Кочнева пластический хирург: отзывы пациентов, запись на приём, где принимает – Санкт-Петербург – НаПоправку

Содержание

отзывы пациентов, запись на приём, где принимает – Санкт-Петербург – НаПоправку

Кочнева Илона Сергеевна: пластический хирург, челюстно-лицевой хирург. Стаж работы – 17 лет.

Илона Сергеевна Кочнева — Пластический, челюстно-лицевой хирург, Главный врач клиники эстетической хирургии «Абриелль» в Санкт-Петербурге. Общий хирургический стаж более 12 лет. Ассистент кафедры пластической хирургии ФГБОУ ВО СПбГПМУ Минздрава России.

Постоянный участник и докладчик конгрессов и симпозиумов в России и за рубежом. Обладатель международных и российских сертификатов по пластической, эстетической и реконструктивной хирургии. Регулярно участвует в роли докладчика на конгрессах и симпозиумах. Является автором более 10 научных статей. Владеет всеми видами пластических и эстетических операций на лице и теле.

Илона Сергеевна, обладает колоссальным опытом выполнения хейлопластики (виды хирургического вмешательства направленные на коррекцию губ: булхорн, VY — пластика, корнер-лифт, резекция DAO, операция Кессельринга. и др.). Более тысячи успешных операций и тысячи девушек по всей стране и миру являются обладательницами «фирменных» губ от Илоны Сергеевны.

Одно из самых востребованных направлений в пластике в исполнении Илоны Серегевны — омоложение лица. Доминантой доктора Кочневой, является деликатное преображение, эффективное решение возрастных изменений и отсутствие видимых послеоперационных швов. Илона Сергеевна владеет всеми видами пластических операций на лице: эндоскопические методики, блефаропластика, отопластика, SMAS-пластика, платизмопластика. Отдельного внимания заслуживает такое направление, как бьютификация (основная цель не омолодить, а сделать лицо более ухоженным, аристократичным). Илона Сергеевна точно знает, как привести все черты лица в гармонию, сохранив при этом индивидуальность каждой пациентки.

Ринопластика — операция, которая требует максимально индивидуального подхода. Нос — одна из самых акцентных черт лица, здесь важен каждый нюанс. Скрупулезность Илоны Сергеевны, позволяет успешно исправлять даже самые сложные случаи. На счету доктора есть работы и по частичной реконструкции этой зоны.

Илона Сергеевна, специалист не только в работе с лицом, но и телом. Все виды маммопластики (увеличение эндопротезированием, подтяжка, уменьшение молочных желез). По мнению доктора, нет нерешаемых задач, всегда есть несколько способов решить проблему и получить в результате максимально идеальный результат.

Доктор Кочнева активно применяет в работе свои навыки в области липофилинга. Многолетний опыт и постоянное повышение квалификации, позволяют эффективно и главное безопасно, буквально вытачивать новый силуэт, отсекая лишнее и добавляя объемы там, где это необходимо. Будучи универсальным специалистом, Илона Сергеевна точно знает, как сделать вас еще красивее!

Кочнева Илона Сергеевна — 8 отзывов | Санкт-Петербург

  • 2005

    Восьмой интенсивный курс по пластической и реконструктивной хирургии, проводимой под эгидой ОПРЭХ

  • 2006

    Основы пластической, эстетической и реконструктивной хирургии

  • 2006

    Основы операций на голове и шее

  • 2007

    Мастер-класс проф. L.Ribeiro (Бразилия) и проф. Блохина С.Н. (Россия)

  • 2007

    Международная конференция «Новое в пластической хирургии и комбустиологии»

  • 2009

    I образовательные курсы российской национальной секции ISAPS

  • 2009

    Международный симпозиум по пластической хирургии MentorParagonForum с участием проф. A.M.Feller (Германия) и д.м. Dirk Richter (Германия) по темам маммопластика, комплексное лечение ожирения, абдом

  • 2010

    II образовательные курсы российской национальной секции ISAPS

  • 2010

    Докладчик ХV международного конгресса челюстно-лицевых хирургов и стоматологов

  • 2010

    VI-й международный курс по пластической хирургии «Методики омоложения лица и тела»

  • 2010

    I международная школа пластической хирургии и косметологии

  • 2011

    III образовательные курсы российской национальной секции ISAPS

  • 2011

    Первый международный обучающий курс ISAPS по пластической хирургии

  • 2011

    ΙΙ международная школа пластической хирургии и косметологии

  • 2012

    Седьмой международный курс по пластической хирургии по теме «Омолаживающие операции лица, контурная пластика тела»

  • 2012

    Докладчик V образовательного курса Российской национальной секции ISAPS по теме «Пересадка аутожира. Современные достижения и нерешенные проблемы»

  • 2013

    Докладчик ХVIII Международного конгресса челюстно-лицевых хирургов и стоматологов

  • 2013

    Докладчик седьмого профессионального форума «Искусство пластической хирургии»

  • 2013

    11-го Мировой конгресс по антивозрастной медицине

  • 2014

    V Международный симпозиум ISAPS по пластической хирургии и косметологии «Новые горизонты в эстетической медицине»

  • 2014

    Обучающий Курс в формате Live Surgery & Injection «Продвинутая эстетическая ринопластика, отопластика и контурная платсика лица

  • 2014

    Докладчик VIII Профессиональный форум «Искусство пластической хирургии»

  • 2014

    VIII Международный курс С.В. Нудельмана по пластической хирургии

  • 2015

    Докладчик V Международного обучающего курса по пластической хирургии

  • 2016

    V Национальный конгресс «Пластическая хирургия, эстетическая медицина и косметология»

  • 2016

    Курс Bryan Mendelson «Инновационные методы омоложения лица»

  • 2017

    Докладчик научно-практичной конференции «Первая научно-практическая конференция Международного общества эстетической пластической хирургии (ISAPS) в России – Эстетическая пластическая хирургия – путь

  • 2017

    Содокладчик VI Национального конгресса «Пластическая хирургия, Эстетическая медицина и косметология, г. Москва

  • 2017

    Удостоверение о повышении квалификации в учебном центре «Nice Consulting ООО «НЦСЭ» по дополнительной профессиональной программе «Организация деятельности, связанной с оборотом наркотических средств,

  • 2017

    The fifth live surgery course in St. Petersburg, Russia «Advanced aesthetic blepharorlasty, midface and face counturing»

  • 2018

    Участница V Международной школы маммопластики, г. Казань

  • 2018

    Сертификат и удостоверение о повышении квалификации некоммерческой организации высшего образовани «Европейский университет »Бизнес Треугольник«, направление »Организация здравоохранения и общественное

  • 2018

    Участница интенсивного курса «современная эстетическая хирургия молочной железы и контуров тела», г. Санкт-Петербург

  • 2019

    Успешно прошла практический курс анатомической хирургии груди. Центр анатомии и клеточной биологии Венского медицинского университета.

  • 2019

    Ilona Kochneva has successfully participated in the Hands-on Anatomical Surgical Training Course 16 hours «Facelift and Oculoplastic Surgery», Center for Anatomy and Cell Biology Medical University of

  • 2019

    Выступала в качестве докладчика на III Научно-Практической Конференции «Сложная пластическая хирургия лица и тела. Ревизионная эстетическая хирургия и дерматокосметология»., Санкт-Петербург

  • 2019

    Участник 2-го образовательного модуля ISAPS по эстетической и реконструктивной хирургии груди в г. Москва

  • 2019

    Выступала в качестве докладчика на Инновационной школе эстетической медицины в г. Москва Сколково

  • 2019

    Докладчик на «II Балтийском Конгрессе по пластической хирургии и косметологии», г.Светлогорск

  • 2020

    Спикер III Балтийского конгресса по пластической хирургии и косметологии в г. Светлогорске

  • 2020

    Спикер Черноморского конгресса по пластической хирургии и косметологии, Геленджик

  • 2020

    Спикер «Инновационной школы эстетической медицины», г. Москва

  • 2020

    Спикер II Черноморского конгресса по косметологии и пластической хирургии в г. Геленджик

  • Врач Кочнева Илона Сергеевна — 6 отзывов, пластический хирург, челюстно-лицевой хирург | Санкт-Петербург

    Илона Сергеевна Кочнева — Пластический, челюстно-лицевой хирург, Главный врач клиники эстетической хирургии «Абриелль» в Санкт-Петербурге. Общий хирургический стаж более 17 лет. Ассистент кафедры пластической хирургии ФГБОУ ВО СПбГПМУ Минздрава России.

    Постоянный участник и докладчик конгрессов и симпозиумов в России и за рубежом. Обладатель международных и российских сертификатов по пластической, эстетической и реконструктивной хирургии. Регулярно участвует в роли докладчика на конгрессах и симпозиумах. Является автором более 10 научных статей. Владеет всеми видами пластических и эстетических операций на лице и теле.

    Илона Сергеевна, обладает колоссальным опытом выполнения хейлопластики (виды хирургического вмешательства направленные на коррекцию губ: булхорн, VY — пластика, корнер-лифт, резекция DAO, операция Кессельринга. и др.). Более тысячи успешных операций и тысячи девушек по всей стране и миру являются обладательницами «фирменных» губ от Илоны Сергеевны.

    Одно из самых востребованных направлений в пластике в исполнении Илоны Серегевны — омоложение лица. Доминантой доктора Кочневой, является деликатное преображение, эффективное решение возрастных изменений и отсутствие видимых послеоперационных швов. Илона Сергеевна владеет всеми видами пластических операций на лице: эндоскопические методики, блефаропластика, отопластика, SMAS-пластика, платизмопластика. Отдельного внимания заслуживает такое направление, как бьютификация (основная цель не омолодить, а сделать лицо более ухоженным, аристократичным). Илона Сергеевна точно знает, как привести все черты лица в гармонию, сохранив при этом индивидуальность каждой пациентки.

    Ринопластика — операция, которая требует максимально индивидуального подхода. Нос — одна из самых акцентных черт лица, здесь важен каждый нюанс. Скрупулезность Илоны Сергеевны, позволяет успешно исправлять даже самые сложные случаи. На счету доктора есть работы и по частичной реконструкции этой зоны.

    Илона Сергеевна, специалист не только в работе с лицом, но и телом. Все виды маммопластики (увеличение эндопротезированием, подтяжка, уменьшение молочных желез). По мнению доктора, нет нерешаемых задач, всегда есть несколько способов решить проблему и получить в результате максимально идеальный результат.

    Доктор Кочнева активно применяет в работе свои навыки в области липофилинга. Многолетний опыт и постоянное повышение квалификации, позволяют эффективно и главное безопасно, буквально вытачивать новый силуэт, отсекая лишнее и добавляя объемы там, где это необходимо. Будучи универсальным специалистом, Илона Сергеевна точно знает, как сделать вас еще красивее!

    19 отзывов — отзывы посетителей о клинике эстетической хирургии Абриелль Средний проспект В.О., д. 85

    Что ВсёКонцертыФильмы в прокатеСпектакли в театрах8 мартаАвтособытияАкцииАлые парусаБалБалет, операБлаготворительностьВечеринки и дискотекиВыставкиВыступления DJДень влюбленныхДень городаДень ПобедыДень снятия блокадыКинопоказыКонференцииКрасота и модаЛекции, семинары и тренингиЛитератураМасленицаМероприятия в ресторанахМероприятия ВОВНочь музеевОбластные событияОбщественные акцииОнлайн трансляцииПасхаПраздники и мероприятияПрезентации и открытияПремииРазвлекательные событияРазвлечения для детейРеконструкцииРелигияРождество и Новый годРождество и Новый Год в ресторанахСобытия на улицеСпектаклиСпортивные события Творческие вечераФестивалиФК ЗенитШкольные каникулыЭкологические событияЭкскурсииЯрмарки

    Где ВездеАдминистрации р-новКреативные art заведенияПарки аттракционов, детские развлекательные центрыКлубы воздухоплаванияБазы, пансионаты, центры загородного отдыхаСауны и баниБарыБассейны и школы плаванияЧитальные залы и библиотекиМеста, где играть в бильярдБоулингМагазины, бутики, шоу-румы одеждыВерёвочные городки и паркиВодопады и гейзерыКомплексы и залы для выставокГей и лесби клубыГоры, скалы и высотыОтели ГостиницыДворцыДворы-колодцы, подъездыЛагеря для отдыха и развития детейПрочие места отдыха и развлеченийЗаброшки — здания, лагеря, отели и заводыВетеринарные клиники, питомники, зоогостиницыЗалы для выступлений, аренда залов для выступленийЗалы для переговоров, аренда залов для переговоровЗалы и помещения для вечеринок, аренда залов и помещений для вечеринокЗалы и помещения для мероприятий, аренда залов и помещений для мероприятийЗалы и помещения для праздников, аренда залов и помещений для праздниковЗалы и помещения для празднования дня рождения, аренда залов и помещений для празднования дня рожденияЗалы и помещения для проведения корпоративов, аренда залов и помещений для проведения корпоративовЗалы и помещения для проведения семинаров, аренда залов и помещений для проведения семинаровЗалы и помещения для тренингов, аренда залов и помещений для тренинговЗалы со сценой, аренда залов со сценойКонтактные зоопарки и парки с животнымиТуристические инфоцентрыСтудии йогиКараоке клубы и барыКартинг центрыЛедовые катки и горкиРестораны, бары, кафеКвесты в реальности для детей и взрослыхПлощадки для игры в кёрлингКиноцентры и кинотеатрыМогилы и некрополиВодное поло.

    байдарки, яхтинг, парусные клубыКоворкинг центрыКонференц-залы и помещения для проведения конференций, аренда конференц-залов и помещений для проведения конференцийКонные прогулки на лошадяхКрепости и замкиЛофты для вечеринок, аренда лофтов для вечеринокЛофты для дней рождения, аренда лофта для дней рожденияЛофты для праздников, аренда лофта для праздниковЛофты для свадьбы, аренда лофтов для свадьбыМагазины одежды и продуктов питанияМаяки и фортыМед клиники и поликлиникиДетские места отдыхаРазводный, вантовые, исторические мостыМузеиГосударственные музеи-заповедники (ГМЗ)Креативные и прикольные домаНочные бары и клубыПляжи, реки и озераПамятники и скульптурыПарки, сады и скверы, лесопарки и лесаПейнтбол и ЛазертагКатакомбы и подземные гротыПлощадиПлощадки для мастер-классов, аренда площадкок для мастер-классовПомещения и конференц залы для событий, конференций, тренинговЗалы для концертовПристани, причалы, порты, стоянкиПриюты и фонды помощиПрокат спортивного инвентаряСтудии красоты и парикмахерскиеОткрытые видовые крыши и площадкиКомплексы, арены, стадионыМужской и женский стриптиз девушекЗалы и помещения для онлайн-мероприятий, аренда залов и помещений для онлайн-мероприятийШколы танцевГипер и супермаркетыДК и театрыЭкскурсионные теплоходы по Неве, Лагоде и Финскому ЗаливуТоргово-развлекательные центры, комплексы и торговые центры, бизнес центрыУниверситеты, институты, академии, колледжиФитнес центры, спортивные клубы и оздоровительные центрыПространства для фотосессий и фотосъемкиСоборы, храмы и церкви

    Когда Любое времясегодня Вт, 22 мартазавтра Ср, 23 мартачетверг, 24 мартапятница, 25 мартасуббота, 26 мартавоскресенье, 27 мартапонедельник, 28 мартавторник, 29 мартасреда, 30 мартачетверг, 31 марта

    VY-пластика

    Мода на пухлые губы набирает популярность, все больше звезд становятся обладательницами сексуальных, сочных и ярких губ. Взгляните на красную ковровую дорожку, и вы обнаружите голливудских див с яркими и чувственными губами. Они придают очарование улыбке, делают лицо привлекательным, ярким и молодым. Сегодня возможности пластической хирургии безграничны, любая девушка может придать губам необходимый размер и форму разными методами и технологиями.

    На сегодняшний день хейлопластика методом VY завоевывает признание среди женщин всех возрастов. В отличие от гиалуроновой кислоты, эффект от которой длится не больше шести месяцев, VY-пластика позволяет удерживать результат всю жизнь.Благодаря такой операции губы становятся пухлыми, объемными, более выразительными и при этом совершенно естественными. В ходе операции на внутренней стороне губы врач делает V-образные разрезы. Швы накладываются саморассасывающимися нитями в виде буквы Y, что позволяет немного «вывернуть» губу и придать ей объем.  Количество разрезов определяется тем, насколько пациент хочет увеличить губы, какой формы добиться. Следы от операции будут незаметны, так как все надрезы делаются на внутренней губной поверхности.

    Операция длится 40 минут, выполняется под местной анестезией или общим наркозом. Отечность сходит обычно к двум неделям после операции, окончательно заживают рубцы.

    VY- пластика позволяет выглядеть губам объемными, создать так называемые «губы бантиком», форма становиться максимально эстетичная, увеличивается высота и проекция верхней и нижней губы.

    VY-пластика в частности, а пластика губ в целом,  отлично сочетаются с липофилингом лица. Именно такой комплексный подход дает наиболее глубокий и качественный результат омоложения

    У данного вида пластики есть свои преимущества. Во- первых, это пожизненный результат. Это одна из немногих операций, эффект от которой закрепляется на всю жизнь. Во-вторых, метод VY позволяет решить проблему тонких, «нитевидных» от рождения губ. Придает недостающий объем как во фронтальной, так и в боковой проекции, качественно улучшает эстетику контура верхней и нижней губы. Благодаря такой пластике можно скрыть приобретенные дефекты, в том числе, шрамы.

    VY- пластика губ дарит пациентам сочные, объемные губы без утраты естественности и природной красоты. Благодаря достижением современной пластической хирургии операция является совершенно безопасной.

    Специалисты «Абриелль» теперь и в Москве

    Санкт-Петербургская клиника пластической хирургии «Абриелль» давно известна за пределами «Северной столицы». На прием к петербургским пластическим хирургам приезжают пациенты из разных городов России. Немало среди них жителей Москвы. Теперь у москвичей нет необходимости отправляться для этого в дальнюю дорогу. Специалисты «Абриелль» проводят операции и в столице на базе Многопрофильного Медицинского Центра «Астро» (г.Обнинск).
    Жительницы Москвы смогут попасть на прием к самым опытным специалистам «Абриелль» Саруханову Георгию Михайловичу, Левицкой Марии Григорьевне, Кочневой Илоне Сергеевне прямо у себя в городе. Сделать эксклюзивные пластические операции, которые позволят добиться более совершенных линий лица и тела.


    Специалисты клиники «Абриелль» великолепно владеют самыми передовыми методиками в области пластической хирургии, лазерной медицины, косметологии, омолаживающих процедур и многими другими техниками.
    Московских пациентов с готовностью примет врач высшей категории, кмн, пластический хирург, ведущий специалист в области липофилинга и липоскульптуры, абдоминопластики, маммопластики, фейслифтинга — Георгий Михайлович Саруханов.
    Опытный пластический хирург Левицкая Мария Григорьевна много лет совершенствуется в проведении процедур по омоложению лица и тела: липоскульптура, липофиллинг груди, липофиллинг голеней, комплексное омоложение лица, липофиллинг, эндопротезирование груди, блефаропластика и т.д. Она применяет такие передовые технологии, как использование мезенхимальных стволовых клеток и фибробластов.
    Эксклюзивные операции по липофиллингу, ринопластике, отопластике, пластике губ и созданию ямочек на щеках готова предложить Кочнева Илона Сергеевна – непревзойденный специалист в области челюстно-лицевой хирургии.
    Вместе с московскими коллегами пластические хирурги «Абриелль» добиваются превосходных результатов. Залогом этому служат их огромный опыт и мастерство.
    Координаты петербургских специалистов, работающих в клинике «Абриелль» Вы найдете на нашем сайте. Теперь к ним не нужно ехать за сотни километров, они ждут Вас в Москве.

    IJMS | Бесплатный полнотекстовый | Трансген EGFR стимулирует спонтанное образование сфероидов клеток рака молочной железы MCF7 с частичной потерей рецептора HER3

    1. Введение

    Рак молочной железы является ведущей формой рака у женщин во всем мире с 471,5 случаями на 100 000 населения в Российской Федерации [1]. Для лечения рака молочной железы доступен широкий спектр препаратов, в том числе таргетные препараты, но смертность больных раком молочной железы на поздних стадиях остается высокой. Традиционными моделями скрининга противоопухолевых средств являются двухмерные монослойные клеточные модели, в которых отсутствуют многие важные признаки опухоли в организме — градиент питательных веществ и метаболитов, градиент рН и кислорода, а также взаимодействия раковых клеток с внеклеточным матриксом. .Трехмерные многоклеточные культуры преодолевают эти недостатки [2]. 3D-культуры широко используются в исследованиях межклеточных взаимодействий, дифференцировки клеток, доставки лекарств, их эффективности и токсичности [3,4,5,6]. Более того, считается, что способность опухолевых клеток спонтанно образовывать сфероиды в кровотоке из солидных опухолей играет роль в метастазировании [7]. Для разных типов опухолевых клеток потенциал образования сфероидов различен: в большинстве случаев для стабильных 3D-моделей требуются специальные планшеты для культивирования и дополнительная матрица или факторы роста, что увеличивает стоимость и трудоемкость исследования [8].Таким образом, клеточные линии, способные эффективно и воспроизводимо формировать 3D-модели в обычных условиях культивирования, могут быть полезны для молекулярного биолога. 2D и 3D культуры. Популяция стволовых клеток в опухолях является источником рецидивов и метастазов рака молочной железы [9,10,11]. Эти клетки известны как раковые стволовые клетки (РСК) из-за их способности к самообновлению и дифференцировке в различные раковые клетки. CD44 и CD24 являются специфическими маркерами клеток РСК из опухолей молочной железы [12]. Для различных типов неоплазии было показано, что образование сфероидов может увеличивать содержание в культуре клеток РСК или клеток с характеристиками, связанными со стволовыми клетками [13]. Доля клеток РСК в культуре может влиять на чувствительность к различным противоопухолевым препаратам. Часто именно популяция клеток РСК определяет развитие лекарственной устойчивости за счет активации транспортеров ABC, таких как P-гликопротеин (P-gp) [14].Эффективное нацеливание на насосы оттока ABC важно для того, чтобы сделать CSC проницаемыми для химиотерапевтических средств [15]. Клеточная линия MCF7 является одной из наиболее востребованных систем рака молочной железы для исследования прогрессии опухоли и анализа противоопухолевой терапии. Эти клетки способны продуцировать сфероиды в стандартных условиях культивирования с низкой эффективностью и плохой воспроизводимостью. Для формирования репродуктивных сфероидов клеток MCF7 Kelm et al. описал метод висячей капли [16]. В некоторых случаях потенциал образования многоклеточных сфероидов положительно коррелирует с базальным уровнем экспрессии EGFR [17].EGFR является членом семейства рецепторных тирозинкиназ ErbB, которое также включает ErbB2/Her2, ErbB3/Her3 и ErbB4/Her4 [18]. Клетки MCF7 были описаны как относительно низкие по экспрессии EGFR среди клеточных линий рака молочной железы [19]. Ким и др. продемонстрировали, что фармакологическая блокада EGFR значительно подавляла образование сфер в клетках MCF7 wt [20]. Все эти данные указывают на важность экспрессии EGFR для образования сфероидов клеток MCF7.

    В настоящей работе получен MCF7 с гиперэкспрессией EGFR.В ходе исследования были поставлены два основных вопроса: (i) достаточно ли высокой экспрессии EGFR для трансформации адгезивных клеток MCF7 в 3D-культуру, и (ii) как трансформация в сфероиды изменяет клеточные маркеры, связанные с прогрессией опухоли и лекарственной устойчивостью в MCF7-EGFR. сфероиды.

    3. Обсуждение

    Открытие противоопухолевых препаратов и их фармакологические применения диктуют потребность в клеточных моделях, которые ближе к условиям in vivo. Более реалистичное межклеточное взаимодействие реализовано в 3D-моделях, и такие системы могут значительно улучшить клеточный скрининг лекарств [6].Способность клеток к самосборке сама по себе не является экстраординарной, но обычно для культивирования клеток в 3D-моделях необходимы специальные системы или добавки, например, висячая капля, скаффолды и гидрогели, специальный пластик и коктейли факторов роста [2, 23]. Описаны различные способы получения культуры клеток 3D MCF7 [20,24,25,26]. В зависимости от используемой технологии основные молекулярные характеристики клеток в 3D могут различаться, что может привести к сложностям воспроизведения таких моделей.Поэтому разработка простого и воспроизводимого метода получения 3D-культур является актуальной задачей. EGFR сверхэкспрессирован во многих опухолях эпителиального происхождения [27,28]. Примерно в половине случаев трижды негативного рака молочной железы и воспалительного рака молочной железы наблюдается сверхэкспрессия EGFR, но клетки MCF7, модели гормон-позитивного рака молочной железы, характеризуются как клетки EGFR low [29]. Браунхольц и др. обнаружили, что активация EGFR была решающим фактором независимого от якоря культивирования клеток плоскоклеточного рака головы и шеи [17].Таким образом, можно сформулировать парадокс клеток MCF7, отличающий их от других: это клетки с низкой экспрессией EGFR и выраженной способностью к спонтанному образованию сфероидов. Здесь мы сконструировали клетки MCF7 со сверхэкспрессией EGFR, которые росли преимущественно в виде неадгезивных сфер без специальных добавок, каркасов и т. д. Плотные контакты между клетками в этих сферах поддерживались белками межклеточных соединений ZO-1 и Е-кадгерином, судя по всему. методом иммуноокрашивания. Плотные контакты являются межклеточными соединениями, критически важными для построения эпителиального барьера и поддержания эпителиальной полярности [30]. Для клеток с фенотипом РСК была показана способность образовывать многоклеточные 3D-сферы in vitro при выращивании в неадгезивных бессывороточных условиях [31]. Бахмад и др. разработали анализ образования сфер (SFA) для анализа in vitro присутствия CSCs в различных моделях рака предстательной железы [23]. Эти исследования подтверждают связь между способностью клеток образовывать сфероиды и содержанием РСК в клеточной культуре. Тем не менее, содержание CSC в MCF7 намного ниже, чем в MDA-MB-231 тройных негативных клетках рака молочной железы со слабой способностью к спонтанному образованию сфер [32].В нашей работе мы не выявили изменений количества клеток CD44 + /CD24 low/− РСК среди сфероидов MCF7 wt и MCF7-EGFR. Эти данные не отменяют более высокой сферообразующей способности клеток с фенотипом CD44 + /CD24 low/− , но в нашей работе следует учитывать, что первичный отбор клеток MCF7-EGFR проводился по уровню экспрессии экзогенного EGFR и две популяции среди трансформированных клеток: популяция CD44 + /CD24 низкая/- и популяция EGFR высокая , возможно, не совпадали. Таким образом, в нашем случае экспрессия EGFR была более важной характеристикой для перехода прикрепленных MCF7 к 3D, чем обогащение CSC-подобными клетками. Экспрессия трансгена EGFR действует как инициирующий фактор, который запускает молекулярные каскады, приводящие к меньшей адгезионной способности клеток MCF7-EGFR. %), которые являются другим фенотипом, связанным с CSC, по сравнению с MCF7 wt (до 3.5%). Недавно Цяо и соавт. показали, что высокая частота клеток CD44 /CD24 связана с отсроченным послеоперационным метастазированием рака молочной железы [33]. Они продемонстрировали, что при определенных условиях CD44 /CD24 способны спонтанно трансформироваться в CD44 + /CD24 клетки РСК. Литвяков и др. обнаружил, что дедифференцировка клеток рака молочной железы CD44 low в CD44 high связана с амплификацией генов стволовости [34].Ян и др. исследовали распределение клеток MCF7 в различных популяциях с точки зрения содержания маркера CD44/CD24 [35]. Они показали, что клетки с фенотипами CD44 / CD24 и CD44 / CD24 + не образовывали опухоли при трансплантации мышам. В целом, клетки в ядре сфероидов растут в условиях более высокой гипоксии, чем прилипшие раковые клетки, что приводит к активации фенотипа РСК. Денес и др. обнаружили положительную корреляцию между наличием стволовых клеток в многоклеточных сфероидах и гипоксией [7].Таким образом, отсутствие обогащения популяцией РСК в сфероидах MCF7-EGFR отличает эти сфероиды от других подобных 3D-систем. С другой стороны, CD44 следует рассматривать не только как маркер стволовости, но и как белок адгезии. Следует отметить, что CD44 является основным рецептором гиалуроновой поверхности на клеточной поверхности, а также взаимодействует с остеопонтином, коллагеном и ламинином [36]. Поскольку наиболее значимое различие между клетками MCF7-EGFR и сфероидами MCF7-EGFR заключалось в снижении количества рецепторов CD44 (в среднем с 94 до 67% соответственно; см. рис. 4), можно было бы ожидать ухудшения адгезивных свойств клеток с низкий уровень CD44.Мы обнаружили, что клетки из сфероидов MCF7-EGFR частично утратили рецепторы HER3. Ранее такое же снижение HER3 мы наблюдали в клетках первичного рака молочной железы после циклов гипоксических состояний (импульсная гипоксия) [37]. Поскольку сфероиды, полученные из клеток MCF7 wt , после стимуляции факторами роста также потеряли HER3, можно предположить, что плохая оксигенация внутри сфероидов может отрицательно регулировать экспрессию HER3. Раковая гипоксия может способствовать более агрессивному фенотипу с терапевтической устойчивостью.Chun и соавторы показали, что спонтанные сфероиды клеток MCF7 содержат высокую долю MDR-1-позитивных клеток с устойчивостью к различным традиционным противоопухолевым терапевтическим средствам [38]. Удивительно, но в случае сфероидов MCF7-EGFR активность насоса лекарственной устойчивости не повышалась, чем в родительских клетках MCF7 wt . Можно предположить, что такие особенности сфероидов MCF7-EGFR связаны с отсутствием увеличения популяции РСК-подобных клеток.

    4. Материалы и методы

    4.1. Клеточные линии

    Клетки аденокарциномы человека MCF-7 (приобретены: #ACC 115, DSMZ, Брауншвейг, Германия) содержали в модифицированной по Искову среде Дульбекко (Sigma-Aldrich, Берлингтон, Массачусетс, США), дополненной 10% инактивированного нагреванием эмбриона теленка. сыворотка и 1% пенициллин-стрептомицин в 5% СО 2 .

    клеток почек человеческого эмбриона HEK293 выращивали в среде DMEM: Nutrient Mixture F-12 (DMEM:F12; Sigma-Aldrich, Burlington, MA, USA) с добавлением 4 мМ l-глютамина и 10% фетальной бычьей сыворотки (HyClone, Logan, UT). , США), 100 ЕД/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина, 1 мМ пирувата натрия и 1× МЕМ заменимых аминокислот.Клетки поддерживали в монослойной культуре, как описано ранее [39].
    4.2. Конструкция клеток MCF7-EGFR
    клеток MCF7 трансфицировали смесью упаковочных ретровирусных плазмид pCMV-VSV-G (кат. № 8454, Addgene, Watertown, MA, USA), pUMVC (кат. № 8449, Addgene, Watertown, США). Массачусетс, США) и плазмиды для переноса EGFRwt (кат. № 11011, Addgene, Watertown, MA, USA) или контрольной плазмиды (кат. № 27490; Addgene, Watertown, MA, USA) с использованием протокола кальций-фосфатной трансфекции. [40].Два дня спустя супернатанты кондиционированных сред фильтровали с использованием фильтров PES 0,45 мкм и использовали для трансдукции клеток либо сразу, либо после ультрацентрифугирования. Клетки MCF7 трансдуцировали целевыми или контрольными ретровирусными частицами по протоколу спинокуляции [41] в присутствии полибрена (8 мкг/мл). Затем через 2 дня после трансдукции к трансдуцированным клеткам добавляли пуромицин (1 мкг/мл) для удаления нетрансдуцированных клеток. Экспрессию EGFR анализировали с помощью проточной цитометрии с использованием антител против EGFR 1:100 (#MA5-13319; Invitrogen, Rockford, IL, USA), специфичных к внеклеточному домену рецептора EGFR.Клетки MCF7 с EGFR-высоким фенотипом сортировали (сортировщик SONY SH800S, Сан-Хосе, Калифорния, США, чип с насадкой 100 мкм) в клейкие 24-луночные планшеты для культивирования клеток (Eppendorf TM ; Гамбург, Германия) и культивировали в стандартных условиях.
    4.3. Формирование и подсчет сфероидов

    Если не указано иное, клетки MCF7 wt и MCF7-EGFR культивировали в стандартных условиях на клеящихся 96-луночных планшетах (TPP, Trasadingen, Швейцария) с образованием сфероидов. При необходимости сфероиды переносили на планшеты с низкой адгезией (необработанные планшеты Eppendorf™, #EP003730011-80EA, Гамбург, Германия) без изменения состава культуральной среды.Для построения кинетических кривых образования сфероидов клетки осторожно диссоциировали с помощью реагента для диссоциации клеток Stempro™ Accutase™ (A1110501, Gibco, Нью-Йорк, штат Нью-Йорк, США), высевали в количестве 3 × 10 3 клеток/лунку. 96-луночные планшеты и культивировали в стандартных условиях, как описано выше. Сфероиды подсчитывали ежедневно в шести независимых лунках 96-луночного планшета с использованием инвертированного микроскопа (Eclipse Ti, Nikon, Токио, Япония) при 10-кратном увеличении. В светлом поле подсчитывали все свободно плавающие сфероиды. Те сфероиды, размер которых был меньше 30–50 мкм, не включали в общую оценку сфероидов, и рассчитывали среднее значение сфероидов на лунку и стандартное отклонение.

    Для оценки действия факторов роста клетки культивировали в среде DMEM/F12 с добавлением 1× добавки GlutaMAX™ (35050-061, Gibco™, Нью-Йорк, штат Нью-Йорк, США), 1× антибиотика-антимикотика (15240-062, Gibco ™, Нью-Йорк, штат Нью-Йорк, США), 20 нг/мл EGF (эпидермальный фактор роста; E9644, Sigma-Aldrich, Берлингтон, Массачусетс, США), 20 нг/мл основного фактора роста фибробластов (bFGF, PHG0261, Gibco™, New Йорк, штат Нью-Йорк, США), 5 мкг/мл инсулина (I9278, Sigma-Aldrich, Берлингтон, Массачусетс, США), 2% добавки B27™ Plus (A35828010, Gibco™, Берлингтон, Массачусетс, США) и 4% альбумина крупного рогатого скота Сывороточная фракция V (BSA, 126593, Sigma-Aldrich, Берлингтон, Массачусетс, США).Этот коктейль факторов роста был составлен в соответствии с рекомендациями Xie et al. [22]. Для оценки параметров роста в неклейких планшетах клетки высевали в чашки Nunclon™ Sphera™ (174943, Thermo Scientific™, Уолтем, Массачусетс, США).
    4.4. Иммуноцитохимия сфероидов
    Иммуноцитохимия сфероидов была проведена по существу так же, как описано в [42], с некоторыми изменениями. Вкратце, сфероиды собирали центрифугированием, промывали в холодном PBS, переносили на предметное стекло и осторожно расплющивали под покровным стеклом, чтобы обнажить внутреннюю часть.Покровное стекло удаляли, область со сфероидами обводили гидрофобным маркером PAP Pen (Diagnostic biosystems; Гаага, Нидерланды) и сплющенные сфероиды фиксировали 80% метанолом при -20 °C в течение 20 мин. Клетки дважды промывали PBS и блокировали 5% BSA в PBS в течение 30 мин при комнатной температуре. Для окрашивания использовали следующие антитела: антитело к белку плотных контактов ZO1 (1:100, ab216880, Abcam, Кембридж, Великобритания), Alexa Fluor ® 647, конъюгированные ослиные антикроличьи IgG H&L (ab150075, Abcam, Кембридж, Великобритания). ), конъюгированное с Alexa488 крысиное анти-CD324 (E-кадгерин, Invitrogen, Waltham, MA, USA) (1:100, 53-3249-80, eBioscience, San Diego, CA, USA). Образцы инкубировали с антителами при 4°С в течение ночи и с конъюгированными вторичными антителами в течение 1 ч при комнатной температуре. Образцы также инкубировали только с вторичным антителом в качестве изотипического контроля. Клетки монтировали в Prolong Diamond Antifade Mountant с DAPI (Invitrogen, Eugene, OR, USA) для визуализации ядер. Предметные стекла визуализировали и получали флуоресцентные изображения с помощью флуоресцентного микроскопа Image.A2.Zeizz (Carl Zeizz, Йена, Германия) (40-кратное увеличение), программное обеспечение Zen версии 3.0 СР.
    4.5. Гистологический анализ сфероидов

    Свободно плавающие сферы фиксировали 10% забуференным формалином (Биовитрум, Санкт-Петербург, Россия) в течение 20 мин при комнатной температуре, затем постфиксировали в течение 24 ч при 4 °С с 30% сахарозой в H 2 O. Затем сферы помещали в конические формы, заливали заливочной средой для криотомии (Tissue-Tek, Торранс, Калифорния, США) в блоки и замораживали при -70 °C. Полученные блоки нарезали на криостате LEICA CM1850 UV (Leica, Wetzlar, Германия).Предметные стекла фиксировали смесью метанола и ацетона (1:1), затем окрашивали гематоксилином Майера и эозином по 3 мин. Окрашенные клетки визуализировали с помощью флуоресцентного микроскопа Axioscop 2 PLUS (Carl Zeiss, Йена, Германия).

    4.6. Анализ клеточного уничтожения
    . Жизнеспособность клеток определяли через 72 ч после обработки лекарственным средством с использованием теста МТТ, как в Ref. [39]. Значения IC50 рассчитывали с помощью программного обеспечения CompuSyn версии 1.0.

    Исходный раствор 10 мМ AG1478 (Sigma-Aldrich, Берлингтон, Массачусетс, США) в диметилсульфоксиде (ДМСО) хранили при температуре -70 °C.Для клеточных экспериментов AG1478 разводили в IMDM, содержащем 10% FBS, так что самая высокая концентрация ДМСО в лунках для культивирования составляла 0,1%. Исходный раствор 0,5 мг/мл цисплатина (Верофарм, Волгинский, Россия) хранили при +4 °С.

    4.
    7. Вестерн-блоттинг

    Клетки лизировали буфером для лизиса клеток (50 мМ Трис, рН 8,0, 5 мМ ЭДТА, 150 мМ NaCl), содержащим 0,1% SDS, 1× полный коктейль ингибиторов протеазы (Roche Diagnostics GmbH, Мангейм, Германия) и 1 мМ ПМСФ. Образцы (20 мкг) разделяли с помощью 10% SDS-PAGE и переносили на нитроцеллюлозную мембрану Trans-Blot (Bio-Rad Laboratories, Геркулес, Калифорния, США) методом влажного блоттинга (100 В, 500 мА, 90 мин, 15 мин). °C) с использованием «Mighty Small Transphor» (GE Health Bio-Science AB, Хельсинки, Финляндия).Иммунодетекцию проводили с использованием системы iBind (Life Technologies, Уолтем, Массачусетс, США), iBind Cards (Invitrogen, Уолтем, Массачусетс, США) и антител. Мембрану инкубировали с антителами: анти-β-тубулином, полученным у мыши, 1:2000 (#T8328, Sigma-Aldrich, Burlington, MA, USA) и анти-EGFR 1:1000 (#sc-373746, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz Biotechnology, Санта-Крус, США). Круз, Калифорния, США) в течение ночи при 4 ° C в PBS. Далее мембрану инкубировали с HRP-конъюгированными антителами против козьего IgG HRP 1:1000 (#HAF109, R&D Systems, Миннеаполис, Массачусетс, США) в течение 1 ч при комнатной температуре в обезжиренном сухом молоке 5%. Сигнал хемилюминесценции получали с помощью набора реагентов хемилюминесцентного субстрата Novex ECL HRP (Invitrogen, Waltham, MA, USA) и регистрировали с помощью блоттинга C-DiGit (Li-COR Bioscience, Nebraska, NE, USA).

    4.8. Проточная цитометрия

    Все анализы проводились с использованием проточного цитометра FACSCantoII (BD Biosciences, Франклин Лейкс, Нью-Джерси, США), а данные анализировались с помощью программного обеспечения FACSDiva (BD Biosciences, Нью-Джерси, США). Первоначально клетки были закрыты на основе прямого рассеяния по сравнению с боковым рассеянием, чтобы исключить мелкие частицы, и было собрано десять тысяч событий из этой популяции.Для анализа использовали следующие антитела: анти-HER2-FITC, анти-HER3-APC от Sony (№ 162686 и № 162652 соответственно), анти-CD44-APC и анти-CD24-PECy7 от BD Pharmigen (№ 560890 и № 561646). соответственно) (Sony, Сан-Хосе, Калифорния, США).

    4.9. Родамин 123 Эффлюкс
    Анализ эффлюкса Родамина 123 проводили по существу так же, как описано в [43], с некоторыми модификациями. Вкратце, клетки культивировали в стандартных условиях в течение 48 часов, после чего клетки (2,5 × 10 5 ) собирали с помощью Accutase™ (Gibco, Нью-Йорк, штат Нью-Йорк, США), ресуспендировали в полной среде и 8 мМ Rh223 (Santa Cruz). Biotechnology, Гейдельберг, Германия) добавляли к клеткам.После 50-минутной инкубации с Rh223 на льду среду для удаления избытка Rh223 заменяли средой без Rh223, и клетки инкубировали при 37 °C в течение желаемого периода времени, промывая порцией Efflux Buffer (PBS, 0,01% азида натрия). , 0,5% BSA) и анализировали с помощью проточной цитометрии с использованием канала FITC. В качестве отрицательного контроля к образцам добавляли ингибитор P-gp Верапамил (Озон, Тольятти, Россия) до конечной концентрации 10 мкМ за 45 мин до Rh223.
    4.10. Статистический анализ

    Данные выражены как среднее, ±SD.Статистический анализ проводили с использованием t-критерия Стьюдента. Различия считались достоверными при значениях р менее 0,05.

    Пластическая хирургия Норфолк | Косметический хирург Чесапик

    отзывов

    • Спасибо!

      Спасибо всем за вашу доброту, терпение и понимание, а также за то, что вы так заботитесь обо мне. Я очень ценю все, что вы делаете

    • Дорогой Ларри,

      Большое спасибо за вашу прекрасную заботу и прекрасное хирургическое мастерство.Я в восторге от результатов.

    • Уважаемый доктор Колен,

      Я хотел бы поблагодарить вас и ваших медсестер за то, что вы держали меня за руку на протяжении всего хирургического процесса, и за такую ​​прекрасную работу. 🙂 Такое ощущение, что они у меня были всегда. Я буду вечно благодарен вам за то, что вы вооружили меня вновь обретенной уверенностью для моего большого приключения в цирке. Я надеюсь, что вы хорошо — Приезжайте в гости!

    Познакомьтесь с нашими врачами

    Познакомьтесь с доктором.Лоуренс Колен

    Доктор Лоуренс Колен — пластический хирург, специализирующийся на косметической хирургии лица. тело и грудь, реконструктивная хирургия груди. В настоящее время он практикует в Норфолке. всего в нескольких минутах от Вирджиния-Бич, Чесапика и Портсмута.

    Пластические хирурги, сертифицированные Советом директоров

    Познакомьтесь с доктором.Теодор Уроски-младший

    Доктор Теодор Уроски-младший — пластический хирург, специализирующийся на постбариатрических операциях. контурная и реконструктивная хирургия груди. В настоящее время он проживает в Вирджиния-Бич, Вирджиния со своей семьей и практикует в Норфолке, штат Вирджиния.

    Пластические хирурги, сертифицированные Советом директоров

    Добро пожаловать на сайт Norfolk Plastic Surgery, P.C. Наши опытные и хорошо обученные пластические и реконструктивные хирурги, *Dr. Лоуренс Колен и доктор Теодор Уроски-младший сертифицированы Американским советом по пластической хирургии. Наша клиника, расположенная в Норфолке, штат Вирджиния, предназначена для обслуживания людей всех возрастов, которые хотят улучшить форму или функцию хирургическим путем. В дополнение ко многим доступным процедурам пластической хирургии, мы также предлагаем множество неинвазивных вариантов ухода за кожей, чтобы восстановить внешний вид вашей кожи!

    Наша философия
    Наша практика пластической хирургии отражает искреннее уважение к людям, которых мы лечим.Мы подходим к каждому пациенту индивидуально. Тщательная предоперационная консультация с откровенным обсуждением того, что можно и чего нельзя сделать, создает основу для достижения нашей конечной цели – полного удовлетворения пациента. Мы подчеркиваем здравые хирургические принципы, основанные на проверенных временем методах. Наш офис полностью укомплектован и аккредитован и отражает заботливую среду, где индивидуальные потребности наших пациентов являются нашим главным приоритетом.

    Свяжитесь с нами сегодня!
    После просмотра нашего веб-сайта для получения информации о наших хирургах, персонале, процедурах и дополнительных ресурсах по пластической хирургии, мы рекомендуем вам записаться на консультацию к одному из наших опытных пластических хирургов или лицензированному косметологу. Не стесняйтесь звонить нам по телефону 757-466-1000 или использовать нашу удобную контактную форму.

    Процедуры функций

    Подтяжка живота
    Подтяжка живота удаляет лишний жир и кожу и в большинстве случаев восстанавливает ослабленные или разделенные мышцы, создавая более гладкий и упругий профиль живота.
    Узнать больше Увеличение груди
    Увеличение груди включает в себя использование имплантатов, чтобы удовлетворить ваше желание иметь более полную грудь или восстановить объем груди, потерянный после снижения веса или беременности.
    Узнать больше Подтяжка лица
    Подтяжка лица — это хирургическая процедура, направленная на устранение видимых признаков старения на лице и шее.
    Узнать больше Ботокс
    Ботокс используется, чтобы легко уменьшить появление морщин и тонких линий.
    Узнать больше

     

    ВАЖНОЕ ЗАМЕЧАНИЕ ДЛЯ НАШИХ КЛИЕНТОВ

    Для получения дополнительной информации перейдите по ссылкам ниже:

    Ультразвуковая диагностика заболеваний щитовидной железы

    ‘) переменная голова = документ. getElementsByTagName(«голова»)[0] var script = document.createElement(«сценарий») script.type = «текст/javascript» script.src = «https://buy.springer.com/assets/js/buybox-bundle-52d08dec1e.js» script.id = «ecommerce-scripts-» ​​+ метка времени head.appendChild (скрипт) var buybox = document.querySelector(«[data-id=id_»+ метка времени +»]»).parentNode ;[].slice.call(buybox.querySelectorAll(«.вариант-покупки»)).forEach(initCollapsibles) функция initCollapsibles(подписка, индекс) { var toggle = подписка.querySelector(«.цена-варианта-покупки») подписка.classList.remove(«расширенный») var form = подписка.querySelector(«.форма-варианта-покупки») если (форма) { вар formAction = form.getAttribute(«действие») документ. querySelector(«#ecommerce-scripts-» ​​+ timestamp).addEventListener(«load», bindModal(form, formAction, timestamp, index), false) } var priceInfo = подписка.querySelector(«.Информация о цене») var PurchaseOption = toggle.parentElement если (переключить && форма && priceInfo) { toggle.setAttribute(«роль», «кнопка») переключать.setAttribute(«табиндекс», «0») toggle.addEventListener («щелчок», функция (событие) { var expand = toggle.getAttribute(«aria-expanded») === «true» || ложный toggle.setAttribute(«aria-expanded», !expanded) form.hidden = расширенный если (! расширено) { покупкаOption.classList.add(«расширенный») } еще { покупкаВариант. classList.remove («расширенный») } priceInfo.hidden = расширенный }, ложный) } } функция bindModal (форма, formAction, метка времени, индекс) { var weHasBrowserSupport = window.fetch && Array.from функция возврата () { var Buybox = EcommScripts ? EcommScripts.Buybox : ноль var Modal = EcommScripts ? EcommScripts.Модальный: ноль if (weHasBrowserSupport && Buybox && Modal) { var modalID = «ecomm-modal_» + метка времени + «_» + индекс var modal = новый модальный (modalID) modal.domEl.addEventListener («закрыть», закрыть) функция закрыть () { form. querySelector («кнопка [тип = отправить]»).фокус() } вар корзинаURL = «/корзина» var cartModalURL = «/cart?messageOnly=1» форма.setAttribute( «действие», formAction.replace(cartURL, cartModalURL) ) var formSubmit = Buybox.interceptFormSubmit( Буйбокс.fetchFormAction(окно.fetch), Buybox.triggerModalAfterAddToCartSuccess(модальный), функция () { form.removeEventListener («отправить», formSubmit, false) форма.setAttribute( «действие», formAction.replace(cartModalURL, cartURL) ) форма. представить() } ) form.addEventListener («отправить», formSubmit, ложь) document.body.appendChild(modal.domEl) } } } функция initKeyControls() { document.addEventListener («нажатие клавиши», функция (событие) { если (документ.activeElement.classList.contains(«цена-варианта-покупки») && (event.code === «Пробел» || event.code === «Enter»)) { если (document.activeElement) { событие.preventDefault() документ.activeElement.click() } } }, ложный) } функция InitialStateOpen() { var узкаяBuyboxArea = покупная коробка. смещениеШирина -1 ;[].slice.call(buybox.querySelectorAll(«.опция покупки»)).forEach(функция (опция, индекс) { var toggle = option.querySelector(«.цена-варианта-покупки») var form = option.querySelector(«.форма-варианта-покупки») var priceInfo = option.querySelector(«.Информация о цене») если (allOptionsInitiallyCollapsed || узкаяBuyboxArea && индекс > 0) { переключать.setAttribute («ария-расширенная», «ложь») form.hidden = «скрытый» priceInfo.hidden = «скрытый» } еще { переключить.щелчок() } }) } начальное состояниеОткрыть() если (window.buyboxInitialized) вернуть window. buyboxInitialized = истина initKeyControls() })()

    публикаций ADDLAB | Университет Аалто

    2020

    Лайтинен, А., Саари К., Кукко К., Пелтонен П., Лаурила Э., Партанен Дж. и Вуоринен В. (2020). Вычислительное исследование гидродинамики с помощью сопряженной теплопередачи в OpenFOAM: концепция жидкостного охлаждения для электроники высокой мощности. Международный журнал потоков тепла и жидкости . 85, 16 с., 108654.

    Кукко, К., Акмаль, Дж. С., Кангас, А., Салми, М., Бьоркстранд, Р., Виитанен, А-К., Партанен, Дж. и Пирс, Дж. (2020). Параметрическая универсальная клип-система аддитивного производства: подход с открытым исходным кодом для помощи в измерении индивидуального воздействия в зоне дыхания. Прикладные науки . 10, 19, 14 стр., 6671.

    Акмаль, Дж. С., Салми, М., Хемминг, Б., Тейр, Л., Суомалайнен, А. , Кортесниеми, М., Партанен, Дж. и Лассила, А. (2020). Совокупные неточности при внедрении аддитивного производства с помощью медицинской визуализации, 3D-порогового определения и 3D-моделирования: пример использования имплантата для конечного использования. Прикладные науки (Швейцария). 10, 8, 28 п., 2968.

    Чекуров С., Ван М., Салми М. и Партанен Дж. (2020). Разработка, внедрение и оценка творческого задания по проектированию аддитивного производства: интерпретация улучшений успеваемости учащихся. Педагогические науки . 10, 6, с. 1-17 17 п., 156.

    Теотия, А., Динел, К., Каюм, И., ван Бохове, Б., Гупта, С., Партанен, Дж., Сеппала, Дж. и Кумар, А. (2020). Улучшенная регенерация кости при дефектах костей кролика с использованием 3D-печатных композитных каркасов, функционализированных остеоиндуктивными факторами. Прикладные материалы и интерфейсы ACS . 12, 43, с. 48340-48356 17 стр.

    Мется-Кортелайнен, С., Рейонен, Й., Рийпинен, Т. , Ваайоки, А., Пуукко, П., Салми, М., Чекуров С., Бьоркстранд Р., Кречмар Н., Акмаль Дж. С., Путтонен Т. и Партанен Дж. (2020). Новый бизнес от Digital Spare Parts. ВТТ. 28 р.

    Джаяпракаш С., Пааси Дж., Пеннанен К., Флорес Итуарте И., Лилль М., Партанен Дж. и Созер Н. (2020). Технико-экономические перспективы и целесообразность 3D-печати пищевых продуктов: взгляды промышленных экспертов, исследователей и потребителей. Продукты питания . 9, 12, 23 с., 1725.

    Хейккинен И., Савин Х., Партанен Дж., Seppälä, J. & Pearce, JM (2020). На пути к национальной политике исследований аппаратного обеспечения с открытым исходным кодом: пример Финляндии. Технологическое прогнозирование и социальные изменения . 155, 10 стр., 119986.

    Салми, М., Акмаль, Дж. С., Пей, Э., Вольф, Дж., Джарибион, А. и Хагигат Хаджави, С. (2020). 3D-печать в условиях COVID-19: оценка производительности наиболее перспективных решений с открытым исходным кодом в чрезвычайных ситуациях. Прикладные науки . 10, 11, 15 стр., 4004.

    Хагигат Хаджави, С., Салми, М. и Холмстрём, Дж. (2020). Аддитивное производство как средство создания цифровых запасных частей. Управление 3D-печатью: управление операциями для аддитивного производства. Эйерс, Д. (ред.). Пэлгрейв Макмиллан, с. 45-60 16 р.

    Калле, М.А.Г., Салми, М., Маццариол, Л.М., Алвес, М. и Куджала, П. (2020). Аддитивное производство миниатюрных морских конструкций для проверки ударопрочности: метод масштабирования и экспериментальные испытания. Морские сооружения . 72, 18 с., 102764.

    Calle Gonzales, M., Kujala, P., Salmi, M. & Mazzariol, LM (2020). Испытание веб-балки ASIS: миниатюрный эксперимент. События в области столкновения и посадки на мель судов и морских сооружений. Гедес Соареш, К. (ред.). п. 3-8 6 р. (Труды по морским технологиям и океанотехнике; том 4).

    Айт-Мансур И., Кречмар Н., Чекуров С., Салми М. и Реч Дж. (2020). Моделирование компенсации усадки в зависимости от конструкции и определение механических свойств металлических FFF. Прогресс в аддитивном производстве. 5, 1, с. 51-57 7 р.

    Петтерссон, А.Б.В., Салми, М., Валлитту, П., Серло, В., Туоми, Дж. и Мякитие, А.А. (2020). Основное клиническое использование аддитивного производства (трехмерная печать) в Финляндии, ограниченное областью головы и шеи в 2016–2017 гг. Скандинавский журнал хирургии. 109, 2, с. 166-173 8 стр.

    Калле, М.А.Г., Салми, М., Маццариол, Л.М. и Куджала, П. (2020). Миниатюрная репродукция сгребающих испытаний морской структуры: метод подобия и эксперимент. Инженерные сооружения . 212, 10 стр., 110527.

    Флорес Итуарте, И., Салми, М., Папула, С., Хууки, Дж., Хемминг, Б., Коатанеа, Э., Нурми, С. и Вирккунен, И. (2020). Модификация поверхности аддитивно изготовленной мартенситностареющей стали с содержанием 18% никеля с помощью ультразвукового вибрационного полирования шариками. Журнал производственных наук и техники: труды Asme . 142, 7, 11 п., 4046903.

    Вепсаляйнен Р. , Ранта К., Лавио Дж., Бьоркстранд Р., Кивилуома П.и Куосманен, П. (2020). Устройство для удаления порошка для аддитивного производства металлов. Материалы 5-го Балтийского симпозиума по мехатронике . Университет Аалто, инженерная школа, 6 стр.

    Улла Р., Акмаль Дж. С., Лааксо С. и Ниеми Э. (2020). Анизотропия мартенситно-стареющей стали 18Н-300 аддитивного производства: характеристики резьбы и поверхности. Материалы конференции 53 rd CIRP по производственным системам. Чикаго, США, с. 68-78. 11 стр .

    Улла Р., Акмаль Дж. С., Лааксо С. и Ниеми Э. (2020). Анизотропия аддитивного производства Alsi10mg: резьба и целостность поверхности. Международный журнал передовых производственных технологий . 107, 9-10, с. 3645-3662 18 стр.

    Флорес И., Кречмар Н., Азман А. Х., Чекуров С., Педерсен Д. Б. и Чаудхури А. (2020). Влияние решетчатых структур на экономику и производительность плавления слоя металлического порошка. Аддитивное производство .31, 17 стр., 100947 .

    Чекуров, С. и Мякеля, И. (2020). Повышение эффективности упаковки и надежности обработки компонентов в логистике с помощью нового подхода САПР. ASME 2019 Международный конгресс и выставка машиностроения: Том 14: Дизайн, системы и сложность . ASME, 8 стр. В014Т14А004

    Алени А. Х., Кречмар Н., Янссон А., Итуарте И. Ф. и Сен-Пьер Л. (2020). 3D-печать плотных и пористых структур Tio2. Керамикс Интернэшнл .46, 10, с. 16725-16732 8 стр.

    Кречмар, Н. (2020). Оценка аддитивных компонентов конечного использования: текущее состояние и дополнительные улучшения в конструкции, материалах и принятии решений. Университет Аалто. 122 стр.

    Вито, Д. Д., Канерва, М., Ярвеляйнен, Й., Лайтинен, А., Парнянен, Т., Саари, К., Кукко, К., Хяммяйнен, Х. и Вуоринен, В. (2020). Безопасный и устойчивый дизайн композитных смарт-столбов для беспроводных технологий. Прикладные науки (Швейцария). 10, 21, с. 1-19 19 п., 7594.

    Мусапур, М. (2020). Мультиметаллическая 3D-печать методом экструзии. Университет Аалто. 105 стр.

    Мусапур, М., Азадбе, М., Мохаммадзаде, А. и Даннингер, Х. (2020). Об изгибающем поведении предварительно легированной альфа-латуни во время спекания: метод гибки на месте и моделирование. Порошковая металлургия . 63, 2, с. 134-141 8 стр.

    Гасеми, С., Азадбе, М., Мусапур, М., Мохаммадзаде, А., Даннингер, Х. и Салими, Н.(2020). Роль развития пор при суперсолидусном жидкофазном спекании порошка предварительно легированной латуни. Порошковая металлургия . 63, 3, с. 187-196 10 стр.

    Путтонен, Т. (2020). Деконструкция процесса проектирования: отраслевой пример узла кнопки лифта, переработанного для аддитивного производства. ASME 2019 Международный конгресс и выставка машиностроения. Американское общество инженеров-механиков, vol. 14., 9 р. ИМЭКЕ2019-11219

    Академические издательства Nexus (NAP)

    Влияние лечения аутологичной плазмой на регенерацию роговицы при сухом кератоконъюнктивите у собак

     

    Ватников Юрий Анатольевич¹, Ерин Илья Сергеевич¹, Сулейман Мухитдинович Сулейманов², Куликов Евгений Владимирович¹, Селезнев Сергей Борисович¹, Луцай Владимир Иванович³, Попова Ирина Анатольевна¹*, Стрижаков Александр Анатольевич¹, Вилковысский Илья Федорович¹

    ¹Российский университет дружбы народов (РУДН). Москва, ул. Миклухо-Маклая, 6, 117198; ² Воронежский государственный аграрный университет имени Императора Петра I, г. Воронеж, ул. Мичурина, 1, 394087; ³ Московский государственный университет пищевых производств. Москва, ул. Врубеля, 12, 125080.

     

    Получено | 20 июня 2019 г.; Принято | 02 сентября 2019 г.; Опубликовано | 01 февраля 2020 г.

    *Переписка | Ирина Анатольевна Попова, Российский университет дружбы народов (РУДН). Москва, ул. Миклухо-Маклая, 6, 117198; Электронная почта: [email protected]

    Цитата | Ватников Ю.А., Ерин И.С., Сулейманов С.М., Куликов Е.В., Селезнев С.Б., Луцай В.И., Попова И.А., Стрижаков А.А., Вилковысский И.Ф. (2020). Влияние лечения аутологичной плазмой на регенерацию роговицы при сухом кератоконъюнктивите у собак. Дж. Аним. Здоровье Прод. 8(1): 1-7.

    ДОИ | http://dx.doi.org/10.17582/journal.jahp/2020/8.1.1.7

    ISSN | 2308-2801

    Copyright © 2020 Попова и др. Эта статья находится в открытом доступе и распространяется в соответствии с лицензией Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии надлежащего цитирования оригинальной работы.

     

    Введение

     

    В настоящее время достаточно остро стоит проблема заболеваний глаз у мелких домашних животных (Kim et al., 2016; Erin et al., 2017; de Queiroz et al., 2018; Kirschweng et al., 2018). Воспалительные заболевания переднего отрезка глаза, роговицы и конъюнктивы занимают важное место в практике ветеринарного офтальмолога (Wilmis, 2007; Martin-Alarcon, Schmidt, 2016; Temple-Wong et al., 2016). Сухой кератоконъюнктивит (СКК) у собак представляет собой дисфункцию, в основе которой лежит нарушение слезопродукции (Aicher et al., 2015; Ким и др., 2015 г.; Ли и др., 2015 г.; Ватников и др., 2015; Уилмис, 2007). СКК — полиэтиологическое заболевание, характеризующееся проявлениями роговично-конъюнктивального ксероза (Esson, 2015; Meng et al., 2015; Tseng et al., 2015; Красников и др., 2016), связанное с нарушением гидратации переднего отрезка глазного яблока. роговица и конъюнктива) (Wilmis, 2007; Куликов и др., 2017; Stern et al., 2017). СКК сопровождается следующими клиническими признаками: гиперемией конъюнктивы, дискомфортом в глазах (Tabery, 2012; Kim et al. , 2016), боль, васкуляризация роговицы, пигментация роговицы, появление обильных слизисто-гнойных выделений (Tseng et al., 2015; Jonsson et al., 2018). KCS также может вызывать вторичные заболевания, включая конъюнктивит, сосудистый и пигментный кератит, эрозии и ксеротические язвы роговицы (Pflugfelder et al., 2017; Williams et al., 2017). ККС может поражать как один глаз, так и оба, причем степень поражения обоих глаз не всегда будет одинаковой (Митрохина и др., 2014; Gronkiewicz et al., 2017; Yang et al., 2017). Лечение СКК может быть консервативным или хирургическим и часто сочетать эти два метода (Jonsson et al., 2018). При лечении ККС рекомендуется длительно назначать иммуносупрессивные препараты, часто отмечаются ограниченные результаты с побочными эффектами (Dunn, 2014; Braidee et al., 2018).

     

    Обогащенная тромбоцитами плазма (PRP) — плазма, взятая у конкретного пациента, которая содержит повышенное количество факторов роста, о чем свидетельствует повышенное количество тромбоцитов после центрифугирования. PRP содержат факторы роста, которые играют очень важную роль в регенерации тканей, ангиогенезе и пролиферации (Lubkowska et al., 2012). Аутологичная богатая тромбоцитами плазма представляет собой фибриновую сеть, поддерживающую регенеративный матрикс. Его применение может усиливать дифференцировку клеток, стимулировать регенерацию и ангиогенез, тем самым ускоряя процессы заживления различных повреждений (Pflugfelder et al., 2017; Yang et al., 2017).

     

    Принимая во внимание биологическую активность PRP, настоящее исследование было разработано с целью оценки влияния лечения обогащенной тромбоцитами аутологичной плазмой на регенерацию роговицы при сухом кератоконъюнктивите средней степени тяжести у собак.

     

    Материалы и методы

     

    Этическое одобрение

    Настоящее исследование выполнено в соответствии с Государственной программой Российского университета дружбы народов (РУДН). Селективные исследования на животных проводились после получения одобрения комиссии по биоэтике ГРНЦ РУДН.

     

    Экспериментальные животные

    Мы обследовали 20 собак (40 глаз) с умеренными симптомами СКК.Животные были разделены на 2 группы: опытную и контрольную по 10 голов в каждой. У всех животных опытной и контрольной групп были выявлены клинические признаки СКК как минимум на одном глазу (слизистые или слизисто-гнойные выделения, гиперемия конъюнктивы, неоваскуляризация роговицы и ее помутнение). Животные опытной группы получали лечение на основе обогащенной тромбоцитами плазмы (ОТП), а животные контрольной группы получали обычное стандартное лечение.

     

    Получение аутологичной богатой тромбоцитами плазмы

    Перед взятием венозной крови животных содержали на голодной диете не менее 12 часов.Кровь брали из подкожной вены предплечья в специальные пробирки для плазмолифтинга. Венепункция выполнялась катетером VASOFIX (BBRAUN, Германия). Диаметр катетеров колебался от 22G (0,0,9 мм) до 18G (около 1,3 мм) в зависимости от индивидуального диаметра вен животных. После процедуры забора крови пробирку с кровью несколько раз переворачивали, чтобы цельная кровь смешалась с антикоагулянтом. Затем центрифугируют 10 минут при скорости 1500 об/мин. После центрифугирования содержимое пробирки разделили на 3 слоя: верхний — жидкость желтовато-соломенного цвета (аутологичная богатая тромбоцитами плазма), средний — разделительный гель, нижний — красновато-эритроцитный сгусток (Маркс , 2004; Ахмеровет и др., 2011; Ковач и др., 2014).

     

    Дизайн исследования и используемые методологии

    Как следует из таблицы 1, животные опытной группы в качестве терапии получали антибиотик ципрофлоксацин (глазные капли ципровет), в качестве противовоспалительного средства — циклоспорин А (офтальмологическая мазь Оптимун), лубрикант на основе декспантенола (корнегель ) использовался в качестве увлажняющего препарата. Инъекции физиологического NaCl 0,9% в объеме 0,3 мл проводились для чистоты эксперимента, только для того, чтобы вызвать у животных опытной и контрольной групп одинаковые изменения, связанные с самой процедурой инъекции. Лечение животных опытной группы было идентичным, за исключением того, что им применяли субконъюнктивальное введение PRP 1 раз в неделю. Эксперимент проводился в течение 8 недель.

     

    Исходные данные по слезному тесту Ширмера (СТТ) (Kim et al., 2016), проведенному нами при начальном приеме, совпадают у животных опытной и контрольной групп (10±0,19 мм/мин). Сухой конъюнктивит средней степени тяжести характеризуется уровнем слезопродукции 8-10 мм/мин (Meng et al., 2015; Ким и др., 2016). На основании динамики изменения уровня слезопродукции мы сравнили эффективность лечения без применения PRP и с применением PRP.

     

    Для сравнения эффективности лечения с PRP и без него использовали следующие методы: Визуальный осмотр больных животных с помощью оптических приборов (бинокулярная лупа Heine, операционный микроскоп Karl Zeiss), биомикроскопия роговицы, офтальмоскопия глазного дна и роговицы с помощью прямого офтальмоскопа ( компании Rudolf Riester, Юнгенген, Германия) и непрямого офтальмоскопа (Appasamy Associates, Ченнаи, Индия). Кроме того, был проведен флуоресцентный тест с использованием синего кобальтового фильтра и слезоточивого теста Ширмера (STT) в соответствии с Cherry et al. (2018). Материал для цитологического исследования брали методом мазка-отпечатка, т. е. осторожно прикасаясь предметным стеклом к ​​поверхности роговицы глаза (Tabery et al., 2012; Kim et al., 2016). Препараты с патологическим материалом высушивали на воздухе при комнатной температуре и окрашивали методом Diff-Quick (Tabery et al., 2012; Kim et al., 2016). Дальнейшее исследование мазков проводили с помощью тринокулярного лабораторного микроскопа «Биомед-6» (Санкт-Петербург).Петербург, Россия). под большим и малым увеличением. Для наглядности цитологической картины в динамике лечения заболевания делали фотографии микропрепаратов.

     

    Статистический анализ

    Цифровой материал был подвергнут математической обработке с использованием пакета программ Statistica 6.0.

     

    Результаты и обсуждение

     

    Для оценки краткосрочного эффекта от применения аутологичной обогащенной тромбоцитами плазмы использовали СТТ и выполняли визуальную оценку поверхности глаза. СТТ выполняли непосредственно в день первичного введения, через 30 дней и через 60 дней. Одновременно с исследованием и СТТ был взят материал на цитологическое исследование. Цитологию также проводили на 1, 30 и 60 сутки эксперимента. По данным Шилкина и др. (2017) использование PRP является проверенным методом лечения язв и эрозий роговицы различного генеза, а также методом ускорения регенерации при пересадках роговицы. Наши данные показали, что метод плазмолифтинга безопасен, так как никаких побочных эффектов в ходе эксперимента мы не наблюдали.У всех животных опытной группы со средней степенью СКК показатели СТТ и цитологии вернулись к физиологической норме здоровых животных. У животных контрольной группы также отмечалось наличие положительной динамики, но эти изменения были менее интенсивными.

     

    У животных контрольной группы, получавших стандартное лечение, динамика также была положительной, но менее интенсивной. Животные с ККС средней степени тяжести (уровень слезопродукции 10±0,19 мм/мин) через 30 дней лечения имели результаты СТТ 13±0. 99 мм/мин, что соответствует ККС средней степени тяжести; при этом через 60 дней лечения уровень слезопродукции был достаточно близок к физиологически нормальному и составлял 15±1,3 мм/мин, такие значения СТТ сохранялись до конца эксперимента (табл. 2). В то же время у животных опытных групп динамика изменения уровня гидратации передней поверхности глаза была более интенсивной. Научно доказано, что при сухом кератоконъюнктивите возникает острая необходимость частого местного применения заменителей слезной жидкости, но в то же время содержащиеся в этих препаратах консерванты могут оказывать токсическое действие на ткани роговицы и конъюнктивы (Yingfang et al. ., 2016; Эрин и др., 2017; Стерн и Пфлюгфельдер, 2017). У собак, у которых уровень слезопродукции составлял 10±0,19 мм/мин, что соответствует ККС средней степени тяжести, к 30-му дню лечения он повышался до 18±1,3 мм/мин, что соответствует здоровым животным и данному уровню увлажнения. оставалось до конца эксперимента. На основании представленных данных можно сделать вывод, что метод плазмолифтинга в составе комплексной терапии способствует регенерации тканей роговицы и слезной железы, повышается уровень увлажнения переднего отрезка глаза (конъюнктивы и роговицы).

     

    Можно предположить, что присутствие факторов роста в PRP способствует улучшению восприимчивости тканей роговицы и конъюнктивы собак к лекарственным препаратам (табл. 1). На основании этого можно рекомендовать применение PRP при таких патологических процессах, как сухой кератоконъюнктивит, кератиты различной этиологии, язвы роговицы, дистрофия роговицы, химические и термические ожоги глаз, роговичные черви, хронические стойкие дефекты эпителия и строма роговицы.Уровень общей слезопродукции восстанавливается в более полном объеме к 6-й неделе лечения с использованием PRP. Ремиссия стойкая, но при условии постоянной симптоматической терапии.

     

    Таблица 1: Схемы лечения сухого кератоконъюнктивита у собак контрольной и экспериментальной групп

     

    Группа 1 (контрольная) Группа 2 (экспериментальная)

    1.Ципровет (глазные капли): 3 раза в день

    2. Оптимун (глазная мазь Циклоспорин А): 3 раза в день

    3.Корнерегель: 3 раза в день

    4.NaCl 0,9%: 0,3 мл субконъюнктивально один раз в неделю

    1. Ципровет (глазные капли): 3 раза в день

    2.Оптимун (глазная мазь Циклоспорин А): 3 раза в день

    3.Корнерегель: 3 раза в день

    4.PRP*: 0,3 мл субконъюнктивально один раз в неделю

     

    *PRP: богатая тромбоцитами плазма

     

    Динамика регенерации роговицы у животных контрольной группы с умеренным сухим кератоконъюнктивитом следующая: при начальном приеме у этих животных роговица была непрозрачной из-за отека и наличия обильного пигмента (рис. 1). При повреждении или воспалительных процессах в роговице расположение коллагеновых волокон перестраивается, при этом они насыщаются влагой, отекают и роговица может терять прозрачность, что приводит к снижению зрения (Aicher et al., 2015; Ценг и др., 2015). Наблюдалось обильное слизисто-гнойное отделяемое, цитологически определялась высокая клеточность мазков, фон был представлен слизью, среди клеток обнаруживались эпителиоциты и клетки лейкоцитарного ряда, преимущественно сегментоядерные нейтрофилы (рис. 2). Через 30 дней лечения стандартными методами (табл. 1) у животных контрольной группы с сухим кератоконъюнктивитом средней степени роговица не стала более прозрачной, но в то же время приобрела гладкость, ее поверхность стала блестящей.При цитологическом исследовании через 30 дней определялась высокая клеточность мазка, клеточный состав был представлен эпителиоцитами и сегментоядерными клетками в большом количестве, что свидетельствует о наличии выраженного воспалительного процесса (рис. 2). К 60 дню лечения —

     

     

    ent, роговица животных контрольной группы со среднетяжелым СКК стала частично прозрачной, за счет уменьшения отека и частичной резорбции меланина можно было визуализировать зрачок и радужную оболочку, а также хрусталик.Цитологическая картина мало отличалась от предыдущей. Клеточность мазка также была увеличена и представлена ​​эпителиальными клетками и лейкоцитами (рис. 2).

     

     

     

    Динамика регенерации роговицы у животных опытной группы с умеренным сухим кератоконъюнктивитом была более интенсивной: на начальном приеме у этих животных роговица была непрозрачной из-за отека и наличия обильного пигмента (рис. 3).Также наблюдалось обильное слизисто-гнойное отделяемое, при этом цитологическая картина характеризовалась высокой клеточностью мазков, фон был представлен слизью, среди клеток обнаруживались эпителиоциты и клетки лейкоцитарного ряда, преимущественно сегментоядерные нейтрофилы (рис. 4). Через 30 дней лечения с помощью PRP у животных опытной группы с умеренным сухим кератоконъюнктивитом роговица стала более прозрачной за счет уменьшения отека и резорбции меланина, при этом приобрела гладкость, ее поверхность стала блестящей.При цитологическом исследовании через 30 дней определялась низкая клеточность мазка, клеточный состав был представлен умеренным количеством эпителиоцитов и сегментоядерных клеток. К 60-м суткам лечения роговица у животных опытной группы со среднетяжелым СКК становилась прозрачной, за счет уменьшения отека и резорбции меланина можно было визуализировать зрачок и радужку, а также хрусталик. Цитологическая картина была следующей: клеточность мазков невысокая и представлена ​​небольшим количеством эпителиальных клеток и лимфоидных клеток также в небольшом количестве (рис. 4).

     

     

     

    Из представленных данных можно сделать вывод, что применение аутологичной обогащенной тромбоцитами плазмы в составе комплексной терапии сухого кератоконъюнктивита собак средней степени тяжести более эффективно по сравнению с общепринятой методикой (табл. 1), которая выражалась более интенсивное повышение уровня увлажнения передней поверхности глаза и более интенсивные процессы регенерации роговицы (табл. 2).

     

    Таблица 2: Результаты STT (тест Ширмера на слезу) у животных опытной и контрольной группы

     

    Группы День 1 День 30 День 60
    Группа 1 (контрольная) 10±0,19 мм/мин 18±1,3 мм/мин 18±1.6 мм/мин
    Группа 2 (экспериментальная) 10±0,19 мм/мин 13±0,99 мм/мин 15±1,3 мм/мин

     

     

    Значительное количество методов лечения ХКС отражает усилия исследователей и клиницистов по оказанию лечебного воздействия на звенья патологического процесса. Практически все подходы к лечению сухого кератоконъюнктивита у собак сводятся к использованию иммунодепрессантов, таких как глюкокортикостероиды, циклоспорин-А и такролимус (Martin-Alarcon and Schmidt, 2016; Yingfang et al., 2016; Эрин и др., 2017; Стерн и Пфлюгфельдер, 2017 г.; Уильямс и Тиге, 2018 г.). К сожалению, препараты на основе искусственной или естественной слезы требуют повышенной частоты инстилляций (до 8 раз в сутки), что не всегда возможно. На наш взгляд, существующие методы консервативного лечения ХКС у собак недостаточно эффективны, а улучшения носят временный характер.

     

    На сегодняшний день аутологичная богатая тромбоцитами плазма используется во многих областях медицины (Esson, 2015; Tsubota et al., 2017; де Кейроз и др., 2018 г.; Черри и др., 2018). К сожалению, применение PRP в ветеринарии не находит столь широкого распространения. Наиболее широко известна роль тромбоцитов в гемостазе, помимо основной роли в процессе свертывания крови, тромбоциты имеют и другие особенности. Тромбоциты содержат белки, играющие важную роль в регенерации тканей. Эти белки называются факторами роста, играющими ключевую роль в регенеративных процессах. В PRP эти факторы роста присутствуют в больших количествах.Наличие факторов роста позволяет использовать PRP в качестве стимулятора регенерации тканей (Sherer, Tobalem, 2012; Yang et al., 2016; Pflugfelder et al., 2018; Oliveira et al., 2019). В отечественной и зарубежной литературе данные об использовании аутоплазмы не совсем полны, поэтому мы считаем, что использование аутоплазмы, обогащенной тромбоцитами, в ветеринарии является весьма перспективным методом. Метод заключается в заборе венозной крови с последующим центрифугированием. Вопрос о способах получения PRP достаточно дискуссионный и представляет собой огромное поле для деятельности.На наш взгляд, метод однократного медленного центрифугирования представляет научный и практический интерес.

     

    Высокая заболеваемость СКК среди собак и несовершенство существующих методов лечения позволяет клиницистам проводить испытания и поиск новых методов лечения этого заболевания непосредственно на больных животных, без использования лабораторных животных. В качестве препаратов выбора при лечении воспалительных заболеваний роговицы мы рекомендуем глазные капли или мази, содержащие в своем составе ципрофлоксацин и гентамицин для остановки развития микрофлоры в сочетании с глюкокортикостероидами.Можно предположить, что наличие факторов роста в PRP улучшает восприимчивость тканей роговицы и конъюнктивы собак к лекарственным препаратам. На основании этого можно рекомендовать применение PRP при таких патологических процессах, как сухой кератоконъюнктивит, кератиты различной этиологии, язвы роговицы, дистрофия роговицы, химические и термические ожоги глаз, роговичные гельминты, хронические стойкие дефекты эпителия и строма роговицы. Уровень общей слезопродукции восстанавливается в более полном объеме к 6-й неделе лечения с использованием PRP.Ремиссия стойкая, но при условии постоянной симптоматической терапии.

     

    Сравнение современных схем лечения и схем с добавлением аутологичной богатой тромбоцитами плазмы показало достаточную терапевтическую эффективность последней при лечении сухого кератоконъюнктивита у собак и сопутствующих эрозий и ксеротических язв на роговице глаза. При использовании аутологичной плазмы в составе комплексной терапии ККС сокращаются сроки лечения, снижается частота инстилляций антибиотиков, иммунодепрессантов, удлиняется период ремиссии, который носит стойкий и длительный характер.По результатам нашего исследования у собак с умеренным ККС, получавших в составе комплексной терапии аутологичную обогащенную тромбоцитами плазму, отмечалась более выраженная положительная динамика и к 30-м суткам лечения степень гидратации переднего отрезка глаза снижалась. обычный. На фоне стандартного лечения с использованием общепринятых методов терапевтического воздействия также повышался уровень гидратации переднего отрезка глаза, но положительная динамика была менее интенсивной и менее выраженной.Наши исследования в области применения PRP в ветеринарной офтальмологии показывают, что уровень общей слезопродукции при среднетяжелом течении ККС восстанавливается быстрее и в большем объеме, по сравнению со стандартными консервативными методами лечения.

     

    Заключение

     

    На основании наших данных можно сделать вывод, что аутологичная богатая тромбоцитами плазма играет ключевую роль в регенерации тканей у собак, страдающих СКК средней степени тяжести. Таким образом, его применение можно рекомендовать при различных видах воспалительных или травматических процессов в тканях передней поверхности глаза животных.

     

    Благодарности

     

    Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки Российской Федерации по программе повышения конкурентоспособности Российского университета дружбы народов (РУДН) среди ведущих мировых научно-образовательных центров на 2016-2020 гг. Публикация подготовлена ​​при поддержке «Программы РУДН 5-100» (номер договора 02.а03.0008).

     

    Конфликт интересов

     

    Мы заявляем, что у авторов нет конкурирующих интересов.

     

    Вклад авторов

     

    Авторы внесли равный вклад.

     

    Ссылки

     

  • • Айхер С.А., Гермес С.М., Хегарти Д.М. (2015). Денервация слезной железы приводит к гипоалгезии роговицы в новой крысиной модели водянистой сухости глаз. Invest Ophtalmol. Vis.Sci. 56: 6981. https://doi.org/10.1167/iovs.15-17497
  • • Ахмеров Р.Р., Зарудий Р.Ф., Бочкова О.И. (2011).Плазмолифтинг (Plasmolifting) – лечение возрастной атрофии кожи, аутоплазмы, богатой тромбоцитами. Эстетическая Мед. 2:181-187
  • • Брейди К.Ф., Мишо М.Т., Велихозский А., Стайн Дж.М. (2018). Ретроспективный анализ глазных невропатий у собак с диабетом после операции по удалению катаракты. Вет. Офтальмол. 00: P1-10.
  • • Черри Р.Л., Джоди Д. (2018). Оценка слизистой оболочки полости рта собак в качестве потенциального аутотрансплантата для лечения сухого кератоконъюнктивита. Вет.Офтальмол. 21(1): 48–51. https://doi.org/10.1111/vop.12477
  • • де Кейрос К.Б., Перейра ТдСФ, Араужо МСС, Гомес Р.С., Коимбра Р.С. (2018). Ресвератрол оказывает противовоспалительное и нейропротекторное действие на модели пневмококкового менингита у новорожденных крыс путем модулирования miRNome гиппокампа. Мол. Нейробиол. 1–16. https://doi.org/10.1007/s12035-018-1037-5
  • • Данн Дж. (2014). Руководство по диагностической цитологии собак и кошек. Уайли Блэквелл. 288. https://doi.org/10.1002/9781118823040
  • • Ерин И.С., Ватников Ю.А., Сахно Н.В. (2017).Комбинированная терапия сухого кератоконъюнктивита у собак с использованием аутологичной обогащенной тромбоцитами плазмы. Русский Дж. Агрик. Социально-экономические науки. 6 (66): 374-379. https://doi.org/10.18551/rjoas.2017-06.45
  • • Эссон Д.В. (2015). Клинический атлас офтальмологических болезней собак и кошек. Уайли Блэквелл. 344. https://doi.org/10.1002/9781118840801
  • • Гронкевич К.М., Джулиано Э.А., Шарма А., Мохан Р.Р. (2017). Влияние местного применения гиалуроновой кислоты на заживление ран роговицы у собак: пилотное исследование.Вет. Офтальмол. 20: 123–130. https://doi.org/10.1111/vop. 12379
  • • Йонссон Р., Брокстад К.А., Йонссон М.В. (2018). Современные представления о синдроме Шегрена – критерии классификации и биомаркеры. Евро. Дж. Устные науки. 126(1): 37–48. https://doi.org/10.1111/eos.12536
  • • Ким К.С., Джо К., Ли И.С., Ким Дж. (2016). Местное применение экстракта косточек абрикоса улучшает симптомы сухости глаз у мышей с односторонним эксцизионным удалением слезной железы. Питательные вещества. 8: 750. https://doi.org/10.3390/nu8110750
  • • Kim JH, Kim EJ, Kim YH, Kim YI, Lee SH, Jung JC, Lee KW, Park YJ (2015).Эффекты in vivo аналогов простагландинов без консервантов и с консервантами: исследование поверхности глаза мыши. Корейский J. Optalmol. 29: 270–279. https://doi.org/10.3341/kjo.2015.29.4.270
  • • Ким Й.Х., Чон Дж.С., Юнг С.И., Ю С., Ли К.В., Пак Й.Дж. (2016). Сравнение эффективности фторометолона с хлоридом бензалкония и без него при заболеваниях поверхности глаза. Роговица. 35: 234–242. https://doi.org/10.1097/ICO.0000000000000695
  • • Киршвенг Б., Тилингер Д.М., Хегели Б., Саму Г., Татраальджай Д., Фёльдес Э., Пукански Б. (2018).Стабилизация расплава полиэтилена природными антиоксидантами: сравнение рутина и кверцетина. Евро. Полим. Дж. 103: 228–237. https://doi.org/10.1016/j.eurpolymj.2018.04.016
  • • Ковач М., Сучков М., Алиев Р., Виноградова Т. (2014). Применение богатой тромбоцитами плазмы при лечении повреждения сухожилия глубокого сгибателя лошади. Современная вет. Мед. 1: 48-50.
  • • Красников А.В., Анников В.В., Ватников Ю.А., Сотникова Е.Д., Куликов Е.В., Паршина В.И. (2016). Анализ биоинтеграции дентальных имплантатов у животных.биол. Мед. 8(4): 4. https://doi.org/10.4172/0974-8369.1000303
  • • Куликов Е.В., Ватников Ю.А., Паршина В.И., Сотникова Е.Д., Вилковысский И.Ф., Попова И.А., Кочнева М. В., Карамян А.С. (2017). Особенности патогистологической диагностики семейного амилоидоза шарпея. Азиатская Дж. Фарма. 11(1): S152-S157
  • • Ли Х.Дж., Джун Р.М., Чо М.С., Чой К.Р. (2015). Сравнение изменений поверхности глаза после применения двух разных аналогов простагландина F2α, содержащих хлорид бензалкония или поликвад, в глазах кролика.Кутан. Окул. Токсикол. 34: 195–202. https://doi.org/10.3109/15569527.2014.944650
  • • Лубковская А., Долеговская Б., Банфи Г. (2012). Содержание факторов роста в PRP и их применение в медицине. Дж. Биол. Регул. Хоумост. Агенты. 26(2 Приложение 1):3S-22S.
  • • Маркс РЭ (2004). Богатая тромбоцитами плазма: доказательства в поддержку ее использования. J. Oral Maxillofac Surg. 62: 489-496. https://doi.org/10.1016/j.joms.2003.12.003
  • • Мартин-Аларкон Л., Шмидт Т.А. (2016). Реологические эффекты макромолекулярных взаимодействий в синовиальной жидкости. Биореология. 53: 49–67. https://doi.org/10.3233/BIR-15104
  • • Мэн И.Д., Бартон С.Т., Мекум Н.Е., Куросэ М. (2015). Чувствительность роговицы после удаления слезной железы у крысы. Вкладывать деньги. Офтальмол. Вис. науч. 56: 3347–3354. https://doi.org/10.1167/iovs.15-16717
  • • Митрохина Н.В., Ватников Ю.А., Сотникова Е.Д., Куликов Е.В. (2014). Оценка риска рецидива остеосаркомы при реплантации длинных костей собак. биол. Мед. 6(1): БМ-006-14
  • • Оливейра Дж.К., Уильямс Д.Л., Боллманн С. (2019).Сравнительная эффективность местного применения оклацитиниба 0,1% и такролимуса 0,01% при сухом кератоконъюнктивите собак. Вет. Офтальмол. 6 февраля. https://doi.org/10.1111/vop.12634
  • • Пфлюгфельдер С.К., Биан Ф., Де Пайва С. (2017). Матриксная металлопротеиназа-9 в патофизиологии и диагностике синдрома сухого глаза. Металлопротеиназы Мед. 4: 37–46.
  • • Пфлюгфельдер С.К., Биан Ф., Гумус К. (2018). Тяжесть синдрома Шегрена Сухой кератоконъюнктивит увеличивается с увеличением процента конъюнктивальных антигенпрезентирующих клеток.Междунар. Дж. Мол. науч. 19: 2760 П-1-9. https://doi.org/10.2147/MNM.S107246
  • • Шерер С.С., Тобалем М. (2012). Неактивированные тромбоциты по сравнению с активированными тромбином на заживление ран и дифференцировку фибробластов-томиофибробластов in vivo и in vitro. Пластиковая реконструкция. Surg. 46-54. https://doi.org/10.1097/PRS.0b013e3182362010
  • • Шилкин А.Г., Войтеха М.А., Павлова Т.Н., Ротанов Д.А., Новикова К.А. (2017). Применение обогащенной тромбоцитами плазмы в ветеринарной офтальмологии. Русский Вет. Дж. 2:6-9.
  • • Стерн М.Е., Пфлюгфельдер С.К. (2017). Чему мы научились на животных моделях синдрома сухого глаза? Междунар. Офтальмол. клин. 57: 109–118. https://doi.org/10.1097/IIO.0000000000000169
  • • Табери Х.М. (2012). Сухой кератоконъюнктивит и филаментарная кератопатия. Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 2012. 1-2. https://doi.org/10.1007/978-3-642-31028-7
  • • Temple-Wong MM, Ren S, Quach P, Hansen BC, Chen AC, Hasegawa A (2016). Концентрация гиалуронана и распределение по размерам в синовиальной жидкости коленного сустава человека: изменения с возрастом и дегенерацией хряща.Артрит Рез. тер. 18: 18. https://doi.org/10.1186/s13075-016-0922-4
  • • Ценг К.Л., Сегачян Дж., Бюрнуф Т. (2015). Животные модели для оценки терапевтической эффективности человеческой сыворотки и лизатов тромбоцитов, преобразованных в сыворотку, при синдроме сухого глаза: лучше увидеть, чем поверить. Трансфус. Афер. 53: 95–98. https://doi.org/10.1016/j.transci.2015.05.016
  • • Цубота К., Ёкои Н., Симадзаки Дж. , Ватанабэ Х., Догру М., Ямада М., Киносита С., Ким Х.М., Чах Х.В., Хён Дж.Й. (2017). Новые взгляды на определение и диагностику синдрома сухого глаза: согласованный отчет Азиатского общества синдрома сухого глаза.Окул. Серф. 15: 65–76.
  • • Ватников Ю.А., Сахно Н.В., Сотникова Е.Д., Куликов Е.В., Паршина В.И., Трошина Н.И. (2015). Клинический контроль трансфузии эритроцитарной массы при острой хирургической патологии, такой как расширение желудка и заворот желудка у собак. Биомед. Фармакол. Дж. 8(2): 711-717. https://doi.org/10.13005/bpj/817
  • • Уильямс Д.Л., Тиге А. (2018). Иммуногистохимическая оценка популяций лимфоцитов в никтитановых железах нормальных собак и собак с сухим кератоконъюнктивитом.Откройте вет. Дж. 8(1): 47-52. https://doi.org/10.4314/ovj.v8i1.8
  • • Уильямс Д.Л., Виростко Б.М., Гам Г., Манн Б.К. (2017). Гидрогель на основе сшитой ГК для местного применения ускоряет закрытие дефектов эпителия роговицы и восстановление язв стромы у домашних животных. Вкладывать деньги. Офтальмол. Вис. науч. 58: 4616–4622. https://doi.org/10.1167/iovs.16-20848
  • • Уилмис Д.А. (2007). Роль перикорнеальной слезной пленки в патогенезе синдрома сухого глаза. Ежемесячный журнал J. Vet. Мед. 11:54.
  • • Ян Кью, Чен Зи, Лю С.П., Ву К.Л. (2016). Сверхэкспрессия карбоангидразы 1 в птеригиуме. Междунар. Дж. Офтальмол. 9: 931–932.
  • • Ян Ц., Чжан Ю., Лю С., Ван Н., Сун З., Ву К. (2017). Сравнение эффектов хлорида бензалкония на поверхности глаз мышей C57BL/6 и BALB/c. Междунар. Дж. Мол. науч. 18: 509–513. https://doi.org/10.3390/ijms18030509
  • • Yingfang, F, Zhuang B, Wang C, Xu X, W Xu, Lv Z (2016). Мицеллы пимекролимуса проявляют превосходный терапевтический эффект при сухом кератоконъюнктивите.Коллоидный серфинг. Биоинтерфейсы. 140: 1–10. https://doi.org/10.1016/j.colsurfb.2015.11.059
  •  

     

     

    Microsoft Word — 1_alles.

    docx

    %PDF-1.4 % 727 0 объект > эндообъект 728 0 объект >/Шрифт>>>/Поля[]>> эндообъект 749 0 объект > эндообъект 1706 0 объект > эндообъект 4429 0 объект >поток Acrobat Distiller 10.1.16 (Windows)PDF/X-1a:2001PDF/X-1:2001FalsePScript5.dll Версия 5.2.22021-06-03T12:24:49+02:002021-06-03T10:41:38+02:002021-06-03T12:26:10+02:00application/pdf

  • Microsoft Word — 1_alles.docx
  • Анкер
  • PDF/X-1a:2001PDF/X-1:20011uuid:04c2fd19-0c42-4641-a546-ce7e2e048bb0uuid:0ccc854f-1433-4f08-8ae8-4d91058d7d26
  • 12021-06-03T10:283:0822 2011533741com.enfocus.cp2xmp-toolkit1com.enfocus.statuscheck212.3
  • /All/PDF/Metadata/CertifiedPDF
  • /Все/PDF/Метаданные/Информация о документе
  • /Все/PDF/Метаданные/XMP
  • /Все/PDF/PageProperties/PageContent/RenderingContent/Color
  • /Все/PDF/PageProperties/PageContent/RenderingContent/Шрифт
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Enfocus StatusCheck 12, обновление 3
  • 22021-06-03T10:31:032021-06-03T10:32:040com. enfocus.cp2xmp-toolkit1com.enfocus.statuscheck212.3
  • /All/PDF/Metadata/LabelsAndTrees
  • /Все/PDF/PageProperties/PageBoxes
  • /Все/PDF/PageProperties/PageContent
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Enfocus StatusCheck 12, обновление 3
  • 32021-06-06T17:27:092021-06-06T17:29:0116922329com.enfocus.cp2xmp-toolkit1com.enfocus.statuscheck212.3
  • /All/PDF/DocumentComposition
  • /Все/PDF/Метаданные/Ярлыки и деревья
  • /Все/PDF/Метаданные/Эскизы
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Enfocus StatusCheck 12, обновление 3
  • 42021-06-06T17:42:402021-06-06T17:59:130com. enfocus.cp2xmp-toolkit1com.enfocus.statuscheck212.3
  • /All/PDF/DocumentComposition
  • /Все/PDF/Метаданные/Эскизы
  • /All/PDF/PageProperties/Annotations/AnnotationBoundingBoxes
  • /Все/PDF/PageProperties/PageContent
  • /Все/PDF/PageProperties/PageContent/RenderingContent
  • /Все/PDF/PageProperties/PageContent/RenderingContent/Geometry
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Enfocus StatusCheck 12, обновление 3
  • 52021-06-06T17:59:322021-06-06T18:25:3416426534com.enfocus.cp2xmp-toolkit1com.enfocus.statuscheck212.3
  • /All/PDF/PageProperties/Annotations
  • /All/PDF/PageProperties/Annotations/AnnotationBoundingBoxes
  • /Все/PDF/PageProperties/PageContent
  • /Все/PDF/PageProperties/PageContent/RenderingContent
  • /Все/PDF/PageProperties/PageContent/RenderingContent/Geometry
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Enfocus StatusCheck 12, обновление 3
  • 62021-06-07T13:42:062021-06-07T13:45:1716589751com. enfocus.cp2xmp-toolkit1com.enfocus.statuscheck212.3
  • /All/PDF/PageProperties/Annotations
  • /All/PDF/PageProperties/Annotations/AnnotationBoundingBoxes
  • /Все/PDF/PageProperties/PageContent
  • /Все/PDF/PageProperties/PageContent/RenderingContent
  • /Все/PDF/PageProperties/PageContent/RenderingContent/Geometry
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Enfocus StatusCheck 12, обновление 3
  • 72021-06-08T16:14:512021-06-08T16:16:110com.enfocus.cp2xmp-toolkit1com.enfocus.statuscheck212.3
  • /All/PDF/DocumentComposition
  • /Все/PDF/Метаданные/Эскизы
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Enfocus StatusCheck 12, обновление 3
  • 82021-06-08T16:16:232021-06-08T16:33:430com. enfocus.cp2xmp-toolkit1com.enfocus.statuscheck212.3
  • /All/PDF/DocumentComposition
  • /Все/PDF/Метаданные/Эскизы
  • /Все/PDF/Свойства страницы/Аннотации
  • /All/PDF/PageProperties/Annotations/AnnotationBoundingBoxes
  • /Все/PDF/PageProperties/PageContent
  • /Все/PDF/PageProperties/PageContent/RenderingContent/Geometry
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Enfocus StatusCheck 12, обновление 3
  • 92021-06-25T12:25:592021-06-25T12:27:070com.enfocus.cp2xmp-toolkit1com.enfocus.statuscheck212.3
  • /All/PDF/DocumentComposition
  • /Все/PDF/Метаданные/Эскизы
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Enfocus StatusCheck 12, обновление 3
  • 102021-06-25T12:29:292021-06-25T12:30:050com. enfocus.cp2xmp-toolkit1com.enfocus.statuscheck212.3
  • /All/PDF/DocumentComposition
  • /Все/PDF/Метаданные/Эскизы
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Enfocus StatusCheck 12, обновление 3
  • 112021-06-25T12:34:432021-06-25T12:35:220com.enfocus.cp2xmp-toolkit1com.enfocus.statuscheck212.3
  • Enfocus CertifiedPDF2XMP Toolkit v1
  • Сертифицированный Enfocus PDF2XMP Toolkit v1
  • Enfocus StatusCheck 12, обновление 3
  • Предполетная связь.enfocus.preflight1.0com.enfocus.pitstop-pro12. 31Unknown90a92b2ab14da83b549ae1490a0de766
  • Enfocus Preflight-Zertifikat v1.0
  • Enfocus PitStop Pro 12, обновление 3
  • Entspricht Preflight-Profil PDF/X-1a:2001 v5.0
  • 2 Фелера, 2 Корректурен
  • /Все/PDF/DocumentEncoding
  • /Все/PDF/Метаданные
  • /Все/PDF/OptionalContentConfiguration
  • /Все/PDF/PageProperties
  • НаследиеИстина
  • PDF/X-1a:2001 v5.0
  • конечный поток эндообъект 729 0 объект > эндообъект 693 0 объект > эндообъект 722 0 объект > эндообъект 4327 0 объект >поток HWn6}3 nlI7ŽƀMb}Y0cHrE˖d;[«3!rpmk…Ζictu2VBwG’A>;[fxssc\E$Ƙ HE1^lCvGhS(Uj],Ʉny =IϧvRba[pZ{93$:DΝ ‘k» ] ()cMtylM1]^ «Q*{d7F\CvŰ+hS*ÈNAse. f1ǡXsᶒc_lrar=GO| cr7d.0tdJ]хtnv# xBYZ͘iSvV26t~?*NYgڮI.WqFB_4ή}Mu\8 >[email protected]Ӎ`CTQ2FN ��fOijh5:&» KRY,8f,( TY-d]MM1_>%ŝPYdF|&\ HDiB[*Тx5

    %PDF-1.7 % 763 0 объект > эндообъект внешняя ссылка 763 121 0000000016 00000 н 0000004170 00000 н 0000004415 00000 н 0000004457 00000 н 0000004498 00000 н 0000004534 00000 н 0000004872 00000 н 0000004980 00000 н 0000005088 00000 н 0000005195 00000 н 0000005301 00000 н 0000005407 00000 н 0000005513 00000 н 0000005593 00000 н 0000005673 00000 н 0000005753 00000 н 0000005833 00000 н 0000005913 00000 н 0000005993 00000 н 0000006073 00000 н 0000006206 00000 н 0000006252 00000 н 0000006396 00000 н 0000006495 00000 н 0000006589 00000 н 0000006647 00000 н 0000006725 00000 н 0000008107 00000 н 0000008481 00000 н 0000008721 00000 н 0000009206 00000 н 0000009763 00000 н 0000010290 00000 н 0000010726 00000 н 0000010802 00000 н 0000012535 00000 н 0000012875 00000 н 0000013032 00000 н 0000013231 00000 н 0000013389 00000 н 0000013466 00000 н 0000015173 00000 н 0000016659 00000 н 0000018132 00000 н 0000019622 00000 н 0000019851 00000 н 0000020015 00000 н 0000020216 00000 н 0000020421 00000 н 0000022004 00000 н 0000023541 00000 н 0000025061 00000 н 0000028150 00000 н 0000031758 00000 н 0000035507 00000 н 0000038622 00000 н 0000038905 00000 н 0000039281 00000 н 0000039958 00000 н 0000040316 00000 н 0000040997 00000 н 0000042023 00000 н 0000332831 00000 н 0000333379 00000 н 0000333509 00000 н 0000349293 00000 н 0000349332 00000 н 0000349881 00000 н 0000350013 00000 н 0000407227 00000 н 0000407266 00000 н 0000407821 00000 н 0000407962 00000 н 0000424721 00000 н 0000424760 00000 н 0000424831 00000 н 0000424902 00000 н 0000424967 00000 н 0000425043 00000 н 0000425119 00000 н 0000425232 00000 н 0000425304 00000 н 0000425640 00000 н 0000425788 00000 н 0000425889 00000 н 0000426033 00000 н 0000426169 00000 н 0000426297 00000 н 0000426468 00000 н 0000426575 00000 н 0000426710 00000 н 0000426870 00000 н 0000426969 00000 н 0000427088 00000 н 0000427204 00000 н 0000427411 00000 н 0000427544 00000 н 0000427769 00000 н 0000427897 00000 н 0000428080 00000 н 0000428281 00000 н 0000428501 00000 н 0000428641 00000 н 0000428773 00000 н 0000428982 00000 н 0000429157 00000 н 0000429271 00000 н 0000429403 00000 н 0000429517 00000 н 0000429649 00000 н 0000429763 00000 н 0000429895 00000 н 0000430009 00000 н 0000430141 00000 н 0000430255 00000 н 0000430387 00000 н 0000430499 00000 н 0000430629 00000 н 0000430769 00000 н 0000430948 00000 н 0000002716 00000 н трейлер ]>> startxref 0 %%EOF 883 0 объект >поток xڜUkpe=&M46IJCPjEhK^:)X4m5 %г

    .

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.