 2014 году у нее появились боли из-за остеоартрита, которые начали поражать ее левое колено и угрожали ее подвижности, и она искала методы лечения, которые не мешали бы ее активному образу жизни.

В январе 2015 г. пациент получил две отдельные инъекции обогащенной тромбоцитами плазмы (PRP). Инъекции PRP сами по себе не обеспечивали адекватного облегчения симптомов. В июле ей сделали инъекцию концентрата аспирата костного мозга (BMAC) и PRP.

Джей Смит, доктор медицинских наук, физиотерапевт и директор отдела регенеративной медицины Исследовательского центра реабилитационной медицины в кампусе клиники Майо в Рочестере, штат Миннесота, провел обследование пациента и провел инъекции BMAC и PRP.На сегодняшний день доктор Смит и его коллеги из Mayo провели инъекции PRP или BMAC более чем 400 пациентам. Современная научная литература показывает, что от 40 до 70 процентов людей, получающих это лечение, находят некоторое облегчение боли, по словам доктора Смита. «Это не работает в 100% случаев», — говорит он. «Но у нас довольно хорошие показатели успеха, когда основная цель — улучшить симптомы и позволить пациентам делать то, что они хотят».

Доктор Смит говорит, что часть бесед, которые он ведет с пациентами, заключается в том, что регенеративная медицина стремится восстановить здоровье, используя естественную способность организма к самоисцелению.«Мы говорим нашим пациентам, что это приемлемо безопасная ортопедическая процедура, и она может изменить или не изменить их уровень боли», — говорит доктор Смит.

Что известно о методах лечения, так это то, что они, скорее всего, уменьшают воспалительный процесс, вызванный разрушением суставного хряща. «Лечение с помощью PRP основано на знании того, что тромбоциты несут множество факторов роста», — говорит доктор Смит. «Они первыми реагируют, когда мы получаем травму, они контролируют ущерб и запускают процесс заживления.»

Для PRP-терапии тромбоциты извлекаются из вены на руке пациента и концентрируются с помощью центрифуги. Затем концентрат вводят обратно в сустав пациента, где факторы роста уменьшают воспаление.

BMAC содержит не только тромбоциты, но и множество других мощных клеток, включая стволовые клетки. Стволовые клетки также обладают значительными противовоспалительными свойствами и могут сильно влиять на другие клетки, участвующие в воспалении и заживлении. У них также есть способность становиться другими типами клеток.Костный мозг берут из тазовой кости пациента, концентрируют в центрифуге, а затем вводят в проблемную область. «Концентрат костного мозга и богатая тромбоцитами плазма естественным образом изменяют воспалительный и иммунный ответ», — говорит доктор Смит.

Через несколько часов после лечения пациентка вышла из процедурной с помощью костылей и наколенника, которыми она пользовалась в течение одной недели. Пациентка указала, что инъекции облегчили боль настолько, что она смогла вернуться к своему прежнему уровню активности.

Доктор Смит отмечает, что общее состояние здоровья пациента способствовало успеху лечения.

«Одна из вещей, которые, по моему мнению, имеют отношение к ее успеху, это то, что она очень здорова», — говорит доктор Смит. «Мы работаем с биологическими продуктами. Они настолько здоровы, насколько здоровы люди, от которых они получены. Я твердо верю, что чем здоровее вы, тем больше шансов, что эти методы лечения будут успешными».

PRP и BMAC еще не одобрены Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) для лечения боли при остеоартрите и поэтому обычно не покрываются страховкой.Помимо лечения пациентов с помощью PRP и BMAC, доктор Смит и его коллеги проводят одобренные FDA клинические испытания по использованию очищенных стволовых клеток для лечения артрита коленного сустава. А исследователи в кампусе клиники Майо в Джексонвилле, штат Флорида, проводят клинические испытания, сравнивая традиционное лечение PRP с инъекциями концентрированных стволовых клеток костного мозга при остеоартрите колена.

Для получения дополнительной информации

Исследование безопасности и применимости культуры расширенных стволовых клеток, полученных из собственной жировой ткани пациента, для лечения остеоартрита коленного сустава. Клиника Майо.

Обычная обогащенная тромбоцитами плазма по сравнению с инъекциями концентрированных стволовых клеток костного мозга при остеоартрозе коленного сустава. Клиника Майо.

Лечение разрывов вращательной манжеты плеча богатой тромбоцитами плазмой: проспективное исследование с последующим 2-летним наблюдением | BMC Musculoskeletal Disorders

Наиболее важные результаты этого исследования заключаются в том, что инъекция PRP в двойную ротаторную манжету безопасна и дает стабильно положительные результаты у пациентов с частичными разрывами вращательной манжеты плеча, у которых консервативное лечение оказалось неэффективным. инъекция.Ни у одного из пролеченных пациентов не наблюдалось усиления симптомов, которые указывали бы на прогрессирование патологии вращательной манжеты плеча от частичного до полного разрыва. Это первое исследование, демонстрирующее устойчивое улучшение в течение двух лет после инъекции. Это первое сообщение о двойной инъекции во вращательную манжету плеча. По нашему мнению, это исследование помогает установить, что инъекция PRP является предпочтительным методом лечения частичных разрывов вращательной манжеты плеча, которые не позволяют модифицировать активность и физиотерапию. Побочные эффекты практически неизвестны, и мы не наблюдали их, кроме кратковременной боли сразу после инъекции.Единственным препятствием для ухода является то, что пациенты должны платить за процедуру, поскольку она не возмещается коммерческой страховкой, хотя некоторые советы по компенсации работникам разрешают оплату.

Несмотря на то, что в этом исследовании не использовалась контрольная группа, у всех пациентов исходное консервативное лечение, включая модификацию активности и физиотерапию, было неудачным до включения в это исследование. Хотя консервативное лечение продолжалось после лечения с помощью PRP, из-за этого более раннего отсутствия улучшения пациенты работали как отдельная контрольная группа.Мы чувствуем, что можем с достаточной степенью уверенности сказать, что улучшение, наблюдаемое после инъекции PRP, было связано с инъекцией, а не с консервативным лечением.

Слабой стороной исследования является использование показателей общего улучшения для определения улучшения состояния пациентов после лечения. Эта оценка сообщается пациентами самостоятельно и из-за длительного периода наблюдения может быть подвержена некоторой систематической погрешности припоминания пациентами. Мы подкрепили эти оценки стандартизированными оценками по ВАШ и Q-DASH, которые демонстрируют результаты, соответствующие глобальным оценкам по улучшению.Клинически мы обнаружили, что оценка общего улучшения является очень простой, но полезной мерой для отслеживания улучшения состояния пациента или отсутствия улучшения лечения.

Дополнительным недостатком этого исследования является то, что некоторые пациенты получили 1 или 2 дополнительные инъекции PRP после первой пары. PRP повторяли только у пациентов, у которых уже наблюдалось улучшение после лечения, но которые хотели более сильного улучшения. Пациентам, у которых не было улучшения после первоначального лечения, повторную инъекцию не вводили. Таким образом, хотя повторная инъекция могла повлиять на продолжительность или степень улучшения, она не влияла на положительный ответ пациента на лечение. Из-за этого мы считали, что эти пациенты должны оставаться включенными в исследование. Другим важным открытием нашего исследования было то, что инъекции лучше всего действовали в более структурно поврежденных сухожилиях. Тяжелые частичные разрывы, которые, как мы опасались, могут не принести пользы, в целом показали себя довольно хорошо и показали лучшие результаты среди всех групп. Менее тяжелые частичные разрывы также хорошо себя зарекомендовали, как и полнослойные разрывы.Лечение этих групп, у всех из которых было значительное структурное повреждение сухожилия, дало результаты, которые существенно не отличались друг от друга.

Однако, несмотря на то, что у пациентов с воспалением с минимальным структурным повреждением или без него в целом наблюдалось улучшение, оно было статистически значимо меньше, чем у пациентов с разрывами сухожилий. Это был неожиданный результат, так как мы ожидали наилучших результатов в наименее поврежденных сухожилиях. Мы не можем полностью объяснить этот вывод. Возможно, у этих пациентов с тендинитом была боль из какого-то другого источника, кроме вращательной манжеты плеча: хотя ни у одного из них не было замороженного плеча, значительного артроза, воспаления акромиально-ключичного сустава или значительной патологии губы.Мы считаем более вероятным, что такие пациенты просто имеют повышенную чувствительность к использованию плеча. Это сделает их симптоматическими на более ранней стадии износа сухожилий, а также с меньшей вероятностью принесет пользу от лечения. Это также соответствует выводу о том, что пациенты с более нормальными предоперационными рентгенограммами чувствуют себя хуже после замены сустава, чем пациенты с более выраженной патологией. [32,33,34]

Интересно также, что процент пациентов со значительным улучшением был стабильным или улучшился в группе > 50 % разрывов и полнослойных разрывов через 2 года наблюдения, немного снизился в < 50 % разрывной группе и уменьшился больше в группе тендинита. Это усиливает взаимосвязь между структурным повреждением и полезным эффектом PRP. Группа < 50 % может представлять собой сочетание значительного структурного повреждения и сильно выраженного воспаления, результаты которого фактически были промежуточными между группами с определенно значительным повреждением > 50 % частичным разрывом и разрывом полной толщины с отличными результатами, с одной стороны, и неструктурными менее хорошие результаты поврежденной группы тендинита на другом. Интересно, что в когорте тендинита наблюдалось значительное снижение числа пациентов в процентах от общей когорты, у которых наблюдалось улучшение от одного до двух лет наблюдения.Однако среднее улучшение значительно возросло. Таким образом, когорта разделилась на подгруппу с отличным улучшением с первого по второй год и группой, в которой улучшения не было.

Подгруппа с тендинитом также была значительно моложе по возрасту, что позволяет предположить, что более низкие баллы в группе с тендинитом могут быть частично связаны с более низким возрастом. Однако, поскольку пациенты с тендинитом составляли большинство (73 %) пациентов самой молодой возрастной группы <35 лет, дифференцировать влияние возраста от патологии невозможно.

Также повезло, что PRP показала лучшие результаты в сухожилиях с определенным структурным поражением, поскольку большинство этих пациентов (по крайней мере, в Соединенных Штатах) перешли бы к хирургическому вмешательству, если бы PRP не была успешной. Таким образом, хирургического вмешательства удалось избежать у пациентов, которым было рекомендовано хирургическое вмешательство, если не было предложено лечение PRP. Это также радует, поскольку операции по поводу частичных разрывов, как правило, ненадежны с относительно высокой частотой неудач [3, 4, 6, 7].Таким образом, пациенты с PRP были избавлены не только от хирургического риска, но и от значительной вероятности неудовлетворительного хирургического результата.

Третий вывод этого исследования заключается в том, что, судя по симптомам, у пациентов не наблюдалось прогрессирования частичного разрыва ротаторной манжеты в полнослойный. Этот вывод был бы подкреплен выполнением МРТ после лечения, чего не было сделано. Однако ухудшение симптомов является убедительным показателем ухудшения патологии. Хотя не у всех пациентов на фоне лечения наблюдалось улучшение, ни у одного из них не наблюдалось сильного ухудшения симптомов, которое могло бы свидетельствовать о переходе от частичного разрыва вращательной манжеты к полнослойному.Для проверки этого первоначального впечатления рекомендуется последующее исследование, включающее МРТ после лечения.

Наше двухлетнее наблюдение является самым продолжительным из когда-либо зарегистрированных результатов применения PRP при патологии вращательной манжеты плеча. Наши результаты, показывающие улучшение, согласуются с другими исследованиями [12, 13, 14, 16, 17, 18, 20, 21, 22, 23]. Следующее самое продолжительное наблюдение было сообщено Mautner [16], который обнаружил, что 81 % пациентов значительно улучшились в среднем через 15 месяцев. Важно отметить, что мы обнаружили, что в целом результаты продолжали улучшаться от одного до двух лет как для Q-DASH, так и для VAS, и не изменились для субъективного глобального рейтинга улучшения. Это открытие делает вероятным то, что хорошие двухлетние результаты вряд ли ухудшатся при более длительном наблюдении.

Заболевание вращательной манжеты плеча у пациентов без полнослойных разрывов в основном представляет собой заболевание, основанное на симптомах. В исследовании Miniaci [35] МРТ была проведена на 30 плечах молодых добровольцев (в возрасте от 17 до 49 лет), у которых не было симптомов со стороны плеча и известных аномалий. Ни одно из плеч не было оценено как нормальное, все оценили, по крайней мере, какой-то сигнал, а 23 % оценили как имеющие изменения высокой степени.На основании этого исследования клинические симптомы, а не изменения на МРТ, являются определяющим фактором в диагностике заболевания вращательной манжеты плеча. С этой точки зрения PRP является не только паллиативным средством, но и в некоторой степени потенциально «излечивающим» заболевание вращательной манжеты плеча. Тот факт, что сухожильная ткань способна к заживлению и регенерации, делает эту возможность еще более возможной. Однако мы хотели бы подчеркнуть, что мы не проводили рутинные МРТ после лечения, чтобы оценить эту возможность, поскольку не было никаких клинических причин для их получения, за исключением отдельных случаев.

Мы хотели бы заявить, что мы очень твердо убеждены в том, что лечение поврежденного плеча с вращательной манжетой после лечения PRP является критически важным. В частности, модификации активности, подробно описанные в разделах, посвященных методам, необходимы как для поддержания общего состояния вращательной манжеты плеча, так и для конкретных улучшений, вызванных инъекцией PRP. Хотя некоторые врачи могут считать эти ограничения непрактичными, мы обнаружили, что они чрезвычайно эффективны и приемлемы для пациентов, когда требуется время, чтобы объяснить им, почему эти модификации важны.

Что касается полнослойных разрывов в этом исследовании, мы не знаем, насколько эти разрывы прогрессировали за время исследования, так как мы не получали последующие МРТ. Если позволяет здоровье, мы рекомендуем нашим пациентам, чтобы все полнослойные разрывы подвергались хирургическому лечению у пациентов в возрасте до 80 лет. Однако у нездоровых пациентов и пациентов старше 80 лет мы не проводим пластику, так как считаем, что риск даже незначительной артроскопической хирургии обычно превышает пользу для этой группы населения.Наши результаты небольшого количества инъекций полной толщины слез с общими очень хорошими результатами и устойчивым эффектом в течение двух лет заставили нас рекомендовать PRP в качестве основного лечения боли для пожилых или более немощных пациентов, у которых физиотерапия не удалась. Мы не используем инъекции кортикостероидов в этой популяции (или для любого пациента с плечом, за исключением некоторых пациентов с замороженным плечом) из-за риска побочных эффектов, ухудшения повреждения сухожилия и, как правило, короткой продолжительности улучшения [10, 18, 36].

Ограничением данного исследования является ограниченный размер когорты полнослойных разрывов вращательной манжеты плеча. Однако единообразие пользы в этой когорте несколько смягчает это ограничение. Ограниченный размер каждой подгруппы также ограничивает надежность сравнения подгрупп. Сильной стороной исследования является высокая частота наблюдения и наблюдения в течение 2 лет после лечения.

Обогащенная тромбоцитами плазма (PRP) при остеоартрите (ОА) коленного сустава: правильная доза имеет решающее значение для долгосрочной клинической эффективности

  • Messina, O.D. и др. Питание, остеоартрит и метаболизм хрящей. Клиника старения. Эксп. Рез. 31 , 807–813 (2019).

    Артикул Google ученый

  • Чжан В. и др. Текущие исследования фармакологической и регенеративной терапии остеоартрита. Кость Res. 4 , 1–4 (2016).

    КАС Google ученый

  • Дзобо, К. и др. Достижения в области регенеративной медицины и тканевой инженерии: инновации и трансформация медицины. Стволовые клетки, международный 2018 , 2495848 (2018).

    ПабМед ПабМед Центральный Статья КАС Google ученый

  • До Амарал, Р. Дж. Ф. С. и др. Богатая тромбоцитами плазма, полученная с различными антикоагулянтами, и их влияние на количество тромбоцитов и поведение мезенхимальных стромальных клеток in vitro . Стволовые клетки, международный 2016 , 7414036 (2016).

    ПабМед ПабМед Центральный Статья КАС Google ученый

  • Халперн, Британская Колумбия и др. Роль богатой тромбоцитами плазмы в заживлении костно-мышечной ткани. HSS J. 8 , 137–145 (2012).

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Яловец, Ю.М. и др. Исследование in vitro геля плазмы, богатой тромбоцитами, в качестве средства доставки клеток и факторов роста для тканевой инженерии. Ткань Eng. C 22 , 49–58 (2016).

    КАС Статья Google ученый

  • Марловиц С. и др. Новый упрощенный метод получения плазмы, обогащенной тромбоцитами: Краткое техническое примечание. евро. Spine J. 13 , 102–106 (2004).

    Артикул Google ученый

  • Мусса, М. и др. Обогащенная тромбоцитами плазма (PRP) индуцирует хондропротекцию за счет усиления аутофагии, противовоспалительных маркеров и снижения апоптоза в хряще человека при остеоартрите. Эксп. Клетка. Рез. 352 , 146–156 (2017).

    КАС Статья Google ученый

  • Bansal, H. и др. Внутрисуставная инъекция в коленный сустав стромальных клеток, полученных из жировой ткани (стромально-васкулярная фракция), и обогащенной тромбоцитами плазмы при остеоартрите. Дж. Пер. Мед. 15 , 141 (2017).

    ПабМед ПабМед Центральный Статья КАС Google ученый

  • Kennedy, MI et al. Обогащенная тромбоцитами плазма и восстановление хрящей. Курс. Преподобный Опорно-двигательный аппарат. Мед. 11 , 573–582 (2018).

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Сэмпсон, С. и др. Инъекция обогащенной тромбоцитами плазмы пациентам с первичным и вторичным остеоартритом коленного сустава: пилотное исследование. утра. Дж. Физ. Мед. реабилитация 89 , 961–969 (2010).

    Артикул Google ученый

  • Raeissadat, S.A. и др. Влияние богатой тромбоцитами плазмы на боль, функцию и качество жизни пациентов с остеоартритом коленного сустава. Снятие Боли. Обращаться. 2013 , 165967 (2013).

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Migliorini, F. et al. Сравнение внутрисуставных инфильтратов плацебо, стероидов, гиалуроновой кислоты и PRP при остеоартрите коленного сустава: метаанализ байесовской сети. Арх. Ортоп. травма хирург. 165 , 12 (2020).

    Google ученый

  • Коул Б.J. и др. Гиалуроновая кислота по сравнению с богатой тромбоцитами плазмой: проспективное двойное слепое рандомизированное контролируемое исследование, сравнивающее клинические результаты и влияние на внутрисуставную биологию при лечении остеоартрита коленного сустава. утра. Дж. Спорт Мед. 45 , 339–346 (2017).

    Артикул Google ученый

  • Патерсон, К. Л. и др. Внутрисуставная инъекция фотоактивированной богатой тромбоцитами плазмы у пациентов с остеоартрозом коленного сустава: двойное слепое рандомизированное контролируемое пилотное исследование. BMC Опорно-двигательный аппарат. Беспорядок. 17 , 67 (2016).

    ПабМед ПабМед Центральный Статья КАС Google ученый

  • Филардо Г. и др. Применение PRP с низким содержанием лейкоцитов для лечения остеоартрита коленного сустава. Суставы. 1 , 112–120 (2013).

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Халперн, Б. и др. Клинические и МРТ-результаты после лечения остеоартрита коленного сустава обогащенной тромбоцитами плазмой. клин. Дж. Спорт Мед. 23 , 238–239 (2013).

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • «>

    Кавадар Г. и др. Эффективность богатой тромбоцитами плазмы при лечении умеренного остеоартрита коленного сустава: рандомизированное проспективное исследование. J. Phys. тер. науч. 27 , 3863–3867 (2015).

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Нис, Т. А. и др. Синовиальные цитокины значительно коррелируют с болью в колене, связанной с остеоартритом, и инвалидностью: медиаторы воспаления, имеющие потенциальное клиническое значение. Дж. Клин. Мед. 8 , 1343 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Эренфест, Д.М. и др. Классификация концентратов тромбоцитов: от чистой богатой тромбоцитами плазмы (P-PRP) до богатого лейкоцитами и тромбоцитами фибрина (L-PRF). Тенденции биотехнологии. 27 , 158–167 (2009).

    Артикул КАС Google ученый

  • Санчес-Гонсалес, Д. Дж. и др. Пептиды плазмы, обогащенные тромбоцитами: ключ к регенерации. Междунар. Дж. Пепт. 2012 , 53251 (2012).

    Артикул КАС Google ученый

  • Сюй, З. и др. Сравнительная оценка плазмы, обогащенной лейкоцитами и тромбоцитами, и чистой плазмы, обогащенной тромбоцитами, для регенерации хряща. наук. Респ. 7 , 43301 (2017).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Riboh, J.C. et al. Влияние концентрации лейкоцитов на эффективность богатой тромбоцитами плазмы при лечении остеоартрита коленного сустава. утра.Дж. Спорт Мед. 44 , 792–800 (2016).

    Артикул Google ученый

  • «>

    Fahy, N. и др. Иммунная модуляция для улучшения результатов тканевой инженерии при восстановлении хряща в остеоартритном суставе. Ткань Eng. B Rev. 21 , 55–66 (2015).

    Артикул Google ученый

  • Яннитти Т. и др. Внутрисуставные инъекции для лечения остеоартрита. Исследования и разработки лекарственных средств. 11 , 13–27 (2011).

    Артикул Google ученый

  • Читнис, А. С. и др. Реальное влияние высокой концентрации нептичьего высокомолекулярного гиалуронана на использование обезболивающих препаратов у пациентов с остеоартритом. Курс. Мед. Рез. мнение 35 , 1523–1527 (2019).

    КАС Статья Google ученый

  • Хирояки О. и др. Среднесрочная эффективность внутрисуставных инъекций гиалуроновой кислоты на структуру сустава: вложенное исследование случай-контроль. мод. Ревматол. 4 , 722–728 (2013).

    Google ученый

  • Альтман, Р. и др. Инъекции гиалуроновой кислоты связаны с задержкой операции тотального эндопротезирования коленного сустава у пациентов с остеоартритом коленного сустава. PLoS ONE 10 , e0145776 (2015).

    ПабМед ПабМед Центральный Статья КАС Google ученый

  • Озкамдалли, М. и др. Сравнение внутрисуставных инъекций гиалуроновой кислоты и N-ацетилцистеина при лечении остеоартрита коленного сустава: экспериментальное исследование. Хрящ. 4 , 384–390 (2017).

    Артикул КАС Google ученый

  • Альтман Р.D. и др. Оценка методологии клинических рекомендаций по лечению остеоартрита коленного сустава внутрисуставным введением гиалуроновой кислоты. Семин Артрит Рев. 45 , 132–139 (2015).

    КАС Статья Google ученый

  • Герман, Дж. и др. Добавки, повышающие вязкость при остеоартрите коленного сустава: пересмотр данных. JBJSRев. 4 , e11–e111 (2016).

    Google ученый

  • Мишра А. и др. Забуференная богатая тромбоцитами плазма усиливает пролиферацию мезенхимальных стволовых клеток и хондрогенную дифференцировку. Ткань Eng. C 15 , 431–435 (2009).

    КАС Статья Google ученый

  • Инь, В. и др. Преимущества чистой плазмы, богатой тромбоцитами, по сравнению с плазмой, обогащенной лейкоцитами и тромбоцитами, в содействии заживлению костных дефектов. Дж. Пер. Мед. 14 , 73 (2016).

    ПабМед ПабМед Центральный Статья КАС Google ученый

  • «>

    Кон, Э. и др. Обогащенная тромбоцитами плазма: внутрисуставные инъекции в коленный сустав дали благоприятные результаты при дегенеративных поражениях хряща. Хирургия коленного сустава. Спортивный травматол. Артроск. 4 , 472–479 (2010).

    Артикул Google ученый

  • Ю, В. и др. Клиническая терапия гиалуроновой кислотой в сочетании с обогащенной тромбоцитами плазмой для лечения остеоартрита коленного сустава. Эксп. тер. Мед. 16 , 2119–2125 (2018).

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Casula, V. и др. Повышенные адиабатические T1ρ и T2ρ в суставном хряще связаны с поражением хрящей и костей при раннем остеоартрите: предварительное исследование. Дж.Магн. Резон. Imaging 46 , 678–689 (2017).

    Артикул Google ученый

  • «>

    Мациолис Г. и др. Объем коленного сустава человека. Арх. Ортоп. травма хирург. 135 , 1401–1403 (2015).

    Артикул Google ученый

  • Эбихара, А. Хельсинкская декларация Всемирной медицинской ассоциации. япон. Фармакол.тер. 28 , 983–986 (2000).

    Google ученый

  • McConnell, S. et al. Индекс остеоартрита Университетов Западного Онтарио и Макмастера (WOMAC): обзор его полезности и измерительных свойств. Артрит. Уход Рез. 45 , 453–461 (2001).

    КАС Статья Google ученый

  • Хефти, Э. и др. Оценка повреждений связок колена по форме IKDC. Хирургия коленного сустава. Спортивный травматол. Артроскоп. 1 , 226–234 (1993).

    КАС Статья Google ученый

  • «>

    Гокер Б. и др. Количественная рентгенологическая оценка ширины суставной щели голеностопного сустава. клин. Ортопедический. Относ. Рез. 467 , 2083–2089 (2009).

    Артикул Google ученый

  • Кон, М.D. и др. Кратко о классификации: классификация остеоартрита по Келлгрену-Лоуренсу. клин. Ортоп. Относ. Рез. 474 , 1886–1893 (2016).

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Peterfy, C.G. и др. Инициатива по борьбе с остеоартритом: отчет об обосновании дизайна протокола магнитно-резонансной томографии коленного сустава. Остеоартрит. Картил. 16 , 1433–1441 (2008).

    КАС Статья Google ученый

  • Гонг, Р. и Хуанг, С. Х. Колмогоров-Смирнов, основанный на статистической сегментации, к изучению несбалансированных наборов данных: с применением в прогнозировании рефинансирования собственности. Эксперт Сист. заявл. 39 , 6192–6200 (2012).

    Артикул Google ученый

  • Как долго действуют инъекции PRP?

    Обогащенная тромбоцитами плазма, или PRP-терапия, помогает при многих проблемах со здоровьем, включая артрит.PRP-терапия основана на идее, что тело способно исцелять себя. Выделяя богатую тромбоцитами плазму из крови, врачи могут лечить поврежденные хрящи, сухожилия, связки, мышцы и кости. Многие люди видят преимущества этой терапии, особенно потому, что она может избавить их от необходимости переносить операцию. Многие люди также задаются вопросом, как долго длятся инъекции PRP. Были проведены исследования, показывающие, что инъекции PRP могут быть эффективны в течение 6-9 месяцев. Однако диапазон времени, в течение которого лечение PRP эффективно, зависит от нескольких факторов.

    Как долго длятся инъекции PRP: 3 ключевых фактора

    Некоторые из основных факторов, влияющих на определение продолжительности инъекций PRP, включают:

    1. Состояние, для лечения которого используется инъекция PRP
    2. Состояние здоровья больного в целом
    3. Реакция организма на начальное лечение PRP

    Как и в большинстве случаев в медицине, каждый человек будет испытывать исцеление от лечения по-своему. Точное количество времени, в течение которого будут продолжаться инъекции PRP, естественно, будет варьироваться от пациента к пациенту.Кроме того, общие результаты этих методов лечения будут варьироваться от ситуации к ситуации.

    PRP при артрите

    Инъекции

    PRP используются для лечения широкого спектра заболеваний, включая боль и травмы. PRP можно даже использовать для лечения артрита, особенно артрита коленей. Кроме того, многие врачи в настоящее время используют PRP для лечения длинного списка ортопедических заболеваний, таких как остеоартрит.

    Исследование, проведенное Американским журналом спортивной медицины, показало, что пациенты с остеоартритом сообщили об уменьшении уровня боли через неделю после PRP по поводу артрита.Более того, пациенты, участвовавшие в этом исследовании, сообщили, что их уровень боли уменьшился в течение шести месяцев после инъекций PRP. Были проведены и другие исследования, которые подтвердили результаты первоначального исследования, проведенного Американским журналом спортивной медицины.

    Согласно этим исследованиям и отзывам пациентов, участвовавших в них, PRP при артрите была эффективной в лечении боли в течение шести месяцев. Также известно, что продолжительность времени, в течение которого инъекции PRP могут быть полезными, часто продлевается за счет периодических поддерживающих инъекций.

    Ранее мы упоминали, что существуют некоторые факторы, влияющие на определение того, как долго инъекции PRP при артрите будут эффективны для купирования боли у пациента. Эффективность лечения PRP зависит от конкретного состояния, для лечения которого используется PRP. Некоторые условия являются более запущенными, и поэтому их будет труднее лечить.

    Другим соображением при любой медицинской процедуре или лечении является общее состояние здоровья пациента, проходящего лечение. Логично, что пациенту будет легче выздороветь, и он получит больше пользы от лечения, если его общее состояние здоровья улучшится.Пациенту, у которого в целом плохое здоровье, будет труднее, и из-за ряда факторов здоровья он может не так хорошо реагировать на лечение.

    Наконец, все люди разные, и то, как организм пациента реагирует на первую инъекцию PRP, будет говорить о том, как пациент отреагирует на лечение в целом и увидит ли он значительные улучшения.

    Проще говоря, нет однозначного ответа на вопрос о том, как долго будут действовать инъекции PRP при артрите.Мы можем с большой долей уверенности предположить, что лечение начнет уменьшать боль в течение недели после первоначальной инъекции и будет оставаться очень полезным в течение шести месяцев, возможно, дольше, если будут добавлены поддерживающие инъекции. Исследования и исследования показывают, что это хороший стандарт того, как долго инъекции PRP действуют в организме. Пациенты будут иметь уникальный опыт в зависимости от факторов, которые мы обсуждали здесь.

    В заключение

    В целом, инъекции PRP являются привлекательным вариантом для снятия боли и лечения артрита, потому что часто альтернативой является жизнь с болью или инвазивная хирургия. Если вы страдаете от артрита, вы достаточно долго жили с болью. Артрит может ограничить вашу способность выполнять повседневные задачи и значительно снизить качество жизни. Управление болью, вызванной артритом, важно для вашего общего состояния здоровья и благополучия. Для некоторых операция может быть лучшим или единственным доступным вариантом. Для других инъекции PRP будут менее инвазивной альтернативой хирургическому вмешательству.

    Операции не только инвазивны, но и восстановление после них может занять недели и недели. Время, необходимое для выздоровления, может быть периодом лишений для многих людей и может затруднить поддержание других режимов здоровья.С инъекциями PRP для артрита у вас не будет такого же периода восстановления. Кроме того, вы можете почувствовать преимущества в течение недели после получения первой инъекции.

    PRP-терапия

    PRP-терапия — это медицинская процедура, основанная на осознании того, что ваше тело способно исцелять себя. Знание того, что вы исцеляете себя, может быть очень вдохновляющим. Инъекции PRP берут ресурсы из вашего тела, улучшают их и повторно вводят в ваше тело, чтобы помочь в процессе самоисцеления.

    Если вы заинтересованы в изучении возможностей инъекций PRP, , свяжитесь с Cano Health сегодня . Мы здесь, чтобы помочь.

    Обогащенная тромбоцитами плазма, полученная с использованием различных антикоагулянтов, и их влияние на число тромбоцитов и поведение мезенхимальных стромальных клеток In Vitro

    Имеются многообещающие результаты использования обогащенной тромбоцитами плазмы (PRP) для восстановления костно-мышечной ткани. Однако вариативность методологии его получения может привести к различным и противоположным выводам в литературе.В частности, выбор антикоагулянта является первым определением, которое необходимо сделать. В этой работе кровь собирали с цитратом натрия (SC), этилендиаминтетрауксусной кислотой (EDTA) или раствором антикоагулянта цитрата декстрозы (ACD) A в качестве антикоагулянтов до получения PRP. Проводили гематологический анализ и количественную оценку высвобождения факторов роста, а также оценивали влияние на культуру мезенхимальных стромальных клеток (МСК), такое как цитотоксичность и пролиферация клеток (оценивали методом МТТ) и экспрессию генов.Использование ЭДТА приводило к более высокому выходу тромбоцитов в цельной крови; однако он индуцировал увеличение среднего объема тромбоцитов (MPV) после этапов центрифугирования крови для получения PRP. Использование СК и АЦД приводило к более высокой индукции пролиферации МСК. С другой стороны, PRP, полученный в SC, показал более высокое восстановление тромбоцитов после первого этапа центрифугирования крови и минимальное изменение экспрессии генов MSC. Поэтому мы предлагаем использовать СК в качестве антикоагулянта для получения PRP.

    1. Введение

    Обогащенная тромбоцитами плазма (PRP) представляет собой продукт, полученный из крови, в котором концентрация тромбоцитов в плазме не менее чем в пять раз выше исходного уровня в цельной крови [1]. PRP исследуется как аутологичный продукт для улучшения восстановления тканей при различных состояниях и повреждениях, особенно для скелетно-мышечных тканей, таких как хондральные поражения [2–4], тендинопатии [5–7], растяжения мышц [8, 9] и кости. ремонт [10, 11]. Помимо клинического применения, PRP может быть эффективной заменой эмбриональной бычьей сыворотке в культуре клеток [12–15].Его терапевтический потенциал основан главным образом на факторах роста, присутствующих в альфа-гранулах тромбоцитов [16], таких как бета-трансформирующий фактор роста (TGF- β ) [17], фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) [18] и производный фактор роста (PDGF) [19], который, как уже было показано, играет важную роль в восстановлении тканей. Когда тромбоциты концентрируются и активируются, ожидается, что концентрация высвобождаемых факторов в три-пять раз превышает концентрацию в плазме [16].

    Общая методика получения PRP включает сбор цельной крови с антикоагулянтами с последующим одним или двумя этапами центрифугирования. После первого низкоскоростного центрифугирования выделяют свободную от тромбоцитов эритроцитарную концентрированную плазму и подвергают высокоскоростному центрифугированию. Затем бедную тромбоцитами плазму отбрасывают, а оставшийся осадок тромбоцитов гомогенизируют в так называемую PRP [16]. Некоторые аспекты этого метода все еще обсуждаются, например, количество центрифугирований, наличие лейкоцитов, а также использование и тип активатора тромбоцитов и антикоагулянтов [20].Когда антикоагулянт не используется, образуется тромб, и можно получить сыворотку, но без повышения концентрации тромбоцитов [21]. В случае получения PRP коагуляция не должна происходить до концентрации тромбоцитов; следовательно, кровь необходимо собирать в присутствии антикоагулянтов.

    Кровь для переливания обычно собирают в пакеты, содержащие в качестве антикоагулянта раствор цитрата фосфата декстрозы аденина (ЦФДА-1) [22, 23], из которого путем двойного центрифугирования цельной крови или афереза ​​получают концентрат тромбоцитов. Концентраты тромбоцитов, полученные с помощью таких методик, также могут быть использованы для стимуляции восстановления тканей [24]. С другой стороны, современные препараты PRP для аутологичных применений обычно готовят в пробирках для сбора, содержащих растворы цитрата, в форме цитрата натрия [25–29] или ACD-A [30–32]. Последний, ACD, присутствует в большинстве доступных коммерческих наборов для производства PRP [33, 34]. В других случаях можно использовать гепарин [35, 36] или ЭДТА [37]. Для клинических исследований EDTA обычно используется в гематологических тестах, SC в тестах на коагуляцию и ACD в измерении уровней компонентов тромбоцитов в плазме [38].Поэтому наша цель состояла в том, чтобы проанализировать, как выбор антикоагулянта для сбора крови будет влиять на характеристики PRP, а также его влияние на культуру мезенхимальных стромальных клеток.

    2. Материалы и методы
    2.1. Заявление об этике

    Все экспериментальные процедуры были одобрены Исследовательским комитетом по этике больницы Про-Кардиако в Рио-де-Жанейро (CAAE: 14878813. 4.0000.5533), и все доноры подписали информированное согласие.

    2.2. Получение PRP

    PRP получали, как описано ранее, с небольшими модификациями [39].Периферическую кровь собирали у девяти доноров-добровольцев (6 мужчин и 3 женщин) с использованием пробирок для забора крови, содержащих цитрат натрия (SC) (Vacutainer®, Ref: 369714; BD Biosciences, Сан-Хосе, Калифорния), этилендиаминтетрауксусную кислоту (EDTA) (Vacutainer, Ref: 367861; BD Biosciences) или раствор A антикоагулянта цитрата декстрозы (ACD) (Vacutainer, Ref: 364606; BD Biosciences). Кровь, собранную в одну пробирку с ACD, сохраняли в той же пробирке или разделяли на три полипропиленовые пробирки, не содержащие антикоагулянта (Falcon , Ref: 352063; BD Biosciences), называемые ACD-2.

    Пробирки центрифугировали при 300 g в течение 5 минут (Megafuge® 40, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA). Супернатант, содержащий плазму и тромбоциты, называемый обогащенной тромбоцитами плазмой 1 (PRP1), собирали из каждой пробирки и переносили в новые полипропиленовые пробирки, не содержащие антикоагулянта. В случае ACD и ACD-2 после подсчета тромбоцитов PRP1 от тех же доноров смешивали для следующих экспериментов. Затем PRP1 центрифугировали при 700 g в течение 17 минут. Собирали супернатант, а именно бедную тромбоцитами плазму (БТП).Часть PPP из каждой пробирки использовали для ресуспендирования осадка тромбоцитов с образованием богатой тромбоцитами плазмы 2 (PRP2) для достижения ожидаемой концентрации 10 6  тромбоцитов/ мкл л. Тромбоциты в PRP2 были активируют добавлением 1 М CaCl 2 (конечная концентрация 20 мМ) и инкубируют при 37°С в течение 1 часа. После образования сгустка пробирки выдерживали при 4°C в течение 16 часов, чтобы сгусток сжался. Наконец, пробирки центрифугировали при 3000 g в течение 20 минут и собирали супернатант, называемый высвобождением богатой тромбоцитами плазмы (PRPr).PRPr замораживали при температуре -80°C до оттаивания для экспериментального использования.

    2.3. Гематологический анализ

    Подсчет тромбоцитов, эритроцитов, лейкоцитов и анализ среднего объема тромбоцитов (MPV) определяли в цельной крови, фракциях PRP1, PRP2 и PPP. Эти анализы были выполнены с помощью гематологического анализатора (Mindray BC 2800, Perdizes, SP, Бразилия). Восстановление тромбоцитов после первого этапа центрифугирования, выраженное в процентах, рассчитывали путем деления общего количества тромбоцитов в PRP1 на общее количество тромбоцитов в цельной крови.

    2.4. Количественное определение факторов роста

    TGF- β 1 и VEGF, полученные из PRPr, количественно определяли с использованием наборов ELISA (Ref: KAC1688 и Ref: KHG0111; Invitrogen , Thermo Fisher Scientific) в соответствии с инструкциями производителя. Поглощение определяли с помощью устройства для считывания микропланшетов (Multiskan GO, Thermo Fisher Scientific).

    2.5. Выделение и культивирование мезенхимальных стромальных клеток костного мозга (BM-MSC)

    120 мл костного мозга было получено после донорства с информированного согласия от двух доноров (41-летняя женщина, чьи клетки использовались для анализа жизнеспособности клеток, и 60-летний мужчина, клетки которого использовали для анализа экспрессии генов). Мононуклеарные клетки отделяли с помощью системы Sepax (Biosafe, Eysins, Швейцария) в соответствии с инструкциями производителя и высевали при 4 × 10 5  клеток/см 2 в минимальной эссенциальной среде Eagle Alpha Modification (alpha MEM) (Cultilab, Campinas, SP, Бразилия) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS) (Gibco) в культуральных флаконах T 150  см 2 (Corning Incorporated, Corning, NY) и хранении в инкубаторе с 5% CO 2 при 37° С. Через 5 дней среду меняли и неприлипшие клетки удаляли.Среду меняли каждые два дня. Это было названо «первичной культурой». Примерно через 10 дней при 70–80% слиянии клетки отделяли от культуральных флаконов с помощью 0,05% раствора трипсина (Gibco®, Thermo Fisher Scientific) и повторно высевали в новые культуральные флаконы с плотностью 8 × 10 3  клеток/см 2 . После первой трипсинизации культуру называли «пассажем №1». Эксперименты проводились до «пассажа № 5».

    2.
    6. Анализ жизнеспособности клеток

    Анализ жизнеспособности клеток проводили путем включения тиазолилового синего тетразолия бромида (анализ МТТ) (Sigma Aldrich, Сан-Паулу, шт. СП, Бразилия).Клетки (пассаж № 3) высевали с плотностью 5 × 10 3  клеток/см 2 в двух повторностях в 48-луночные планшеты (Corning Incorporated) в альфа-МЕМ (Cultilab) с добавлением 10% FBS (Gibco), 1% ПРПр, 2,5% ПРПр или 5% ПРПр. Были использованы четыре различных донора PRr. В другой группе четыре образца были объединены с равными пропорциями каждого донора, а именно, PRPr MIX. Через 8 дней культивирования добавляли 0,5 мг/мл МТТ. Среду удаляли через 4 часа инкубации и добавляли 400  мкл л/лунку ДМСО для растворения восстановленного формазанового продукта.Объем каждой из 48 лунок разделяли на две лунки в 96-луночном планшете (Corning Incorporated). Наконец, планшет считывали в устройстве для считывания микропланшетов (Multiskan GO, Thermo Fisher Scientific) при 570 нм. Среда культивирования клеток не менялась во время этого эксперимента.

    2.7. Оценка экспрессии генов

    Клетки (пассаж № 5) культивировали в альфа-МЕМ (Cultilab) с добавлением 10% FBS (Gibco), 1% PRPr, 2,5% PRPr или 5% PRPr. PRPR использовали как пул четырех разных доноров.Через пять дней культивирования тотальную РНК экстрагировали с использованием TRIzol® (Ambion®, Thermo Fisher Scientific). Концентрацию РНК определяли с помощью спектрофотометра Nanodrop 2000 UV-Vis (Thermo Fisher Scientific) и 2  µ г подвергали обратной транскрипции в комплементарную ДНК (кДНК) с использованием системы синтеза первой цепи SuperScript® для ОТ-ПЦР (Invitrogen, #11904). -018) в общем реакционном объеме 20  µ л в соответствии с протоколом производителя. Олигонуклеотиды и зонды для количественной ПЦР были приобретены у Applied Biosystems (TaqMan Gene Expression Assay, #4331182): HPRT1 (Hs02800695_m1), который анализировали как ген домашнего хозяйства, SOX9 (Hs00165814_m1), RUNX2 (Hs00231692_m1), PPARG (Hs01115513_m1) и POU5F1. (4 октября) (Hs0099634_9H). Реакции количественной ПЦР проводили в системе ПЦР стандартного времени Applied Biosystems 7500 в реакционном объеме 20  мк л с использованием TaqMan® Universal Master Mix II с UNG (Applied Biosystems, № 4440038) в соответствии с инструкциями производителя. Анализ проводили методом ΔΔCt [40].

    2.8. Статистический анализ

    Данные были проанализированы с использованием двустороннего парного теста для гематологического анализа, где группа одних и тех же доноров была проанализирована с использованием различных антикоагулянтов.В случае количественного определения фактора роста и экспериментов с клеточными культурами, где не обязательно возникало спаривание образцов, выполняли двусторонний непарный -тест. Статистическая значимость считалась при .

    3. Результаты
    3.1. Влияние различных антикоагулянтов на первоначальный подсчет и восстановление тромбоцитов

    Образцы крови были взяты у пяти разных доноров в пробирки, содержащие ЭДТА, ПК или АЦД, и тромбоциты были подсчитаны в автоматизированной системе. Образцы крови, собранные с ЭДТА, дали большее количество тромбоцитов, за которыми следовали ПК и АЦД (рис. 1(а)).В среднем количество тромбоцитов в СК было на 16,28% ниже, чем в ЭДТА, в то время как в АЦД было на 23,01% меньше, чем в ЭДТА, и на 7,94% меньше, чем в СК. Однако восстановление тромбоцитов относительно общего количества тромбоцитов, полученных после первой стадии центрифугирования, было выше в присутствии SC по сравнению с EDTA и ACD. Среднее восстановление тромбоцитов в ЭДТА и ПК составило 76,15% и 81,21% соответственно. Поразительно, восстановление тромбоцитов в образцах, собранных с помощью ACD, составило 45,71%, что почти вдвое меньше, чем при использовании EDTA или SC.Все три протестированных здесь антикоагулянта были приобретены в коммерческих тубах. Пробирка, содержащая ACD, была больше — выше и крупнее — по сравнению с EDTA и SC.

    Чтобы проверить, связано ли более низкое восстановление тромбоцитов с форматом пробирки, PRP был получен из образцов крови, обработанных антикоагулянтом в ACD, с использованием пробирок одинакового размера по сравнению с EDTA и SC (ACD-2). Восстановление тромбоцитов улучшилось (49,82%), но осталось намного ниже, чем при использовании ЭДТА (76,15%) и SC (81,21%). Значения ACD-2 статистически отличались от значений, полученных с использованием SC (), но не по сравнению с ЭДТА () (рис. 1(b)).При отдельном анализе можно было наблюдать, что восстановление тромбоцитов увеличилось у трех из пяти доноров при использовании ACD-2 вместо ACD, особенно у донора 2, с увеличением на 63,74%, в то время как у двух доноров оно уменьшилось, особенно у донора 1 с уменьшением на 25,48% после распределения крови в меньшие пробирки (рис. 1(в)). В среднем концентрация тромбоцитов в PRP2 составила 1,009 ± 57 × 10 3 / мк л в образцах с ЭДТА, 582 ± 108 × 10 3 / мк л в образцах подкожного введения, 726 ± 200 7 × 10 3 л. / мк л в образцах АЦД и 664 ± 170 × 10 3 / мк л в образцах АЦД-2.Все значения были статистически сходными между собой (), за исключением ЭДТА и СК () (данные не показаны).

    Хотя средний объем тромбоцитов (MPV), который связан с размером тромбоцитов и указывает на степень их активации, был одинаковым, когда образцы цельной крови (WB) подвергались антикоагулянтной обработке всеми тремя протестированными антикоагулянтами, он прогрессивно увеличивался после двух стадий центрифугирования в Группа ЭДТА у всех доноров (в среднем увеличение на 11,60% после первого этапа центрифугирования и дополнительное увеличение на 2,5%).84% после второго этапа центрифугирования, что в целом на 14,44% больше по сравнению с цельной кровью). Этого не наблюдалось при антикоагулянтной терапии WB при SC и ACD (рис. 2).


    3.2. Высвобождение TGF-
    β 1 и VEGF из богатой тромбоцитами плазмы в различных антикоагулянтах

    До этого момента было ясно, что антикоагулянт влияет на восстановление тромбоцитов после центрифугирования крови. Однако мы задались вопросом, изменит ли это также высвобождение факторов роста из восстановленных тромбоцитов. Для этого мы количественно определили уровни TGF- β 1 и VEGF в анализе ELISA. Концентрации факторов роста были одинаковыми в группах антикоагулянтов () как для TGF- β 1, так и для VEGF. Концентрация TGF- β 1 составляла 18 146,99 ± 2 370,33  пг/мл в ЭДТА; 48 559,10 ± 12 839,86 пг/мл в подкожном; и 30 786,15 ± 6 654,49 пг/мл в ACD (рис. 3(а)). Концентрация VEGF составила 278,88 ± 71,78 пг/мл в ЭДТА, 143,65 ± 71,63 пг/мл в подкожном и 362,70 ± 77,95 пг/мл в ACD (рис. 3(б)).

    3.3. Культура мезенхимальных стромальных клеток костного мозга

    Чтобы показать влияние факторов, высвобождаемых из тромбоцитов, полученных с использованием различных антикоагулянтов, на модулирование клеточной экспансии in vitro, мы использовали анализ жизнеспособности клеток МТТ для анализа пролиферации BM-MSC в присутствии различных концентраций PRr. В качестве эталона использовали культуральную среду с добавлением FBS (рис. 4). PRPs тестировались отдельно и смешанно (MIX). Все протестированные концентрации PRPr от всех доноров были способны стимулировать пролиферацию клеток in vitro. Как и ожидалось, более высокая испытанная концентрация (5%) стимулировала более высокую скорость пролиферации in vitro, независимо от используемого антикоагулянта. Однако для этой концентрации в среднем пролиферация клеток была ниже в присутствии PRPr, полученного из ЭДТА, по сравнению с SC и ACD (рис. 4). Кроме того, клетки сохраняли свою фибробластоподобную морфологию независимо от типа антикоагулянта (рис. 5).

    3.4. Модуляция экспрессии генов мезенхимальных стромальных клеток костного мозга с помощью культуры богатой тромбоцитами плазмы

    Мы также проанализировали экспрессию генов клеток, размноженных in vitro (рис. 6).Тестировали только клетки, культивированные в 5% PRPR. Используя 10% FBS в качестве эталона, RUNX2 был слегка активизирован в группе с ЭДТА и подавлен в группе SC. Активация PPAR γ 2 слегка повышалась в группе с ЭДТА и подавлялась в группах SC и ACD. SOX9 был подавлен во всех группах. Oct-4 активировался в группах EDTA и ACD и подавлялся в группе SC. Хотя, в целом, экспрессия генов была схожей между группами PRr, особенно при наблюдении максимальной и минимальной относительной количественной оценки экспрессии генов, группа SC показала наименьшую вариацию по сравнению с контрольной группой при анализе средней относительной экспрессии четырех генов в группах PRr по сравнению с группой FBS.В среднем, относительная экспрессия генов SC отличалась от контрольной группы на 24,73%, в то время как EDTA составляла 46,79%, а ACD отличалась на 29,74%.


    4. Обсуждение

    Обогащенная тромбоцитами плазма (PRP) в настоящее время является одной из основных стратегий восстановления костно-мышечной ткани. В литературе есть несколько сообщений, свидетельствующих о его потенциале в клинических испытаниях [2–11], а также в анализе in vitro [12–15]. Как экономически эффективный источник аутологичных факторов роста, которые могут влиять на пролиферацию и дифференцировку стволовых клеток, он все чаще исследуется в качестве добавки, адъюванта, носителя или каркаса для терапии на основе стволовых клеток [41-45]. Однако отсутствие стандартизации между методологией получения и использования PRP среди разных групп может препятствовать развитию этой технологии [20]. Использование антикоагулянтов для сбора крови является серьезной проблемой. Настоящая работа была направлена ​​на проверку получения PRP с тремя типами коммерчески доступных пробирок для сбора крови, содержащих ЭДТА, SC или ACD в качестве антикоагулянтов.

    Количество тромбоцитов было выше в крови, собранной в пробирки, содержащие ЭДТА, за которыми следовали п/к и АЦД. Действительно, ранее было показано, что количество тромбоцитов в ЭДТА может быть выше, чем в цитратных антикоагулянтах [46].Более того, добавление ЭДТА в цитратные образцы может увеличить количество тромбоцитов в цельной крови [47]. Восстановление тромбоцитов после первого этапа центрифугирования было меньше в пробирках с ACD по сравнению с ЭДТА и SC. Кроме того, более высокая концентрация PDGF-BB была обнаружена в PRP, полученном с ЭДТА, по сравнению с ACD [48]. В нашем случае мы попытались улучшить восстановление тромбоцитов в пробирках с ACD, разделив их содержимое на более мелкие пробирки (12 × 75 мм × 5 мл) без дополнительного антикоагулянта. Хотя статистических различий между этими двумя формами ACD обнаружено не было, разделение крови в пробирках меньшего размера приводило к сходному восстановлению тромбоцитов по сравнению с группой, получавшей ЭДТА.Поскольку пробирка с ACD больше (16 × 100 мм × 8,5 мл), чем пробирки с ЭДТА (13 × 75 мм × 4,0 мл) и подкожной пробирки (13 × 75 мм × 4,5 мл), возможно, более низкое восстановление тромбоцитов обусловлено не только к типу самого антикоагулянта, но и к формату тюбика. В частности, формат пробирки может оказывать большее влияние на цельную кровь/плазму, чем центрифугирование сыворотки, ввиду ее более высокой вязкости [49]. Для следующих экспериментов мы решили смешать ACD и ACD-2 PRP1 от одних и тех же доноров, поскольку он состоит из одного и того же типа антикоагулянта и поскольку последующее центрифугирование для получения PRP2 проводили в пробирках одного и того же типа для всех анализируемых групп. .

    Чтобы проверить, влияют ли этапы центрифугирования на морфологию тромбоцитов, мы количественно определили средний объем тромбоцитов (MPV) в цельной крови, PRP1 и PRP2, полученные с различными антикоагулянтами. MPV в группе ЭДТА, но не в группах SC и ACD, увеличилась после стадий центрифугирования, что может быть индикатором активации тромбоцитов [50, 51]. Действительно, в цельной крови, собранной с ЭДТА, ожидается более высокая MPV по сравнению с цитратными образцами [46]. Кроме того, ЭДТА может изменить морфологию тромбоцитов с дискоидной на неправильную сферическую [52].Действительно, использование ЭДТА сталкивается с этическими проблемами, такими как указание на то, что она является стойким загрязнителем в природной среде [53], и препятствиями для использования в некоторых странах [54]. ACD и цитрат-теофиллин-аденозин-дипиридамол (CTAD) также более эффективны в поддержании морфологии тромбоцитов, чем гепарин и SC. В этом случае также было показано, что PRP, полученный с ACD и CTAD, приводил к более высокой концентрации TGF β -1 и индукции пролиферации MSC [55]. В другом предыдущем исследовании ЭДТА, СК и АЦД сравнивали как поддерживающие реакцию тромбоцитов на индукторы агрегации. ACD оказался наиболее способным поддерживать механизмы внутритромбоцитарной передачи сигнала во время приготовления PRP [56]. Та же группа недавно показала, что ACD также способен поддерживать функции тромбоцитов в течение более длительного периода времени, чем SC [57]. В нашем случае мы не смогли найти никакой разницы в способности активации тромбоцитов и образования сгустков в PRP2, полученном с тремя разными антикоагулянтами.

    Следующим нашим шагом была оценка эффекта получения PRP в культуре клеток. Для этого мы нормализовали концентрацию тромбоцитов до идеального значения 1000 × 10 3 / µ л во всех группах таким образом, чтобы результаты коррелировали не с концентрацией тромбоцитов, а с типом антикоагулянта.Эта концентрация тромбоцитов в PRP считается терапевтической концентрацией для целей in vivo [1]. В костях, например, более низкие концентрации неудовлетворительны, а более высокие концентрации препятствуют восстановлению тканей [11]. Единственная статистическая разница, наблюдаемая в концентрации тромбоцитов в PRP2, была между группой ЭДТА и п/к. Более низкое значение в группе подкожного введения может быть связано с трудностями ресуспендирования осадка тромбоцитов. Пакеты с концентратом тромбоцитов, приготовленные с образцами цитрата в форме ACD, содержат больше агрегатов, чем пакеты, приготовленные с ЭДТА [52].Более того, эффекты PRPR на клеточную культуру всегда сравнивали с добавлением 10% среды FBS. Несмотря на то, что это ксеногенная сыворотка с этическими и научными проблемами [58], FBS по-прежнему широко используется в клеточных культурах [59] и размножении MSC in vitro [60].

    В нашем исследовании мы не смогли обнаружить различий в концентрации TGF β -1 и VEGF среди антикоагулянтов. Возможно, это связано с одинаковой концентрацией тромбоцитов между группами. В среднем концентрация TGF- β 1 варьировала от 18.от 15 нг/мл в ЭДТА до 48,56 нг/мл в п/к. В других литературных сообщениях представлены концентрации, превышающие наши результаты: 120 нг/мл [61], 169 нг/мл [62] и 89 нг/мл в PRP с концентрацией тромбоцитов в 4,69 раза выше исходного уровня цельной крови, но на 20 нг/мл в PRP с концентрацией тромбоцитов в 1,99 раза выше исходного уровня цельной крови [63]. Концентрация VEGF колебалась от 143,65 пг/мл в подкожно до 362,70 пг/мл в ACD. В других отчетах представлены концентрации, варьирующиеся от 50 мкг/мл [64] до 155 нг/мл [61]. Тем не менее, наши результаты превзошли некоторые коммерчески доступные наборы [65].

    Как и ожидалось, PRPR индуцирует пролиферацию клеток. Несмотря на различия в сравнении влияния на клеточную пролиферацию между донорами, возможно, из-за врожденных различий в содержании факторов роста и других молекул в каждой грануле тромбоцитов, проявилась очевидная закономерность: концентрация 5% PRPr в среде культивирования клеток была достаточной для индуцирования пролиферация клеток на уровне, аналогичном 10% FBS. Кроме того, SC и PRPR, полученный из ACD, оказывали большее влияние на пролиферацию клеток по сравнению с группой с ЭДТА.Морфология клеток не изменилась среди групп. BM-MSC сохраняли свою фибробластическую морфологию независимо от антикоагулянта. Хотя в литературе все еще существуют разногласия относительно эффектов PRP на дифференцировку BM-MSC, существует консенсус относительно его действия как индуктора пролиферации [66].

    В качестве окончательного анализа эффектов PRPr на BM-MSC мы наблюдали небольшие модуляции в экспрессии мастер-генов для остеогенных (RUNX2), адипогенных (PPAR γ 2) и хондрогенных (SOX9) линий [67] , а также Oct-4, ген, связанный с поддержанием стволовости [68, 69].В частности, экспрессия SOX9 была снижена. Действительно, в литературе ведется дискуссия о влиянии PRP на хондрогенез, при этом одни группы заявляют о его индуцирующих эффектах [70, 71], а другие — об ингибирующих эффектах [72, 73]. Недавно наша группа показала, что это может зависеть от концентрации PRPr, используемого в клеточной среде, при этом более низкие концентрации вызывают хондрогенез, а более высокие — ингибируют его [74]. Экспрессия Oct-4 представляла собой интенсивную вариабельность с повышением активности в группах EDTA и ACD и снижением активности в группе SC.Может ли это быть индикатором сохранения стволовости клеток или нет, это необходимо дополнительно исследовать. В целом, экспрессия генов была сходной между группами PRP, хотя SC представляла собой группу, которая представляла меньшую вариацию по сравнению с культурой с 10% FBS, что свидетельствует о том, что клетки демонстрировали самые легкие изменения в своем фенотипе при этой обработке.

    5. Заключение

    В литературе представлены различные методики получения PRP. Первый вариант — это методика сбора крови и используемый антикоагулянт.В этой статье мы проанализировали влияние трех различных антикоагулянтов, полученных в коммерчески доступных пробирках, на получение PRP. Хотя существенных изменений в количестве высвобождаемых факторов роста не наблюдалось, можно выделить некоторые особенности. Сбор крови в пробирки, содержащие ЭДТА, приводил к более высокому выходу тромбоцитов в цельной крови. Однако это сопровождалось увеличением MPV после этапов центрифугирования, что является индикатором изменения морфологии тромбоцитов. С другой стороны, использование пробирок, содержащих цитратные растворы, приводило к большей индукции пролиферации МСК.В частности, получение в SC приводило к более высокому извлечению тромбоцитов после первой стадии центрифугирования. Если используется ACD, уменьшение размера пробирки может увеличить восстановление тромбоцитов. Кроме того, PRP, полученные в SC, показали наименьшую вариацию экспрессии генов MSC по сравнению с клетками, культивируемыми в присутствии 10% FBS. Таким образом, чтобы получить большее количество тромбоцитов и вызвать пролиферацию МСК без существенного влияния на их фенотип, мы предлагаем использовать СК в качестве антикоагулянта для получения PRP.

    Конкурирующие интересы

    Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

    Благодарности

    Авторы хотели бы поблагодарить всех сотрудников Amil Life Sciences за поддержку.

    Систематический обзор исследований уровня I и II

    Аннотация

    Фон

    Клиническая практика терапии обогащенной тромбоцитами плазмой (PRP) значительно расширилась за последние годы во многих медицинских специальностях. Тем не менее, сравнение исследований PRP в разных областях медицины остается затруднительным из-за противоречивых отчетов о протоколах и характеристиках вводимой PRP.Цель этого систематического обзора состояла в том, чтобы определить количество исследований уровня I/II по каждой медицинской специальности и сравнить уровень отчетов об исследованиях в разных областях медицины.

    Методы

    Базы данных Cochrane, PubMed и EMBASE были запрошены для клинических исследований уровня I/II инъекций PRP по всем медицинским специальностям. Из этих исследований были собраны данные, включая лечение, обработку и характеристику PRP, доставку, контрольную группу и оцененные результаты.

    Результаты

    В общей сложности 132 исследования соответствовали критериям включения и исключения и включали 28 различных состояний по 8 специальностям (кардиоторакальная хирургия, косметическая хирургия, дерматология, скелетно-мышечная хирургия (MSK), неврология, челюстно-лицевая хирургия, офтальмология и пластическая хирургия). Исследования PRP при травмах MSK составили большинство исследований (74%), при этом чаще всего изучались остеоартрит коленного сустава и тендинопатия. Из 132 исследований только 44 (33%) характеризовали состав используемой PRP, и только 23 (17%) сообщали о лейкоцитарном компоненте.Исследования MSK с большей вероятностью использовали показатели результатов, сообщаемые пациентами, для оценки результатов, в то время как исследования других специальностей чаще использовали объективные результаты, основанные на данных врачей или изображений. В целом, 61% исследований показали, что PRP предпочтительнее контрольного лечения, при этом не было различий в положительных отчетах между MSK и другими медицинскими специальностями.

    Выводы

    Большинство клинических исследований уровня I/II, изучающих терапию PRP по всем медицинским специальностям, были проведены для травм MSK с остеоартритом коленного сустава и тендинопатией, которые являются наиболее часто изучаемыми состояниями.Во всех медицинских исследованиях существуют противоречивые отчеты о составе PRP. Тщательная отчетность по клиническим исследованиям на людях по всем медицинским специальностям имеет решающее значение для оценки эффектов PRP и перехода к индивидуальному лечению, специфичному для конкретного заболевания.

    Образец цитирования: Назарофф Дж., Оядомари С., Браун Н., Ван Д. (2021) Отчеты о клинических исследованиях терапии обогащенной тромбоцитами плазмой среди всех медицинских специальностей: систематический обзор исследований уровня I и II. ПЛОС ОДИН 16(4): е0250007.https://doi.org/10.1371/journal.pone.0250007

    Редактор: Ahmed Negida, Zagazig University, EGYPT

    Получено: 14 сентября 2020 г.; Принято: 29 марта 2021 г .; Опубликовано: 23 апреля 2021 г.

    Copyright: © 2021 Nazaroff et al. Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

    Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в документе и в его файлах вспомогательной информации.

    Финансирование: Автор(ы) не получали специального финансирования для этой работы.

    Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

    Введение

    Использование богатой тромбоцитами плазмы (PRP) для лечения множества заболеваний значительно возросло за последнее десятилетие. В качестве стратегии доставки более высокой концентрации факторов роста и цитокинов, которые инициируют и регулируют заживление тканей, PRP-терапия использовалась при широком спектре ортопедических травм, включая тендинопатии, остеоартрит и мышечные травмы [1-3].В последнее время PRP также все чаще используется для лечения косметических заболеваний, включая восстановление волос, увеличение груди, лечение рубцов и дерматологические заболевания [4–6]. Другие сообщения о применении PRP-терапии включают регенерацию нервов, пародонтальную терапию, заживление ран и усиление хирургического лечения [7–9].

    Несмотря на широкую клиническую практику PRP во всех областях медицины, в медицинском сообществе сохраняется неопределенность и скептицизм относительно ее эффективности.Большая часть этого скептицизма может быть связана с неосведомленностью о количестве и качестве доказательств, исследующих лечение PRP, особенно по медицинским специальностям. Практика доказательной медицины использует доказательства высочайшего качества для принятия обоснованных решений в отношении ухода за отдельными пациентами. Несмотря на то, что было проведено множество рандомизированных контролируемых исследований, изучающих PRP при заболеваниях опорно-двигательного аппарата (MSK) [1,3,10,11], количество высококачественных исследований лечения PRP в других медицинских специальностях по сравнению с ортопедией, спортивной медициной и другими MSK полей неизвестно.Кроме того, в этих исследованиях остаются недостатки в уровне отчетности, особенно в отношении обработки и состава PRP. Это привело к призыву в ортопедии к минимальным стандартам отчетности, чтобы обеспечить воспроизводимость и сравнение между исследованиями [12–15]. Неизвестно, является ли уровень отчетности таким же непоследовательным в исследованиях из других областей медицины. Подробные отчеты о клинических испытаниях PRP во всех областях медицины были бы полезны для определения ключевых компонентов PRP и эффективного преобразования PRP-терапии в клинически значимое лечение.

    Цель этого систематического обзора состояла в том, чтобы проанализировать текущую литературу по PRP по всем медицинским специальностям и определить 1) количество исследований уровня I и II по каждой медицинской специальности в зависимости от показаний и 2) уровень отчетности в этих исследованиях в отношении к обработке PRP, составу, активации, доставке и оценке результатов. Поскольку большинство этих исследований основано на ортопедической литературе, было проведено сравнение уровня отчетности между исследованиями MSK и исследованиями из других областей медицины.

    Материалы и методы

    Процесс идентификации и выбора товара

    В июне 2019 года был проведен поиск литературы для выявления статей, относящихся к PRP-терапии, в соответствии с рекомендациями по предпочтительным элементам отчетности для систематического обзора и метаанализа (PRISMA) (рис. 1) [16]. Базы данных PubMed (включая MEDLINE), Cochrane и EMBASE были запрошены с использованием следующих поисковых терминов: «богатая тромбоцитами плазма», «богатая тромбоцитами плазма» и «PRP». Критерии включения состояли из исследований, изучающих лечение PRP в клинических испытаниях на людях, сравнительных исследований уровня I и уровня II, определенных уровнями доказательности JBJS Journal [17] по всем медицинским специальностям, и статей на английском языке.Были исключены исследования уровня III-V, исследования на животных, несравнительные исследования, рефераты совещаний, главы книг, а также систематические обзоры и метаанализы. После удаления дубликатов аннотации статей были сначала просмотрены для выявления исследований, которые соответствовали критериям включения и исключения. Затем полные тексты этих статей были дополнительно проанализированы, чтобы определить, какие исследования подходят для этого обзора. Списки литературы ключевых статей были проанализированы для исследований, которые будут включены в этот обзор.Поиск литературы проводился двумя рецензентами, а отобранные статьи рецензировались старшим автором.

    Сбор данных и статистический анализ

    Полный список проанализированных исследований можно найти в приложении S1. Из подходящих исследований были собраны следующие данные: уровень доказательности согласно JBJS Journal’s Levels of Evidence [17], название журнала, лечение, частота и дозировка PRP, время оценки результатов, состав PRP (или коммерческого используемая система), состояние активации PRP и активирующего агента, контрольная и другие группы сравнения, измеренные объективные и субъективные результаты и общий вывод об эффективности или благоприятности лечения. Извлеченные данные были независимо оценены авторами. Исследования были сгруппированы в одну из следующих категорий в зависимости от состояния, которое лечили: кардиоторакальная хирургия, косметическая хирургия, дерматология, скелетно-мышечная хирургия (MSK), неврология, челюстно-лицевая хирургия, офтальмология и пластическая хирургия. Данные о характеристиках PRP сосредоточены на составе тромбоцитов и лейкоцитов. Общий вывод об эффективности или благоприятности PRP определялся заключением авторов, обычно основанным на статистически значимых улучшениях, наблюдаемых в результатах лечения группы PRP по сравнению с контрольными группами.Включенные исследования были проанализированы с использованием Кокрановского инструмента оценки риска систематической ошибки и Методологического индекса нерандомизированных исследований для оценки систематической ошибки [18,19]. Старший автор просмотрел баллы оценки предвзятости. Из-за подавляющего числа исследований MSK по сравнению с исследованиями всех других специальностей пропорциональные данные между исследованиями MSK и всех других специальностей сравнивались с использованием точного критерия Фишера.

    Результаты

    Количество исследований

    После удаления дубликатов проверена 391 запись.Сто шестьдесят семь исследований были удалены после проверки заголовков, а 92 исследования были удалены после полнотекстового изучения. Среди исключенных исследований были исследования с уровнем доказательности III или выше (n = 77), отсутствие экспериментальной группы PRP (n = 12) и последующие отчеты об уже включенном исследовании (n = 3). В общей сложности 132 исследования соответствовали критериям включения и исключения и были проанализированы для этого исследования (рис. 1). Из этих исследований 94 (71%) были исследованиями уровня I, а 38 (29%) — исследованиями уровня II (приложение S1).

    Среди проанализированных исследований было 28 различных состояний в восьми областях медицины (таблица 1). Исследования, изучающие лечение PRP при состояниях MSK, составили 74% всех исследований. Тендинопатия (n = 29) и остеоартрит (n = 28) были двумя наиболее часто изучаемыми состояниями. Исследования MSK имели 76% доказательств уровня 1, в то время как 57% всех других исследований были доказательствами уровня 1 (p<0,05). Косметические исследования составили 14 % (n = 19) всех исследований, и 53 % из них были доказательностью I уровня.

    Отчет о составе и введении PRP

    Среди всех исследований 44 исследования (33%) предоставили подробную информацию об обработке PRP или характеристиках изучаемой PRP.В рамках одной специальности в 37 % исследований MSK сообщалось о подробностях состава, а в 23 % исследований других специальностей сообщалось о подробностях состава (p = 0,15). Только в 23 из 44 исследований также сообщались подробности о концентрации лейкоцитов (таблица 2). Ни одно из исследований в области кардиоторакальной хирургии, офтальмологии, челюстно-лицевой хирургии и пластической хирургии не предоставило данных о количестве тромбоцитов или лейкоцитов. В общей сложности 57 исследований (43%) показали, что PRP активируется перед введением. Кальций использовался в качестве активатора в 80% этих исследований (таблица 3). Среди исследований MSK 36% использовали активатор, тогда как 63% исследований других специальностей использовали активатор (p<0,01). Что касается введения PRP, в 84% исследований сообщалось о количестве, объеме и интервалах дозирования инъекций PRP. Количество вводимых процедур PRP варьировалось от 1 до 9, а общий объем PRP, вводимого за один раз, варьировался от 0,1 до 22 мл. Окно лечения варьировалось от однократной инъекции до серийных доз в течение одного года.

    Отчет о результатах

    Большинство субъективных результатов, о которых сообщалось, состояло из показателей результатов, сообщаемых пациентами (PROM), включая оценку боли по визуальной аналоговой шкале (ВАШ) и функциональные показатели суставов и заболеваний.В зависимости от изучаемого состояния использовались различные подтвержденные и неподтвержденные оценки. Подавляющее большинство (93%) исследований MSK использовали по крайней мере один PROM в своем исследовании (таблица 4). Из них 66% сообщили о результатах PROM в пользу PRP по сравнению с другими группами лечения. Напротив, только 49% исследований по всем другим специальностям использовали PROM для оценки результатов (p<0,01).

    Оцениваемые объективные исходы включали визуализирующие исследования, количественную оценку на основе осмотра и время до возвращения к игре.Среди исследований MSK 57% сообщили по крайней мере об одном объективном показателе результата, и 48% этих исследований продемонстрировали преимущества PRP по объективному показателю результата по сравнению с другими видами лечения (таблица 4). Среди исследований всех других специальностей 66% использовали объективную оценку исхода (p = 0,43).

    Общее преимущество PRP по сравнению с контрольным лечением

    В целом, 61% исследований показали преимущество PRP по сравнению с контрольным лечением (таблица 5). В 33 исследованиях PRP применялась в качестве дополнительного лечения и сравнивалась с основным лечением без PRP.Эти первичные методы лечения варьировались от других неоперативных методов лечения до хирургического вмешательства. Среди исследований, использующих PRP в качестве дополнительной терапии, 66% считают, что PRP эффективнее по сравнению с контрольной группой. Среди этих исследований, сравнивающих PRP с физиологическим раствором, 50% обнаружили, что PRP благоприятнее, чем физиологический раствор. Что касается специальности, 58% исследований MSK обнаружили, что PRP предпочтительнее контроля, в то время как 67% исследований всех других специальностей показали, что PRP предпочтительнее контроля (p = 0,42). Среди немногих исследований в области дерматологии, неврологии, офтальмологии и пластической хирургии 100% исследований показали, что PRP предпочтительнее контроля.

    Риск смещения

    Большинство исследований оценивались с использованием инструмента Cochranes Risk of Bias, 80% (n = 106). Среди этих исследований 30 % (n = 32) были оценены как имеющие «низкий» риск систематической ошибки, 25 % (n = 26) — как имеющие «некоторые опасения», а 45 % (n = 48) — как «Высокий» риск систематической ошибки (приложение S2). Остальные 20% (n = 26) были оценены с использованием MINORS со средним баллом 17,4, SD = 2,96 (приложение S3).

    Обсуждение

    Настоящий систематический обзор показал, что подавляющее большинство опубликованных клинических исследований уровня I и II, изучающих терапию PRP во всех медицинских специальностях, были проведены для состояний MSK.Среди всех проанализированных исследований только 33% сообщили подробности о составе используемой PRP, и только 17% сообщили об используемом лейкоцитарном компоненте PRP. Исследования MSK с большей вероятностью использовали PROM в качестве основного показателя результата, в то время как исследования по другим специальностям чаще использовали объективные результаты. В целом, 61% исследований показали, что PRP предпочтительнее контрольного лечения, при этом не было различий в положительных отчетах между MSK и другими медицинскими специальностями.

    В последние годы произошел взрыв в клинической практике лечения PRP, несмотря на мало доказательств в поддержку его использования по большинству показаний. Тромбоциты, содержащие различные факторы роста и цитокины, которые инициируют и регулируют заживление, играют роль в нормальных механизмах восстановления тканей. Таким образом, считается, что PRP с концентрацией тромбоцитов выше исходного уровня аутологичной крови доставляет больше белков, цитокинов и других биологически активных факторов для усиления или ускорения процесса заживления. Однако остается неопределенность в отношении критической концентрации тромбоцитов, которая коррелирует со значительным ускорением заживления, которая может варьироваться в зависимости от способа доставки, пораженных тканей и подлежащей лечению патологии.Более того, положительный клинический ответ на PRP может быть связан с противовоспалительным эффектом, а не с преимущественно анаболическим эффектом, который изначально предназначался для PRP-терапии [1,20,21]. Улучшение понимания лежащих в основе структурных и композиционных недостатков поврежденной ткани, наряду с характеристикой специфических компонентов PRP, которые полезны для патофизиологии лечения, поможет определить, как и может ли PRP модифицировать симптомы и/или структурировать. модификации [1].

    В качестве продукта ткани и аутологичной крови с минимальными манипуляциями, PRP удалось избежать нормативных препятствий обширных доклинических и клинических испытаний, и в результате его клиническая практика всегда может опережать подтверждающие научные данные. Таким образом, тщательные контролируемые клинические исследования PRP-терапии на людях имеют решающее значение в процессе оценки не только для оценки ее эффективности, но и для помощи в определении критических компонентов PRP, которые отвечают за клиническое улучшение.В ортопедии неоднократно звучали призывы к минимальным стандартам отчетности в клинических исследованиях, касающихся подготовки и состава PRP, чтобы можно было сравнивать исследования и воспроизводимость [12–15]. Однако среди других медицинских специальностей аналогичные призывы к минимальным стандартам отчетности отсутствуют. Даже при ортопедическом призыве к минимальным стандартам отчетности это исследование показало, что только треть исследований среди всех специальностей, включая специальности MSK, предоставили подробную информацию о обработке и характеристиках PRP, и только в половине этих исследований выполнялся анализ лейкоцитов. Клинические последствия и клеточные эффекты PRP с высоким содержанием лейкоцитов по сравнению с PRP с низким содержанием лейкоцитов продолжают обсуждаться. Хотя некоторые считают, что PRP, богатая лейкоцитами (нейтрофилами), связана с провоспалительными эффектами из-за повышенного уровня катаболических цитокинов, которые противодействуют анаболическим факторам, содержащимся в тромбоцитах [22,23], другие сообщают об обратном [21]. Различия в концентрациях биоактивных молекул, в том числе антагониста рецептора интерлейкина-1, фактора роста тромбоцитов и матриксных металлопротеиназ, в PRP, богатой лейкоцитами, по сравнению с PRP с низким содержанием лейкоцитов, делают лейкоцитарную отчетность одним из ключевых элементов в клинической оценке PRP [21]. ].Кроме того, поскольку большинство имеющихся в продаже систем PRP не позволяют пользователю титровать лейкоцитарный компонент, а концентрация лейкоцитов, по-видимому, важна в зависимости от заболевания, которое лечат [1,24], отсутствие сообщений о лейкоцитах в текущих исследованиях PRP только добавляет к этому спору и затрудняет определение оптимальной рецептуры PRP для использования. Мы предлагаем, чтобы будущие исследования PRP включали следующие детали характеристики PRP; концентрация тромбоцитов, состояние активации/используемый активатор, концентрация лейкоцитов, объем терапевтической дозы и количество введенных доз.Широкая вариативность в отчетах о обработке, составе, активации и доставке PRP в клинических исследованиях самого высокого уровня доказательности способствует неопределенности и скептицизму PRP-терапии в медицинском сообществе, а также систематической стандартизации систем отчетности и классификации, а не только в ортопедии, но и среди всех медицинских специальностей, является необходимым шагом на пути превращения PRP-терапии в клинически значимое лечение.

    Помимо несоответствия в количестве опубликованных исследований по специальностям, это исследование показало, что исследования MSK (93%) с большей вероятностью измеряли результаты с использованием PROM по сравнению с исследованиями по другим специальностям (49%).Хотя некоторые заболевания могут не поддаваться субъективному измерению результатов, в большинстве сценариев PRP часто назначается в качестве самоокупаемого варианта лечения для косметического эффекта и качества жизни. Таким образом, PROM для оценки удовлетворенности и других показателей качества медицинской помощи с точки зрения пациента должны быть необходимым, если не основным, результатом всех исследований PRP. Хотя PROM существуют в дерматологии и эстетической хирургии [25–27], они могут не так широко использоваться и валидироваться по сравнению с бесчисленным множеством PROM MSK [28].В исследованиях без MSK объективные показатели чаще были оцениваемыми первичными показателями результатов (например, поддержание объема груди при визуализации и клинической оценке после реконструкции груди с добавлением PRP, количественная оценка роста и густоты волос после инъекции PRP при алопеции). Однако эти метрики не отражают восприятие пациентом своего состояния здоровья, которое клиницисты должны рассматривать в качестве исхода золотого стандарта для оценки.

    Этот обзор имеет несколько ограничений.Данные о сообщениях о других предлагаемых критериях оценки лечения PRP, таких как запасы цельной крови, характеристики цельной крови и использование пациентом противовоспалительных или антитромбоцитарных препаратов, в этом исследовании специально не запрашивались. Учитывая широкую изменчивость или отсутствие отчетов о обработке и составе PRP, предполагается, что отчеты о деталях цельной крови будут столь же скудными во всех исследованиях. Наконец, этот обзор литературы может быть подвержен систематической ошибке публикации, поскольку было обнаружено, что 45% исследований, оцененных с использованием Кокрановской классификации, имеют «высокий» риск систематической ошибки.Это дополняет призыв к стандартизации не только состава PRP, но и дизайна и отчетности исследований PRP.

    Таким образом, подавляющее большинство клинических исследований уровня I и II, изучающих PRP, были проведены для травм MSK, и лишь несколько исследований были проведены для состояний в других медицинских специальностях. Исследования, в которых сообщалось о деталях обработки и состава PRP, были в меньшинстве, а PROM не часто использовались в качестве критерия результата в исследованиях, не связанных с MSK.Поскольку клиническая практика PRP всегда может опережать подтверждающие научные данные, точные отчеты о клинических исследованиях на людях по всем медицинским специальностям имеют решающее значение для оценки эффектов PRP и перехода к индивидуальному лечению для конкретного заболевания.

    Благодарности

    Исследование проведено в Калифорнийском университете в Ирвине, Ирвин, Калифорния.

    Каталожные номера

    1. 1. Ван Д, Родео С.А. Обогащенная тромбоцитами плазма в ортопедической хирургии: обзор критического анализа.JBJS Ред. 2017;5(9):e7. пмид:28953136
    2. 2. Мишра А., Вудалл Дж., Виейра А. Лечение сухожилий и мышц с использованием богатой тромбоцитами плазмы. Клин Спорт Мед. 2009;28(1):113–25. пмид:1

      69

    3. 3. Фитцпатрик Дж., Булсара М.К., О’Доннелл Дж., МакКрори П.Р., Чжэн М.Х. Эффективность инъекций богатой тромбоцитами плазмы при ягодичной тендинопатии: рандомизированное двойное слепое контролируемое исследование, сравнивающее одну инъекцию богатой тромбоцитами плазмы с одной инъекцией кортикостероидов.Am J Sports Med. 2018;46(4):933–9. пмид:29293361
    4. 4. Хаузауэр А.К., Хамфри С. Руководство для врачей по обогащенной тромбоцитами плазме в дерматологической хирургии, часть II: клинические данные. Дерматол Хирург. 2020;46(4):447–56. пмид:31770154
    5. 5. Гупта А.К., Верстег С.Г., Рапапорт Дж., Хаузауэр А.К., Шир Н.Х., Пиге В. Эффективность богатой тромбоцитами плазмы в области восстановления волос и эстетики лица — систематический обзор и метаанализ. J Cutan Med Surg. 2019;23(2):185–203.пмид:30606055
    6. 6. Самади П., Шейххасан М., Хошинани Х.М. Использование богатой тромбоцитами плазмы в эстетической и регенеративной медицине: всесторонний обзор. Эстетик Пласт Хирург. 2019;43(3):803–14. пмид:30552470
    7. 7. Albanese A, Licata ME, Polizzi B, Campisi G. Обогащенная тромбоцитами плазма (PRP) в стоматологической и челюстно-лицевой хирургии: от заживления ран до регенерации кости. Иммунное старение. 2013;10(1):23. пмид:23763951
    8. 8. Чжан Цзи, Ван И, Сунь Дж.Влияние богатой тромбоцитами плазмы на артроскопическое двухрядное восстановление вращательной манжеты плеча: клиническое исследование с последующим 12-месячным наблюдением. Acta Orthop Traumatol Turc. 2016;50(2):191–7. пмид:26969955
    9. 9. Анджаяни С., Вирохадиджоджо Ю.В., Адам А.М., Суванди Д., Севенг А., Амируддин М.Д. Сенсорное улучшение периферической невропатии, вызванной проказой, у пациентов, получавших периневральную инъекцию богатой тромбоцитами плазмы. Int J Дерматол. 2014;53(1):109–13. пмид:24168291
    10. 10. Белк Дж. В., Крайтлер М. Дж., Хоук Д. А., Гудрич Дж. А., Драгу Дж. Л., Маккарти EC.Обогащенная тромбоцитами плазма по сравнению с гиалуроновой кислотой при остеоартрозе коленного сустава: систематический обзор и метаанализ рандомизированных контролируемых исследований. Am J Sports Med. 2020:363546520

      7. пмид:32302218

    11. 11. Джохал Х., Хан М., Юнг С.П., Диллон М.С., Фу Ф.Х., Беди А. и др. Влияние использования богатой тромбоцитами плазмы на боль в ортопедической хирургии: систематический обзор и метаанализ. Спортивное здоровье. 2019;11(4):355–66. пмид:31136726
    12. 12. Chahla J, Cinque ME, Piuzzi NS, Mannava S, Geeslin AG, Murray IR, et al. Призыв к стандартизации протоколов подготовки богатой тромбоцитами плазмы и отчетности о составе: систематический обзор клинической ортопедической литературы. J Bone Joint Surg Am. 2017;99(20):1769–79. пмид:2

      32
    13. 13. Мюррей И.Р., Гизлин А.Г., Гуди Э.Б., Петрильяно Ф.А., ЛаПрад РФ. Минимальная информация для исследований по оценке биологических препаратов в ортопедии (MIBO): богатая тромбоцитами плазма и мезенхимальные стволовые клетки. J Bone Joint Surg Am. 2017;99(10):809–19. пмид:28509821
    14. 14.Родео С. Необходимость минимальных стандартов отчетности для исследований «биологических препаратов» в спортивной медицине. Am J Sports Med. 2019;47(11):2531–2. пмид:31479326
    15. 15. Chu CR, Rodeo S, Bhutani N, Goodrich LR, Huard J, Irrgang J, et al. Оптимизация клинического использования биопрепаратов в ортопедической хирургии: согласованные рекомендации конференции AAOS/NIH U-13 2018 года. J Am Acad Orthop Surg. 2019;27(2):e50–e63. пмид:30300216
    16. 16. Мохер Д., Либерати А., Тецлафф Дж., Альтман Д.Г.Предпочтительные элементы отчетности для систематических обзоров и метаанализов: Заявление PRISMA. ПЛОС Мед. 2009;6(7).
    17. 17. Маркс Р.Г., Уилсон С.М., Свёнтковски М.Ф. Обновление присвоения уровней доказательности. J Bone Joint Surg Am. 2015;97(1):1–2. пмид:25568387
    18. 18. Higgins JP, Altman DG, Gøtzsche PC, et al. Инструмент Кокрановского сотрудничества для оценки риска систематической ошибки в рандомизированных исследованиях. БМЖ . 2011;343:d5928. Опубликовано 18 октября 2011 г. pmid:22008217
    19. 19.Slim K, Nini E, Forestier D, Kwiatkowski F, Panis Y, Chipponi J. Методологический указатель для нерандомизированных исследований (второстепенные): разработка и проверка нового инструмента. ANZ J Surg . 2003;73(9):712–716. пмид:12956787
    20. 20. Абдул Амир Л.А., Рахим З.Дж., Абдулразак С.С., Али Б.Г., Насер М.М., Хайри АВА. Противовоспалительное действие обогащенной тромбоцитами плазмы в пародонтальном кармане. Евр Джей Дент. 2018;12(4):528–31. пмид:30369798
    21. 21. Ziegler CG, Van Sloun R, Gonzalez S, Whitney KE, DePhillipo NN, Kennedy MI, et al.Характеристика факторов роста, цитокинов и хемокинов в концентрате костного мозга и богатой тромбоцитами плазме: проспективный анализ. Am J Sports Med. 2019;47(9):2174–87. пмид:31034242
    22. 22. Сандман Э.А., Коул Б.Дж., Фортьер Л.А. На концентрацию фактора роста и катаболических цитокинов влияет клеточный состав богатой тромбоцитами плазмы. Am J Sports Med. 2011;39(10):2135–40. пмид:21846925
    23. 23. Драгу Дж. Л., Браун Х. Дж., Дарем Дж. Л., Ридли Б. А., Одегаард Дж. И., Луонг Р. и др.Сравнение острого воспалительного ответа двух коммерческих систем с богатой тромбоцитами плазмой в сухожилиях здорового кролика. Am J Sports Med. 2012;40(6):1274–81. пмид:22495144
    24. 24. Le ADK, Enweze L, DeBaun MR, Dragoo JL. Текущие клинические рекомендации по использованию богатой тромбоцитами плазмы. Curr Rev Musculoskelet Med. 2018;11(4):624–34. пмид:30353479
    25. 25. Мори С., Ли Э.Х. Вне точки зрения врача: обзор результатов, о которых сообщают пациенты, в дерматологической хирургии и косметической дерматологии.Int J Womens Dermatol. 2019;5(1):21–6. пмид:30809575
    26. 26. Данилла С., Куэвас П., Аэдо С., Домингес С., Хара Р., Кальдерон М.Е. и др. Представляем Body-QoL (R): новый инструмент оценки результатов, о котором сообщают пациенты, для измерения качества жизни, связанного с удовлетворенностью телом, у пациентов с эстетической и постбариатрической контурной пластикой тела. Эстетик Пласт Хирург. 2016;40(1):19–29. пмид:26578194
    27. 27. Вайдья Т.С., Мори С., Хошаб Н., Душа С.В., Бандер Т., Матрос Э. и др. Эстетическая удовлетворенность пациентов после операции по поводу рака кожи лица с использованием модуля FACE-Q для лечения рака кожи.Plast Reconstr Surg Glob Open. 2019;7(9):e2423. пмид:31942391
    28. 28. Пусик А.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.